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1.基本概念很重要
分子生物學(xué)中有很多名詞會讓初學(xué)者感到不可理喻,有的學(xué)生即使對其有專業(yè)感覺也很難把它說清楚,這直接導(dǎo)致學(xué)生分子生物學(xué)學(xué)習(xí)障礙的產(chǎn)生。所以老師要做的第一件事就是向?qū)W生教授概念,澄清概念和鑒別概念。(1)教授概念如果這個概念是學(xué)生在其他科目中沒有接觸到的全新概念,老師就需要對其給出一個鮮明準(zhǔn)確的定義,這點是每個老師都應(yīng)該做到的,比較常規(guī),此略。(2)澄清概念主要指的是幫助學(xué)生理順概念間的相互關(guān)系。例如:染色體,染色質(zhì),核小體,螺線管,超螺線管,DNA(RNA),蛋白質(zhì)這一組名詞,我們應(yīng)該掌握他們的內(nèi)在聯(lián)系。染色體是由DNA(RNA)和蛋白質(zhì)組成的。染色體的基本組成單位是核小體,一個個核小體成串排列在染色質(zhì)細絲上。核小體是DNA(RNA)纏繞在八聚體蛋白被壓縮成1/7的結(jié)果,核小體纏繞成螺線管又壓縮了1/6,進一步壓縮成1/40的超螺線管,超螺線管再壓縮到1/5成為染色單體??梢钥吹饺旧w,染色質(zhì),核小體,螺線管,超螺線管的組成都是DNA(RNA)和蛋白質(zhì),只不過在不同情況下存在不同形態(tài)而對應(yīng)不同名稱而已。對于很多同學(xué)來講,這種概念的澄清是非常必要的。(3)鑒別概念剛才說的是同一物質(zhì)不同形態(tài)的名稱問題,這里指的就是完全一樣的內(nèi)涵對應(yīng)不同名字的問題。例如:在真核生物基因表達調(diào)控內(nèi)容中,通用型轉(zhuǎn)錄因子與一般輔助因子,同源域與同源盒等等,雖然說法不同但表示相同的內(nèi)容。這些情況如果老師對學(xué)生缺乏交待,會造成大部分學(xué)生概念認識上的混亂。如果在分子生物學(xué)授課過程中能夠使學(xué)生對基本概念有一個清晰明確地認識,后續(xù)的教學(xué)任務(wù)才有望順利完成。
2.建立知識體系
以比較權(quán)威的分子生物學(xué)教材——北京大學(xué)教授朱玉賢的《現(xiàn)代分子生物學(xué)》——為例,分子生物學(xué)的教學(xué)內(nèi)容分以下章節(jié):染色體與DNA;從DNA到RNA;從mRNA到蛋白質(zhì);分子生物學(xué)研究法;原核基因表達調(diào)控模式;真核基因表達調(diào)控規(guī)律;疾病與人類健康;基因與發(fā)育;基因組與比較基因組學(xué)。分子生物學(xué)的核心基礎(chǔ)知識集中體現(xiàn)在前六部分,后面內(nèi)容更多的是前面知識的綜合運用。當(dāng)課程進行到真核基因表達調(diào)控規(guī)律一般內(nèi)容的時候,筆者會幫助學(xué)生回首前面的所有內(nèi)容,并將其納入到此為止揭示出的理論框架中來,即真核基因表達調(diào)控的核心內(nèi)容是順式作用元件與反式調(diào)控因子之間相互作用的過程。這說明什么呢?DNA經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯生成蛋白質(zhì),真核基因表達調(diào)控是蛋白質(zhì)因子與DNA序列間作用,原核生物雖以操縱子為模型來講述其調(diào)控過程,但實際上也是通過蛋白質(zhì)因子與DNA的作用來完成的。雖然真核生物與原核生物各個方面存在很多不同,但我們看到了其大同的一面,這樣我們就可以把有關(guān)DNA,蛋白質(zhì)以及一切從不同角度對真原核生物表達調(diào)控進行描述或分類的內(nèi)容都鑲嵌到這個框架相應(yīng)的位置上。如果學(xué)生做到了這一點,他會有豁然開朗,別有洞天之感,分子生物學(xué)理論學(xué)習(xí)道路上的一切陰霾就此消散。至于基因治療,發(fā)育生物學(xué),免疫學(xué)等是在此基礎(chǔ)上結(jié)合其他課程內(nèi)容,對分子生物學(xué)知識的綜合運用,研究方向相對獨立,只要學(xué)生有了前面的知識框架基礎(chǔ),再來看這些內(nèi)容,會多少找到用公式原理解應(yīng)用題的感覺。在筆者的分子生物學(xué)理論教學(xué)過程中,一直把知識體系的建立放在重中之重的位置,這比要求學(xué)生掌握很多細節(jié)知識更重要。
3.培養(yǎng)學(xué)生用哲學(xué)方式看問題
Abstract: Molecular biology is the frontier of life science. For the students of medical laboratory technology, mastering the molecular biology technology is the premise of scientific researches. The old course of medical inspection technology can not meet the needs of clinical laboratory diagnosis. In order to improve the ability of students in higher vocational colleges in the future work, this paper analyzes the characteristics of the students in higher vocational laboratory technology, the training mode of talents, the present situation and direction of employment, the arrangement of molecular biology curriculum and the research direction of molecular biology technology, discusses the necessity of the course of molecular biology in higher vocational laboratory technology and how to better grasp the basic theory and technology of molecular biology for the students of in higher vocational colleges to lay a good foundation for the future clinical examination.
