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摘要：克隆已成為常被提及的詞匯，克隆大多是利用一些生物技術經無性生殖培養(yǎng)出和原來的個體有完全相同基因的個體或者種群?？寺∝i具有重要的應用價值，包括培養(yǎng)優(yōu)良種豬、制備基因修飾豬、保護珍貴和瀕危豬種等。要獲得特定基因型的克隆豬，受到很多因素的影響，有關克隆豬的技術，科學家一直在探索和研究。該文針對克隆豬的相關研究，論述有關克隆豬的技術研究方法、發(fā)展、應用及重要意義。

關鍵詞：克隆豬；技術研究；發(fā)展；應用

0引言

優(yōu)良種豬的優(yōu)良基因無法完全在其后代身上進行保留，且1頭優(yōu)良種豬只能在有限的時間被利用，而這就是問題的所在。需要一種使優(yōu)良種豬得到最大化利用的方法，于是體細胞克隆技術開始應用于豬，通過使用克隆技術，將種豬的優(yōu)良基因保存下來，克隆豬由此產生。

1克隆豬概念

1.1克隆

克隆大多是利用一些生物技術經無性生殖培養(yǎng)出和原來的個體有完全相同基因的個體或者種群。1997年2月23日，在英國蘇格蘭羅斯林研究所，研究人員通過克隆山羊體細胞，使克隆羊多莉誕生，代表多莉是一只基因結構和原來的供體完全相同的小羊，世界輿論隨即為之嘩然。目前為止，世界上被克隆的高等物種已有20多種，牛、鼠、獼猴、豬都已經相繼被克隆出來，還有很多的動物，如馬、鹿、兔、狗等，也都已被成功的克隆。但每一項具有跨時代意義的新科技，都可能會有爭議，克隆的出現讓很多人都感到恐懼和擔憂。在法律和道德的雙重約束下，研究人員逐漸掌握克隆技術的正確打開方式，克隆技術慢慢和人們的生活有關聯。

1.2克隆豬

克隆豬通常先將1個卵母細胞去核，將供體豬的細胞核移入其中形成細胞的重組，需要對這個重組細胞進行激活，細胞會逐步分裂，在形成胚胎后將其在代孕母豬的子宮內植入，最后會產生和供體豬相同的克隆豬。

2克隆豬技術研究

要獲得特定基因型的克隆豬，受到很多因素的影響，包括供體細胞類型、核移植的方法、卵的激活、胚胎的培養(yǎng)等。有關克隆豬的技術，科學家一直在探索和研究。

2.1供體細胞類型選擇

在之前的各種研究中，在各種物種中已有多種細胞能作為供體細胞完全克隆，如淋巴細胞、胚胎干細胞等不同類型的體細胞。而成纖維細胞和卵丘細胞也可作為供體細胞，參與到豬的克隆。在豬的體細胞核移植中，以往經常將皮膚的成纖維細胞用于轉基因豬的克隆，易于獲得且能在體外進行相對較長時間的傳代培養(yǎng)。

2.2胚胎重構

在對細胞枝進行移植前，需要將卵母細胞去核，但去核用品大都是化合物，對后續(xù)的胚胎發(fā)育具有毒副作用。有2種方法可以將供體核在去核的卵母細胞質中進行移入，第一，在卵周隙內將供體細胞進行注射，并以電刺激的方式促進二者融合。第二，直接在去核卵母細胞中以顯微注射法注入供體細胞，如果使用第1種方法，去核卵母細胞會吸收所有供體細胞成分。在進行胚胎重構操作后，應對重構胚胎進行激活，激活方式方式分為化學激活法和物理激活法，在激活胚胎后，才能確保后續(xù)的正常發(fā)育。