關(guān)鍵詞:分子生物學(xué);高職;醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù);課程開設(shè)
Key words:molecular biology;higher vocational college;medical laboratory technology;course offerings
中圖分類號:G420 文獻標(biāo)識碼:A 文章編號:1006-4311(2017)13-0239-02
0 引言
醫(yī)學(xué)教育已經(jīng)進入了一個新的發(fā)展階段,要求醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)人才既要具備扎實的專業(yè)基礎(chǔ),也要具備較強的實踐和創(chuàng)新能力及一定的科研能力,同時具備豐富的臨床檢驗經(jīng)驗。DNA與蛋白質(zhì)作為分子生物學(xué)檢驗的特定對象,該方法能快速、準(zhǔn)確地對疾病進行確診,作為一種診斷依據(jù)有助于精準(zhǔn)醫(yī)療,便于對不同患者進行針對性治療。當(dāng)前社會很多醫(yī)院、生物研究所及第三方檢測機構(gòu)都在開展和應(yīng)用該技術(shù),其已經(jīng)成為了醫(yī)學(xué)檢驗的新興領(lǐng)域。世界上很多大學(xué)都將分子生物學(xué)設(shè)置為必修或選修課供研究生和本科生選擇。鑒于科學(xué)的發(fā)展和高職院校對人才的需求,紅河衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院已經(jīng)把分子生物學(xué)技術(shù)列為專業(yè)新方向。
1 高職檢驗專業(yè)學(xué)生的特點
由于高職院校招收的學(xué)生是最后一批錄取的學(xué)生,大多數(shù)學(xué)生的基礎(chǔ)較差,在高中生物知識非常有限的基礎(chǔ)上,學(xué)生對化學(xué)類課程的學(xué)習(xí)也比較淺薄。高職學(xué)生在校學(xué)習(xí)時間僅有兩年,第三年為臨床實習(xí)。一年級主要學(xué)習(xí)的專業(yè)必修課,二年級融入所有檢驗專業(yè)課,教學(xué)任務(wù)較繁重,學(xué)生對知識的掌握度很淺。我院已經(jīng)把理實比例控制在1:1甚至于1:2,保證理論夠用為原則,加強學(xué)生的實踐技能。因此醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)學(xué)生的實踐操作能力都相應(yīng)達標(biāo)。
2 人才培養(yǎng)模式
檢驗技術(shù)人才培養(yǎng)規(guī)格:為培養(yǎng)“實用型”、“技能型”檢驗技術(shù)人才,實踐能力強、社會適應(yīng)面寬,作為本專業(yè)人才培養(yǎng)規(guī)格的指導(dǎo)思想,將培養(yǎng)目標(biāo)設(shè)定在以社會需求為目標(biāo)、以就業(yè)為導(dǎo)向、以能力培養(yǎng)為本位,面向市場、面向職業(yè)、面向就業(yè)的方向,培養(yǎng)具有臨床醫(yī)學(xué)檢驗及衛(wèi)生檢驗的基本能力。
檢驗技術(shù)人才培養(yǎng)模式:主干課理論與實踐教學(xué)交融結(jié)合,以聯(lián)系實際學(xué)理論,在實踐中體驗和學(xué)習(xí)理論,在應(yīng)用中形成技術(shù)應(yīng)用能力;并以貫穿上述理念的培養(yǎng)方案、教師隊伍、教材、課程改革為保障的人才培養(yǎng)模式。如圖1。
3 就業(yè)面向
高職醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)畢業(yè)生的就業(yè)率相對穩(wěn)定,就紅河衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)學(xué)生的畢業(yè)調(diào)查來看:2015年12月通過調(diào)研報告顯示,70%的畢業(yè)生走入縣級及鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院檢驗科;20%的畢業(yè)生走入縣疾控及中心血站;8%的畢業(yè)生流向第三方檢驗及檢驗儀器公司;2%的業(yè)生從事其他行業(yè)。2016年12月調(diào)研報告顯示,50%的畢業(yè)生走入縣級、鄉(xiāng)鎮(zhèn)醫(yī)院的檢驗科;40%的畢業(yè)生流向第三方檢驗及檢驗儀器公司;10%的畢業(yè)生流向縣級疾控及中心血站。兩年的就業(yè)面向?qū)Ρ龋瑱z驗學(xué)生走入第三方檢驗、企業(yè)及試劑公司的比例突飛猛進。在與學(xué)生面談時,學(xué)生告訴我們:他們走入檢驗試劑、儀器公司或者生物制藥及基因診斷企業(yè)的人數(shù)還在不斷增加,大家都是互相推薦,走入企業(yè)對于高職檢驗學(xué)生的發(fā)展是比較有利的,而且進入企業(yè)以后,根據(jù)自己的個性特點,很好地發(fā)揮自己的特長,同樣可以做一些科學(xué)研究。
4 分子生物學(xué)課程內(nèi)容安排
教學(xué)內(nèi)容方面,分析生物學(xué)教材包括三大重點模塊,即分子生物學(xué)基本理論、分子生物學(xué)技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)在臨床診斷中的應(yīng)用。第一模塊樹立的目的是幫助學(xué)生建立基本的理論框架,其內(nèi)容主要包括腫瘤相關(guān)基因、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄修飾、RNA復(fù)制、中心法則等;第二模塊的內(nèi)容主要包括DNA重組技術(shù)、聚合酶鏈技術(shù)、核酸分子雜交技術(shù)、核酸的分離與純化等臨床檢驗中常用的基本技術(shù),該模塊將教學(xué)重點放在了介紹各技術(shù)的基本原理及臨床應(yīng)用。此外,為了拓寬學(xué)生的視野,也會適當(dāng)介紹一些新的檢測方法和技術(shù);第三模塊主要內(nèi)容是講分子生物學(xué)檢驗技術(shù)的在多方面的應(yīng)用,比如個體識別、腫瘤及移植配型、遺傳性疾病、感染性疾病等,該模塊的學(xué)習(xí)能夠讓學(xué)生更加深入的了解和掌握分子生物學(xué),真正理解分子生物學(xué)檢驗技術(shù)的價值。
5 高職檢驗可開設(shè)的分子生物學(xué)技術(shù)
針對高職醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)學(xué)生的學(xué)制特點及人才培養(yǎng)模式,分子生物學(xué)課程的學(xué)習(xí)主要是為了學(xué)習(xí)基因診斷的基本技術(shù),因此,理論的學(xué)習(xí)依舊是夠用為原則,為了順應(yīng)社會的需求,高職檢驗把分子生物學(xué)課程納入重點,主要開展的基本技術(shù)應(yīng)該圍繞PCR進行。例如:核酸標(biāo)本的處理、核酸(DNA、RNA)提取、PCR擴增操作技術(shù)、PCR擴增產(chǎn)物的檢測分析、電泳(瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳)、PCR技術(shù)在臨床病原體檢測中的應(yīng)用。
6 分子生物學(xué)課程在高職醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)開設(shè)后效果預(yù)測
利用暑假調(diào)研,報告顯示大量高職學(xué)生流向企業(yè)、第三方檢驗及基因診斷技術(shù)部門工作時,起點低,適應(yīng)難,因為他們在校期間沒有接觸過分子生物學(xué)的基本理論和技術(shù)。近三年,我院檢驗實習(xí)生反應(yīng),進入檢驗科,有半月以上的時間納入PCR室,他們零起點,帶教老師對他們一無所知感到焦];走訪各縣市級醫(yī)院,我們的學(xué)生已經(jīng)在PCR實驗室工作的也很多,他們期望學(xué)弟學(xué)妹能夠在學(xué)校接觸分子生物學(xué)知識,當(dāng)今社會是分子的天堂,是醫(yī)學(xué)的前沿。因此,高職檢驗開設(shè)分子生物學(xué)課程后滿足了廣大用人單位的需求,把崗位需求與教學(xué)無縫對接就是我們?nèi)瞬排囵B(yǎng)的最終目的。
7 結(jié)束語
通過本次專項調(diào)研,對紅河州地區(qū)醫(yī)療衛(wèi)生單位醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)人才的現(xiàn)狀及需求有了全面了解。由于一系列醫(yī)改政策的出臺,以及對崗位人才要求的提升,二甲以上醫(yī)院及基層醫(yī)療機構(gòu)(含社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心)表示將很少招收高職專科生進入檢驗科工作。因此,高職畢業(yè)生今后主要的就業(yè)去向是第三方檢驗所、生物制藥公司、檢驗儀器試劑公司、基因診斷技術(shù)研究部和流通等用人單位,學(xué)院在制定醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)的培養(yǎng)目標(biāo)、課程結(jié)構(gòu)、發(fā)展趨勢都必須順應(yīng)社會需求,努力使培養(yǎng)目標(biāo)與用人單位實際需求相接軌。
參考文獻:
[1]馬敬峰,魯保富,陸開宏.基于學(xué)生創(chuàng)新精神和實踐能力培養(yǎng)的實驗教學(xué)內(nèi)容改革與實踐[J].中國高教研究,2008(11):92-93.
[關(guān)鍵詞]農(nóng)業(yè)院校 研究生 分子生物學(xué)雙語教學(xué) 課堂演講 應(yīng)用
[中圖分類號] G643 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 2095-3437(2015)11-0086-04
近年來,我國各行業(yè)日益與國際接軌,迫切需要既精通專業(yè)知識又能良好運用外語的高素質(zhì)人才。研究生的外語運用能力是衡量我國研究生培養(yǎng)是否滿足社會需求的標(biāo)準(zhǔn)之一。英語早已是全球語言,我國高校部分研究生專業(yè)課程實施漢英雙語教學(xué)(Chinese-English bilingual teaching)正是高校研究生教育致力于培養(yǎng)具有國際視野的高層次人才的重要舉措之一。
分子生物學(xué)是現(xiàn)代生命科學(xué)中發(fā)展最快的前沿學(xué)科之一,其理論和技術(shù)幾乎已滲透到農(nóng)業(yè)的所有領(lǐng)域。因此,在我國農(nóng)業(yè)院校,分子生物學(xué)被設(shè)計為“生物化學(xué)與分子生物學(xué)”、“植物學(xué)”和“作物遺傳育種”等眾多學(xué)科點的基礎(chǔ)課或?qū)W位課之一。然而,分子生物學(xué)內(nèi)容多、抽象性強、進展飛速,加上國內(nèi)高校尤其是農(nóng)業(yè)院校的分子生物學(xué)在教學(xué)與科研方面均與美、英等發(fā)達國家的存在較大差距,這決定了國內(nèi)師生只有借助英語才能迅捷、精確地掌握該學(xué)科知識,追蹤其最新進展。因此,我國部分農(nóng)業(yè)院校將研究生的分子生物學(xué)設(shè)計為漢英雙語教學(xué),以幫助學(xué)生借助英語更好地掌握分子生物學(xué)知識,同時提升學(xué)生的英語運用能力。
但是,與國內(nèi)綜合性大學(xué)相比,農(nóng)業(yè)院校研究生的生源質(zhì)量較差,一方面,學(xué)生的分子生物學(xué)知識薄弱,部分學(xué)生以前沒學(xué)過分子生物學(xué)或生化知識,個別跨專業(yè)的學(xué)生甚至缺乏生物學(xué)常識;另一方面,學(xué)生的英語基礎(chǔ)偏弱,“啞巴英語”是普遍現(xiàn)象。這樣一來,農(nóng)業(yè)院校實施研究生分子生物學(xué)漢英雙語教學(xué)面臨巨大困難,學(xué)生對該課充滿期待卻又焦慮不堪。因此,如何幫助學(xué)生接納該課程是教師亟須解決的難題。筆者在多年教學(xué)中初步證實,“課堂演講(class presentation)”是實現(xiàn)分子生物學(xué)漢英雙語課教學(xué)目標(biāo)的有效方法之一。
課堂演講在國內(nèi)外高校中均是一個歷久彌新的命題。演講是講話人處于中心地位在聽眾面前就某問題發(fā)表意見或闡述某事理的交際活動;狹義的課堂演講是指學(xué)生在課堂上就某話題陳述看法、觀點。在當(dāng)今社會,口才是人才的必備素質(zhì)之一,演講課是國外許多大學(xué)必開的一門課。早在1642年,哈佛大學(xué)就將演講作為必修內(nèi)容訓(xùn)練學(xué)生;在當(dāng)代美國高校,演講課被作為通識教育的必修科目,具有不可撼動的地位。在我國,最早為英語專業(yè)學(xué)生開設(shè)演講辯論課的是北京大學(xué)。但是,課堂演講在我國農(nóng)業(yè)院校研究生的分子生物學(xué)漢英雙語教學(xué)中的系統(tǒng)實踐卻迄今未見報道。
筆者針對我國農(nóng)業(yè)院校研究生分子生物學(xué)雙語教學(xué)舉步維艱、效果欠佳的現(xiàn)狀,結(jié)合多年教學(xué)實踐,探討了將學(xué)生課堂演講引入研究生分子生物學(xué)雙語教學(xué)的主要理論基礎(chǔ)、操作環(huán)節(jié)和實踐效果,旨在為我國農(nóng)業(yè)院校研究生分子生物學(xué)雙語教學(xué)的效果優(yōu)化提供參考。
一、我國農(nóng)業(yè)院校研究生分子生物學(xué)雙語教學(xué)中實施課堂演講的主要理論基礎(chǔ)
(一)實施課堂演講依托的是“輸出式”知識獲取理論
目前,我國高校的大部分課程均是單純的“輸入式”教學(xué),而徹底缺失了“輸出式”教學(xué)。教育家Swain的“輸出理論(output hypothesis)”認為:“輸出”可大大提高學(xué)習(xí)者特別是語言學(xué)習(xí)者的學(xué)習(xí)意識,對提高學(xué)習(xí)者的交際能力起著不可替代的作用;事實上,成功的專業(yè)知識和二語習(xí)得既需要大量“可理解輸入(comprehensible in?鄄put)”,又需要有效“可理解輸出(comprehensible out?鄄put)”。對學(xué)生而言,在農(nóng)業(yè)院校研究生分子生物學(xué)雙語教學(xué)中實施課堂演講正是一種專業(yè)知識和英語的雙重“強迫性輸出(pushed output)”,是一種以任務(wù)為導(dǎo)向?qū)W(xué)生置于真實“輸出”環(huán)境的“任務(wù)型教學(xué)”。在完成演講任務(wù)中,學(xué)生須經(jīng)過重構(gòu)在分子生物學(xué)和英語兩方面將陳述性知識轉(zhuǎn)化為程序性知識,并以富于情感的演講來實現(xiàn)分子和英語知識的同時強化。
(二)實施課堂演講體現(xiàn)的是“研究型學(xué)習(xí)”理念
“研究型學(xué)習(xí)”是指學(xué)生在教師指導(dǎo)下以類似科研的方法獲得知識。農(nóng)業(yè)院校研究生分子生物學(xué)雙語教學(xué)的目標(biāo)之一就是要強化學(xué)生的研究能力,課堂演講正是磨煉學(xué)生研究能力的有效方式。這是因為,課堂演講過程包括選題、準(zhǔn)備、演講和評價等環(huán)節(jié),學(xué)生應(yīng)對每個環(huán)節(jié)時都可模擬研究來開展。在認定題目時,學(xué)生須客觀評價自身的知識基礎(chǔ)和未來研究需要,這類似于科研中的“選題”;在準(zhǔn)備演講稿時,學(xué)生須大量收集、快速甄別資料,這等同于科研中的“文獻檢索”與“立論”,該過程錘煉的總結(jié)與寫作技巧還能有效運用到學(xué)生的論文寫作中;在制作PPT和上臺演講時,學(xué)生須理清邏輯、謀篇布局、旁征博引,該過程等同于科研中的“結(jié)題匯報”或“論文答辯”??梢姡n堂演講的實施正是契合了研究生課程的“面向研究”的屬性,體現(xiàn)的是“研究型學(xué)習(xí)”理念。