2.3胚胎移植

胚胎移植時，需要盡快將胚胎放入代孕母豬體內，為減少體外培養(yǎng)條件對核移植胚胎的副作用，且為提高成功率，需要進行大量移植，若出現胚胎數量缺乏的狀況，需要采取下述2種方式進行彌補。第一，以輔助胚胎進行移植。第二，在第12天使用雄二醇，這是對懷孕信號的一種母體自主識別能確保妊娠的維持。但目前仍舊無法肯定哪種方法更具效果，包括在后續(xù)環(huán)節(jié)對胚胎發(fā)育是否會產生影響。

3克隆豬發(fā)展

3.1發(fā)展歷程

在去核的卵母細胞中將豬供體細胞核進行移入，這需要運用到細胞水平的顯微外科手術，若提高這些技術的熟練程度，需要通過大量的練習才能完成。對于豬克隆技術而言更具難度。距離首例體細胞克隆豬出現到今年已有21年，2005年，我國開始培育第一例克隆豬，掌握有關克隆豬的技術和方法。截至目前，包含我國已經至少有8個國家具備生產克隆豬的能力。豬的體細胞克隆技術發(fā)展得非常迅速，有些國家已經開始研究在克隆技術的應用方面。如在歐盟、美國等發(fā)達地區(qū)和國家，已著手對動物源性產品進行研究，并出臺奶制品、克隆動物肉的食品安全草案，也對克隆技術在養(yǎng)豬產業(yè)中的推廣應用起到較強助推作用。

3.2發(fā)展前景

克隆技術是一項難度性較強的技術，同時，也是一項新興技術，若確?？寺〖夹g的不斷完善，需要經歷一個逐步發(fā)展的過程。此外，也應構建一套系統、完善的動物克隆技術體系，包括選擇及培育供體，盡可能地在生產成本上降低，在克隆豬的生產效率上提高。需要不斷地完善動物克隆生產體系、不斷地設法提高克隆效率，最終使體細胞克隆技術逐漸發(fā)展，發(fā)揮更大的作用。

4克隆豬應用

克隆豬具有重要的應用價值。包括培養(yǎng)優(yōu)良種豬、制備基因修飾豬、保護珍貴和瀕危豬種及對轉基因動物的研究等。對于優(yōu)秀的種豬，可以稱得上是多方需求。高質量的種豬像是生豬產業(yè)的金子，是所有養(yǎng)豬者都非?？释?。另外，還可利用克隆豬增加瀕危動物的數量，保護瀕危豬種。同時，通過對克隆技術的利用，能夠生產出與人類同源的組織器官，有望解決免疫排斥的問題，且克隆的組織和器官也可以供醫(yī)學臨床使用。

5克隆豬的意義

在畜牧生產中，理論上克隆技術可生產出基因型完全一致的后代，能極大地提高育種效率，可將某一種群改良建立和定向培育一條高效途徑，如對優(yōu)良的種公豬進行克隆復制。結合中國養(yǎng)豬行業(yè)現狀進行分析，若通過克隆技術獲得高品質種豬，可有效提高肉質、降低成本，還能突破自我發(fā)展圈層，打破發(fā)達國家對頂級種豬市場的壟斷，突破種豬引進的貿易壁壘，極大改善養(yǎng)豬生產鏈條，全面提高我國的養(yǎng)豬效益。而如果將克隆技術與轉基因動物技術巧妙地結合起來，或許可實現常規(guī)育種方法無法實現的選育目標。同時，利用克隆技術還可別除免疫排斥基因的克隆豬，有望提供大量的器官以進行異體器官移植的臨床和應用研究。隨著克隆技術的發(fā)展，豬體細胞核移植正在逐步走向成熟和完善?？寺∝i的出現和發(fā)展意義非凡，這對人們的生活的方方面面都有很大的幫助和貢獻。

6結束語

克隆豬的應用價值占有很高的地位和富有重要的意義。要獲得特定基因型的克隆豬，受到很多因素的影響，包括供體細胞類型、核移植的方法、卵的激活、胚胎的培養(yǎng)等。本文主要探討克隆技術和克隆豬的發(fā)展歷程，對克隆豬的未來應用進行分析和展望。

作者:姚智璇 單位:吉林大學動物醫(yī)學學院