二、我國農(nóng)業(yè)院校研究生分子生物學(xué)雙語教學(xué)中實施課堂演講的主要操作環(huán)節(jié)
(一)學(xué)生動員
在首次課中,教師一方面要向?qū)W生說明課程的設(shè)計理念,強調(diào)課堂演講的實施是順應(yīng)時代的發(fā)展,以敦促學(xué)生感悟教師的良苦用心,積極應(yīng)對;另一方面,要說明課堂演講的實施方案和評價方式(見表1),規(guī)定每位學(xué)生都要演講一次,成績將被納入其“形成性評價體系”,并占課程總成績的40%,促使學(xué)生高度重視、嚴(yán)肅對待。實踐發(fā)現(xiàn),少數(shù)分子基礎(chǔ)知識扎實、英語口語功底好的學(xué)生對課堂演講的興趣較高,但大部分學(xué)生因分子基礎(chǔ)知識薄弱、英語口語能力低下而對演講產(chǎn)生焦慮感,故動員環(huán)節(jié)的核心是消除這些學(xué)生的畏難情緒,鼓勵其勇敢面對。
表1 研究生分子生物學(xué)雙語教學(xué)中課堂演講的評分體系
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(二)演講題目確定
演講題目按“一人一題”的原則并根據(jù)分子生物學(xué)內(nèi)容和學(xué)生水平確定。就學(xué)科內(nèi)容而言,題目須立足學(xué)生的研究需要,以分子技術(shù)的基本操作、新進展為重點,同時兼顧基本概念,做到深與淺、經(jīng)典與現(xiàn)代的和諧統(tǒng)一。就學(xué)生實際而言,首先須照顧學(xué)生的知識背景,如學(xué)生的分子基礎(chǔ)知識極其薄弱,則為其設(shè)計基礎(chǔ)性的題目,并推薦中文材料;如學(xué)生已擁有較扎實的分子基礎(chǔ)知識,則鼓勵其選擇較尖端的新命題。其次,須考慮學(xué)生在研究生階段甚至在就業(yè)后的研究方向,如學(xué)生在研究中將不涉及或很少涉及分子問題,則讓其選擇“入門”型的題目;如學(xué)生研究涉及大量分子手段,則讓其與導(dǎo)師溝通,使所選題目能貼近其研究細節(jié)或就是其研究的關(guān)鍵環(huán)節(jié),即讓演講成為該學(xué)生準(zhǔn)備研究的有機組成部分。在長期教學(xué)中,筆者已建成了課堂演講的“題目庫”,供每輪教學(xué)更新、使用。
(三)演講PPT制作與審定
學(xué)生須提前準(zhǔn)備好演講PPT。演講內(nèi)容應(yīng)緊扣題目,支撐材料可來自指定的原版教材、國際分子生物學(xué)相關(guān)網(wǎng)站或英語期刊。內(nèi)容的組織應(yīng)重點突出、結(jié)構(gòu)嚴(yán)謹(jǐn)、邏輯清晰。PPT須用全英語完成,并講究科技論文寫作的規(guī)范和專業(yè)詞匯翻譯的準(zhǔn)確度。PPT應(yīng)長短適宜,背景美觀,字體、字號恰當(dāng),圖、表和視頻等精美、合適。學(xué)生演講前,教師及時審閱其PPT,指導(dǎo)其在分子內(nèi)容和英語運用方面進行反復(fù)推敲,特別是要杜絕抄襲與剽竊現(xiàn)象。
(四)正式演講前的演習(xí)
在正式演講前,教師指導(dǎo)學(xué)生利用宿舍、實驗室或自習(xí)室等場合反復(fù)演習(xí),以熟悉PPT、控制時限、推敲演講中構(gòu)思與布局的科學(xué)性,并設(shè)計必要的肢體語言。教師可提供經(jīng)典英語演講稿供學(xué)生欣賞,讓其領(lǐng)略英語演講中的換氣、連續(xù)、重音和停頓等用聲特征。
(五)“上臺”演講
在規(guī)定時間,學(xué)生上講臺在10-15min內(nèi)完成演講,并預(yù)留提問時間1-2min,演講順序可按學(xué)生學(xué)號也可由學(xué)生自主決定。學(xué)生演講時須先說或讀英語,再漢譯關(guān)鍵詞或句。教師負責(zé)為學(xué)生營造一個寬松而莊嚴(yán)的環(huán)境,要求學(xué)生鄭重進入演講狀態(tài),并敦促其他學(xué)生尊重演講者;學(xué)生演講結(jié)束后,教師隨機請學(xué)生對演講者進行點評或提問。在學(xué)生演講過程中,教師要寬容對待其失誤或錯誤,及時給予總結(jié)或鼓勵。條件允許時,教師可對演講過程進行錄音或錄像,再在課堂上回放點評,這樣可大大增加課堂的趣味性與互動效果。
(六)成績評定與期末試題設(shè)計
演講結(jié)束后,教師參考學(xué)生對演講者的點評對演講者進行評分(表1)。同時,教師在演講結(jié)束后的提問時段,從演講內(nèi)容中快速精選部分知識點設(shè)計為期末考試題,并當(dāng)場對全體學(xué)生說明,即本課程的期末考題全部來自學(xué)生的演講內(nèi)容,每個學(xué)生的演講內(nèi)容都有可能出現(xiàn)在期末試卷中,這樣一來每輪課的期末試題均不同,可杜絕“師弟”、“師妹”向“師兄”、“師姐”打探期末考題、弄虛作假應(yīng)對考試的弊端,從而促使全體學(xué)生專心聽每一個演講者的演講,積極應(yīng)對期末考試。
三、我國農(nóng)業(yè)院校研究生分子生物學(xué)雙語教學(xué)中實施課堂演講的主要意義
(一)有助于強化研究生的分子生物學(xué)知識和綜合運用英語的能力
農(nóng)業(yè)院校研究生分子生物學(xué)雙語教學(xué)中實施課堂演講可從“源頭”強化學(xué)生的分子知識。在學(xué)生為演講做準(zhǔn)備的過程中,教師引導(dǎo)學(xué)生熟悉國際上分子生物學(xué)的主要網(wǎng)站、著名期刊和經(jīng)典名著,學(xué)生從中積累了大量的分子生物學(xué)專業(yè)詞匯。隨著閱讀量的擴大,學(xué)生將逐步掌握分子基礎(chǔ)知識、技術(shù)方法的英語表達方式,以實現(xiàn)對分子理論和技術(shù)的準(zhǔn)確認知。同時,學(xué)生可熟悉部分分子生物學(xué)英語期刊的辦刊宗旨和收錄范圍,從而為今后的英語打下初步基礎(chǔ)。
另一方面,實施課堂演講可大大提升學(xué)生綜合運用英語的能力。課堂演講實施中,英語文獻檢索與閱讀、英語科技論文的寫作和英語口語演練等環(huán)節(jié)可系統(tǒng)地促使學(xué)生自主強化其綜合運用英語的能力,教師則引導(dǎo)學(xué)生感悟英語的遣詞造句、基本語法和科技論文慣用語等諸多細節(jié),使學(xué)生運用英語時在詞、句、段和篇各層次均力求地道,從而提高英語思維、錘煉英語思辨能力。其中,“上臺演講”環(huán)節(jié)可在近似正式交流的層次為學(xué)生創(chuàng)造說、講、讀和聽英語的寶貴平臺,可有效幫助學(xué)生在英語運用中認識到地道、優(yōu)美語音語調(diào)的魅力和連貫、流暢表達的重要性。
(二)有助于強化研究生的心理素質(zhì)
農(nóng)業(yè)院校的研究生因英語較差而對演講產(chǎn)生嚴(yán)重的畏難情緒,但仍被分子生物學(xué)雙語教學(xué)中的課堂演講“逼”上講臺。教師應(yīng)正視學(xué)生的焦慮情緒,依托完善的演講內(nèi)容準(zhǔn)備和基本演講技能指導(dǎo)來幫助學(xué)生消除理解恐懼,調(diào)整期望值,臨場時冷靜、自制。實踐證明,學(xué)生按平等機會輪流上臺能有效幫助學(xué)生克服怯場心理,后上臺者越發(fā)鎮(zhèn)定自若,臺下的提問者也逐漸活躍,在這種充滿善意、激情的氛圍中,學(xué)生運用英語的興趣被激發(fā),在公眾場合展示自我的勇氣得以增強,害羞、怯場等不良心理逐漸被克服。
(三)有助于強化研究生以信息收集與甄別為核心的思辨能力
我國長期的“填鴨式”教學(xué)使學(xué)生思辨能力低下,面對海量信息時,學(xué)生們往往無所適從。研究生參與課堂演講時嘗試以語言綜合認知和運用為基礎(chǔ)的跨文化交際,在應(yīng)對演講的各環(huán)節(jié)時都須調(diào)動、運用分析、綜合、判斷和推理等思辨能力。其中,學(xué)生瀏覽網(wǎng)站和閱讀國內(nèi)外參考文獻時,須做到廣泛涉獵、海量收集和快速甄別。面對龐大的信息群時,學(xué)生須以評判性思維、緊扣自身目標(biāo)來辨析信息與目標(biāo)的“關(guān)聯(lián)度”,在有限的時空內(nèi)快速決定材料的取舍和“取”的程度,該過程與科研項目申報中的立論依據(jù)梳理和研究假說凝練過程極其相似。可見,課堂演講可培養(yǎng)學(xué)生良好的以信息收集與甄別為核心的思辨能力,這對學(xué)生研究工作的開展具有特別重要的意義。
四、結(jié)束語
我國農(nóng)業(yè)院校研究生分子生物學(xué)雙語教學(xué)中實施課堂演講并非致力于把學(xué)生培養(yǎng)成演說家,而是將課堂演講作為手段實現(xiàn)學(xué)生分子知識水平提升和英語運用能力強化雙重目標(biāo)。[3] [28]實施課堂演講運用的是“輸出式”知識獲取理論,體現(xiàn)的是“研究型學(xué)習(xí)”理念,具體包括學(xué)生動員、演講題目確定、演講PPT制作與審定、正式演講前的演習(xí)、“上臺”演講和成績評定與期末試題設(shè)計六個環(huán)節(jié)。實踐證明,課堂演講有助于強化研究生的分子知識和英語綜合運用能力、心理素質(zhì)和以信息收集與甄別為核心的思辨能力。
同時,實施課堂演講對教師在分子知識、英語能力和工作量等方面提出了新的挑戰(zhàn)。教師須時時緊跟分子生物學(xué)的發(fā)展才能引導(dǎo)學(xué)生實現(xiàn)對該學(xué)科的即時了解。教師組織課堂演講既要立足于對普通英語演講的充分了解,又要從英語學(xué)術(shù)報告的角度強調(diào)課堂演講的科學(xué)性。此外,教師在演講的各環(huán)節(jié)都要密切關(guān)注、精心組織學(xué)生,還需統(tǒng)籌教學(xué)任務(wù)的圓滿完成,故必然付出更多的精力和時間。
[ 注 釋 ]
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關(guān)鍵詞:分子生理學(xué);實驗室;安全管理
作者簡介:梁宏偉(1976-),男,蒙古族,內(nèi)蒙古赤峰人,三峽大學(xué)生物技術(shù)研究中心,講師;王玉兵(1977-),男,湖北恩施人,三峽大學(xué)生物技術(shù)研究中心,講師。(湖北宜昌443002)
基金項目:本文系“地方綜合性高校生物類專業(yè)實用創(chuàng)新人才培養(yǎng)模式的構(gòu)建與實踐”項目(項目編號:2009192)資助的研究成果。
中圖分類號:G482 文獻標(biāo)識碼:A 文章編號:1007-0079(2012)07-0092-02
隨著生命科學(xué)的迅速發(fā)展,越來越多的科研機構(gòu)和高校設(shè)立分子生物學(xué)實驗室及進行這方面的研究工作,它已經(jīng)成為生物、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的重要實驗基地。分子生物學(xué)是一門非常強調(diào)實驗技術(shù)和技能的學(xué)科,以大量的實驗為基礎(chǔ),涉及的貴重儀器設(shè)備和有毒有害生化試劑種類繁多。目前,大部分分子生物學(xué)實驗室都缺乏專職的技術(shù)人員進行管理、維護,分子生物學(xué)實驗室安全問題已經(jīng)迫切地擺在人們面前。加強分子生物學(xué)實驗的安全管理以及充分發(fā)揮研究生在其中的作用對整個實驗室的可持續(xù)發(fā)展、科研工作的順利開展都是十分必要和重要的。
一、實驗室安全管理的必要性
分子生物學(xué)實驗室作為高校生命科學(xué)人才培養(yǎng)和現(xiàn)代生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)化的孵化器,其安全正常運轉(zhuǎn)與否直接關(guān)系到教師、學(xué)生的生命安全和學(xué)校的公共財產(chǎn)安全。加強實驗室安全管理與教育培訓(xùn)是分子生物學(xué)學(xué)科健康發(fā)展的重要保證之一。近年來,隨著我國高校辦學(xué)規(guī)模的擴大及生命科學(xué)研究的蓬勃發(fā)展,分子生物學(xué)實驗室對外開放力度的加大,實驗室的使用、人員流動和內(nèi)部管理都產(chǎn)生了許多新情況,這些都要求我們認真分析實驗室安全管理的新形勢,預(yù)防安全事故的發(fā)生。國外一些著名高校和研究機構(gòu)在多年前就制定了嚴(yán)格規(guī)范的生物安全制度和相應(yīng)的管理機構(gòu)。世界衛(wèi)生組織早在1983年第一版《實驗室生物安全手冊》,對實驗室生物安全、儀器設(shè)備安全使用及生化試劑、水電安全進行詳細闡述,隨后在新版本中不斷進行補充和完善更新。為加強我國實驗室的生物安全管理,國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局和國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會在2009年7月1日開始實施新版《實驗室生物安全通用要求》(GB19489-2008),該標(biāo)準(zhǔn)對實驗室生物安全設(shè)施、設(shè)備等硬件和安全管理體系、組織、文件等軟件管理做出通用性強制性國家標(biāo)準(zhǔn)。這一法規(guī)性文件的實施對實驗室生物安全的認可和生物安全管理工作的開展將發(fā)揮重要的指導(dǎo)和規(guī)范作用。
盡管高校實驗室安全管理一直是人們關(guān)注的熱點,隨著一系列政策法規(guī)的出臺,人們的環(huán)保和安全意識也在不斷增強,但仍有很多問題存在。如有些師生實驗室安全意識薄弱、規(guī)章制度未能獲得有效執(zhí)行、實驗垃圾和生活垃圾混放、將食物帶進實驗室等。再者實驗室生物安全管理基礎(chǔ)建設(shè)投入不足,很多高校尚未對分子生物學(xué)實驗中產(chǎn)生的廢棄物進行無害化處理,甚至對于產(chǎn)生的廢棄物不知該如何處理而丟入普通垃圾桶或傾倒入下水道。就此我們提出了一些關(guān)于分子生物學(xué)實驗室的安全管理措施來和大家共同探討,使其能夠安全、高效地為生命科學(xué)的教學(xué)和科研工作提供服務(wù)。
二、分子生物實驗室存在的安全問題及對策
1.有毒有害生化試劑的使用及廢棄處理
分子生物學(xué)實驗室所用到的生化試劑大多具有揮發(fā)性、強毒性、腐蝕性、致癌性等,如氯仿(CHCl3)、十二烷基硫酸鈉(SDS)、溴化乙錠(EB)、丙烯酰胺、NN-亞甲雙丙烯酰胺、焦碳酸二乙酯(DEPC)、IPTG、Trizol、二甲基亞砜(DMSO)、二硫蘇糖醇(DTT)、四甲基乙二胺(TEMED)、苯甲基磺酰氟(PMSF)、過硫酸銨等。這類物品不僅對實驗操作人員毒性大、危險性高,而且對環(huán)境的危害和影響也極大。在取用這類生化試劑時應(yīng)佩戴合適的手套、口罩、護目鏡等個人防護裝備,在化學(xué)通風(fēng)櫥內(nèi)完成相關(guān)操作,防止試劑溢灑并接觸皮膚,防止揮發(fā)性、粉末試劑吸入呼吸道及對眼睛黏膜造成毒害。對用完和廢棄的有毒有害試劑要及時進行無害化或凈化處理,然后使用專用容器盛放并做醒目標(biāo)識,防止對他人造成毒害和環(huán)境污染。如溴化乙錠(EB)是強誘變劑,具有高致癌性,實驗結(jié)束后應(yīng)對含EB的溶液進行凈化處理再行棄置。對于EB含量大于0.5mg/ml的溶液,先用水稀釋至濃度低于0.5mg/ml,加入一倍體積的0.5mol/L KMnO4,小心混勻后再加入等量的2.5mol/L HCl,混勻后置室溫數(shù)小時,再加入一倍體積的2.5mol/L NaOH,小心混勻后可丟棄。[1]DMSO存在嚴(yán)重的毒性,使用時要避免其揮發(fā),皮膚沾上之后要用大量的水洗以及1%~5%稀氨水洗滌。丙烯酰胺和NN-亞甲雙丙烯酰胺具神經(jīng)毒性,操作時戴手套在通風(fēng)櫥內(nèi)進行,聚合后的聚丙烯酰胺凝膠沒有毒性,可隨普通垃圾一起扔掉。
2.生物安全及其防護
在實驗室安全管理中人們通常只關(guān)注到有毒有害生化藥品、防火及水電安全,往往忽視生物安全的管理。這是因為人們普遍認為實驗室不太可能發(fā)生感染,即使感染也沒有很嚴(yán)重的后果。雖然從事高致病性病原微生物研究的實驗室不多,但實驗室感染是客觀存在的現(xiàn)象。尤其是從事致病性或高致病性病原微生物的實驗室和研究人員,本身就存在很大的風(fēng)險。如2004年4月中國疾病預(yù)防控制中心病毒所實驗室由SARS冠狀病毒引起實驗人員的感染;近期報道的2010年東北農(nóng)業(yè)大學(xué)28名師生因活體動物實驗而被布魯氏桿菌感染等。從事致病性或高致病性病原微生物研究的實驗人員應(yīng)經(jīng)專項培訓(xùn),建立健康監(jiān)測制度,配備適當(dāng)水平的個人防護裝備;對此類實驗室建立相應(yīng)的生物安全防護等級,配備相應(yīng)級別的生物安全柜等專用設(shè)備,并按照正確的程序和方法進行操作。普通分子生物學(xué)實驗室中常用的菌株往往具有抗生素抗性,在藥物存在的情況下也能正常生長。在微生物相關(guān)試驗中首先要做好個人的安全防護,實驗結(jié)束后要及時對菌體進行滅活處理,防止對人身造成感染及環(huán)境污染。試驗中用到的動植物材料也可能攜帶致病源,在實驗完成后要及時進行妥善處理,否則可能會造成病菌和疾病的傳播。對于轉(zhuǎn)基因動植物材料應(yīng)嚴(yán)格控制其栽培或養(yǎng)殖環(huán)境,防止基因飄移擴散對生態(tài)環(huán)境造成潛在危害。
3.儀器設(shè)備的安全使用及水火電的安全
在分子生物學(xué)實驗室常用到高速離心機、高溫高壓滅菌容器、紫外光源、烘箱、微波爐、超聲波處理器等儀器設(shè)備。首先要保證不同規(guī)格型號儀器的用電安全性、線路荷載承受能力;其次要經(jīng)常檢查各種儀器的自動控制裝置是否運轉(zhuǎn)正常。如對高速離心機的使用一定要確保轉(zhuǎn)子上離心管的配平,否則會導(dǎo)致設(shè)備損壞甚至轉(zhuǎn)子飛出傷人;對高溫高壓滅菌容器應(yīng)定期檢查其壓力和溫度控制、定時裝置是否正常,對非全自動壓力滅菌容器在運轉(zhuǎn)時應(yīng)全程看護;對烘箱除確認自動控溫裝置是否可靠,同時還需要人工檢測溫度,以免溫度過高,在使用時嚴(yán)禁把易燃易爆溶劑及物品送入烘箱或微波爐中。紫外光或紫外線可損傷眼視網(wǎng)膜,皮膚過度暴露在紫外線下導(dǎo)致?lián)p傷及誘發(fā)皮膚癌,切勿用裸眼觀察和使用沒有防護裝置的紫外光源,在紫外光下操作時要戴合適的防護性手套。對經(jīng)常接觸有毒有害生化試劑的儀器設(shè)備(如凝膠電泳系統(tǒng))應(yīng)劃定專用操作區(qū),同時還要防止在操作觀察中與其他設(shè)備的交叉污染。
分子生物學(xué)實驗室在設(shè)立之初應(yīng)進行嚴(yán)格的規(guī)劃設(shè)計,遵照國際通用及國家對實驗室安全管理通用要求進行合理的布局安排。尤其應(yīng)當(dāng)注意的是,實驗室內(nèi)嚴(yán)禁亂接電線、電源,動力電源和普通照明電源分開使用。要經(jīng)常檢修、維護線路以及通風(fēng)、防火設(shè)備等;在實驗結(jié)束時,要及時切斷電源、火源、水源等。
4.個人防護裝備及求助對象
個人防護裝備(Personal protective equipment,PPE)是指用于防止工作人員受到物理、化學(xué)和生物等有害因子傷害的器材和用品。在生物安全實驗室中,這些器材和用品主要是保護實驗人員免于暴露于生物危害物質(zhì)(氣溶膠、噴濺物以及意外接種等),避免實驗室相關(guān)感染。[2]有毒有害試劑及感染性材料在實驗操作過程中難免溢灑,從而可能發(fā)生身體接觸,此時個人防護就是保證安全的關(guān)鍵所在。需要注意的是,任何物理防護設(shè)備的保護功能都有一定限度,都不是絕對的。
需要防護的身體部位主要包括眼睛、頭面部、呼吸道、手、軀體、耳(聽力)等。對于眼睛的防護采用護目鏡,實驗室配備的洗眼裝置應(yīng)安裝在明顯和易取的地方,并保持洗眼水管的通暢,便于工作人員緊急時使用。對頭面部及呼吸道保護主要是口罩、防毒面罩及帽子,裝有過濾器的防毒面具可以保護佩戴者免受氣體、蒸汽、顆粒和微生物以及氣溶膠損害的影響。[3]對軀體的保護采用實驗服、防護服,對手部的保護需要配備手套等,如取用有毒試劑的一次性手套、高溫高壓滅菌器及焚燒爐上卸載物品的隔熱手套等。對耳的保護主要采用聽力保護器,如對超聲波處理時產(chǎn)生的分頻諧波對聽力的傷害。
此外,實驗室內(nèi)應(yīng)配備國際通用的急救箱和急救手冊,在醒目的位置標(biāo)明就近的急救中心位置及聯(lián)系方式。
三、研究生在實驗安全管理中的作用
分子生物學(xué)實驗室的安全管理最終要落實到具體的實驗操作人員上,而研究生作為實驗室的重要組成部分,在實驗室安全管理中可以發(fā)揮重要的作用。研究生的畢業(yè)論文都在實驗室完成,日常的學(xué)習(xí)和科學(xué)研究活動當(dāng)中要使用實驗室的各種生化試劑和儀器設(shè)備,其對實驗室的了解程度和待在實驗室的時間在一定程度上都超過了教師。如果他們?nèi)狈Ω叨鹊陌踩婪兑庾R和責(zé)任意識,不能正確使用儀器設(shè)備與生化藥品,這些儀器設(shè)備與藥品的潛在危險性將會被誘發(fā)出來,并有可能導(dǎo)致安全事故。因此,實驗室應(yīng)制訂合理的研究生安全管理體制,充分調(diào)動研究生參與安全管理的積極性,從而確保實驗室安全正常運轉(zhuǎn)。
1.安全組織和培訓(xùn)
在分子生物學(xué)實驗室中應(yīng)定期舉辦安全知識和生物防護培訓(xùn)演練,提高師生的安全防范意識。包括對實驗室生物安全通用要求、實驗室生物安全手冊、實驗室安全管理的各項規(guī)章制度、各類儀器設(shè)備操作手冊的學(xué)習(xí)、實驗室安全緊急狀況的處理和應(yīng)急程序的演練,如洗眼裝置的正確使用、緊急逃生能力等,創(chuàng)建實驗室的安全文化。只有師生的安全防護意識得到提高才能更有效地避免實驗室安全事故的發(fā)生。要確保每一名進入實驗室學(xué)習(xí)和開展科研工作的學(xué)生受到良好的安全意識培訓(xùn)。實驗室中還應(yīng)定期組織實驗技能的培訓(xùn)、儀器設(shè)備的安全正確的操作及有毒有害試劑的取用等方面的培訓(xùn)。熟練的操作技能和正確的操作方法也是避免安全事故發(fā)生的有效手段。
2.建立制度約束、利益基礎(chǔ)的安全管理制度
研究生可以協(xié)助導(dǎo)師對實驗室的各種儀器設(shè)備、生化試劑及水電暖等設(shè)備進行日常管理和隱患排查。針對實驗室的具體情況建立切實可行的研究生安全管理制度,根據(jù)不同研究生的研究方向側(cè)重點和不同的工作階段,可以指定一名研究生對特定儀器設(shè)備等進行具體的管理和維護,這樣將實驗室的各種儀器設(shè)備、有毒有害試劑以及水火電的安全管理分別委派到具體的研究生。遵循誰主管誰負責(zé)的原則,具體的負責(zé)人應(yīng)熟悉該儀器設(shè)備或試劑的操作方法及銷售維修人員的聯(lián)系方式,其他研究生在進行相關(guān)實驗前都必須找該負責(zé)人進行登記和咨詢。此外,還要充分發(fā)揮高年級研究生對低年級研究生的“傳幫帶”作用,幫助導(dǎo)師指導(dǎo)、監(jiān)督師弟師妹的學(xué)習(xí)和科研工作。
研究生參與到實驗室的安全管理中無疑增加了他們的學(xué)業(yè)負擔(dān),為使研究生的管理作用得以充分的發(fā)揮,激勵措施是不可或缺的手段。院系可以在實驗室設(shè)立研究生助管崗位,提供一定的經(jīng)費作為其勞動報酬,以充分尊重學(xué)生的勞動付出。[4]導(dǎo)師也應(yīng)對參與實驗室安全管理的研究生給予一定的補助,以提高其工作積極性。還應(yīng)把物質(zhì)激勵和精神激勵相結(jié)合,對工作出色的研究生在評優(yōu)過程中予以加分,從而充分調(diào)動他們的主觀能動性和工作積極性,做好實驗室安全管理工作。
四、結(jié)束語
總之,實驗室的安全管理是高校的一項重要工作,對整個高校的安全和穩(wěn)定至關(guān)重要。要針對分子生物學(xué)實驗室安全特點和現(xiàn)狀來制訂切實可行的安全管理制度,并嚴(yán)謹(jǐn)認真地遵照執(zhí)行,就一定能做好實驗室的安全管理工作,確保研究生科研工作的順利開展。
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關(guān)鍵詞:布氏桿菌;檢測技術(shù)
中圖分類號:S4 文獻標(biāo)識碼:A DOI:10.11974/nyyjs.20160932004
布氏桿菌病亦稱馬耳他熱或波狀熱病,是由布氏桿菌屬引起的以家畜為主的多種動物互為傳染源的人畜共患病。由于傳染性極強,且感染后根治困難,因此造成巨大經(jīng)濟損失。全世界每年因該病造成的經(jīng)濟損失約30億美元。在中國受布氏桿菌病威脅的人口約有35億。因此,世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為B類動物疫病,中國將其列為二類動物疫病。
鑒于布氏桿菌病引起的巨大危害,在布病感染早期做出快速診斷對于緩解由此造成的損失尤為重要。目前,臨床布氏桿菌檢測主要是細菌學(xué)檢測,費時費力, 不能做到早期快速診斷。隨著免疫學(xué)的發(fā)展,基于免疫技術(shù)建立起來的酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)的出現(xiàn)大大提高了布氏桿菌病檢測的準(zhǔn)確性和檢測速度。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,特別是微生物基因組測定技術(shù)、生物信息學(xué)分析技術(shù)的發(fā)展,以PCR和基因檢測技術(shù)為主的布氏桿菌病檢測技術(shù),以其簡單快速、穩(wěn)定高效、易于自動化操作等特點,成為流行病檢測的研究熱點。
1 酶聯(lián)免疫吸附試驗
主要包括酶聯(lián)免疫吸附試驗和競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗。自1976 年Carlsson首次使用間接ELISA法檢測人布氏桿菌病后,已經(jīng)建立了牛、羊和豬等多種動物的間接ELISA檢測布氏桿菌病的方法。目前,已經(jīng)有商用間接ELISA問世。但是間接ELISA不能區(qū)分抗體是疫苗免疫產(chǎn)生還是病株感染引起。因此,不能作為免疫家畜的檢測方法。競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗?zāi)軈^(qū)分疫苗免疫產(chǎn)生的抗體和病株感染引起抗體,且靈敏度高。但目前尚無公認的診斷標(biāo)準(zhǔn)。膠體金免疫層析技術(shù)是近年發(fā)展起來的新型標(biāo)記技術(shù),操作更為簡便,更適合于布氏桿菌病的診斷。特別是近年來熒光探針分析技術(shù)[1-3]在免疫技術(shù)中的應(yīng)用,進一步提高了通過免疫試驗檢測布氏桿菌病的靈敏度和準(zhǔn)確度且成為研究的熱點。
2 PCR法
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction , PCR)是體外擴增DNA序列的技術(shù),是分子生物學(xué)的關(guān)鍵技術(shù),它的出現(xiàn)極大地推動了分子生物學(xué)的快速發(fā)展,并應(yīng)用到生命科學(xué)的不同領(lǐng)域。隨著PCR技術(shù)及儀器的發(fā)展,PCR的擴增效率增加,自動化程度提高,并且發(fā)明了多種PCR技術(shù)。PCR技術(shù)被引進到包括微生物的檢測和鑒定在內(nèi)的多種領(lǐng)域。和傳統(tǒng)的微生物的檢測和鑒定技術(shù)相比,PCR技術(shù)具有快速、高效、準(zhǔn)確,不破壞樣本等優(yōu)勢,成為研究者研究的熱點。
利用PCR方法檢測病原體,目的基因的選擇非常關(guān)鍵。1978 年P(guān)CR技術(shù)首次用于布氏桿菌檢測,是針對布氏桿菌上高度保守的單個基因如BCSP31 和16SrRNA 基因設(shè)計的。檢測特異性和靈敏度較低。隨后,不同的基因被選擇進行擴增檢測。1990 年Fekete首次報道了成功的利用PCR擴增編碼43-KDS19 牛布氏桿菌外膜蛋白的序列的方法快速檢測布氏桿菌。1992 年Baily 采用低聚核甙酸引物擴增BCSP31 的基因223bp片段,對牛和羊布氏桿菌有較高特異性。1999年,金紅等[4]建立了IS6501 錨定PCR 法, 不僅可以鑒定布氏桿菌并區(qū)分不同毒株和生物型, 還可以可鑒別野毒株與疫苗株。2002 年E.Navarro等[5]報道了用PCR 法通過擴增了人布氏桿菌編碼牛布氏桿菌抗原31kDa 、16SrRNA和外膜蛋白的基因?qū)θ瞬际蠗U菌進行檢測。2003 年王勝昌等[6]根據(jù)布氏桿菌蛋BSCP31基因設(shè)計引物進行布氏桿菌的檢測,最低可檢測到1pg的布氏桿菌DNA,且特異性非常好。
2013年,王素華等[7]根據(jù)GenBank上公布的牛布氏桿菌外膜蛋白OMP31的基因序列設(shè)計特異性引物,擴增特異性好的602bp基因片段,建立的檢測牛皮布氏桿菌PCR檢測方法,敏感性高,最低能夠檢測到0.9pg/μL的布氏桿菌DNA,并顯示出良好的特異性。2014年,Kang等[8]根據(jù)布氏桿菌基因組上的BCAN 0548-0549區(qū)域基因序列設(shè)計特異性引物,擴增約300-bp的片段,首次用于狗的布氏桿菌的專一性檢測,檢測限為3pg/μL。
3 基因檢測技術(shù)
隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,對微生物基因組進行檢測,測定微生物基因的GC含量、Tm值,以及利用核酸雜交技術(shù)可以快速的鑒定微生物菌株,并可以輕而易舉的精確分辨微生物的類型,講微生物鑒定到種,亞種或不同的菌株型。因此,基因檢測技術(shù)如果引物病原微生物的檢測,具有準(zhǔn)確高效的優(yōu)勢。郭秀蘭[9]等將基因檢測技術(shù)應(yīng)用到了布氏桿菌的檢測。用細菌DNA( 脫氧核糖核酸) 分子熱變性法和DNA 液相分子雜交法測定了布氏桿菌,使得應(yīng)用細菌DNA 基因測定技術(shù)是區(qū)別布氏桿菌與非布氏桿菌最可靠的方法之一。
4 展望
由于布氏桿菌病是一種人畜共患疾病,流行趨勢日趨嚴(yán)重,容易傳染,并且會帶來巨大的經(jīng)濟損失,甚至造成人員的死亡,給畜牧業(yè)生產(chǎn)和公共衛(wèi)生安全帶來極大的挑戰(zhàn)。因此在早期檢測布氏桿菌對于緩解由布氏桿菌病帶來的危害尤為重要。但是,盡管目前可以在早期進行布氏桿菌病的檢測,但這不是應(yīng)對布氏桿菌病的最佳方式。對待布氏桿菌病,應(yīng)該從以下幾方面開展研究。
4.1 應(yīng)以預(yù)防為主、治療為輔,積極全面地對抗布病
開展布氏桿菌病防治知識宣傳教育,提高人們對布氏桿菌病的認識。
4.2 積極開展布氏桿菌病疫苗的研制,特別是基因工程疫苗的研制
獲得穩(wěn)定安全的布氏桿菌病疫苗,是布氏桿菌病的防治的關(guān)鍵步驟。
4.3 進一步開發(fā)快速高效、原位布氏桿菌病檢測技術(shù)
對于布氏桿菌病的調(diào)查和治療有重要意義。
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