前言：本站為你精心整理了紫蘇屬植物葉片氨基酸含量范文，希望能為你的創(chuàng)作提供參考價(jià)值，我們的客服老師可以幫助你提供個(gè)性化的參考范文，歡迎咨詢。

摘要：采用HPLC法對(duì)來(lái)自美國(guó)、日本、四川和廣東等地共27份紫蘇屬材料葉片氨基酸組成及含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，該屬植物葉片中含有17種氨基酸，各氨基酸含量在材料間有較大變異，脯氨酸的變異系數(shù)高達(dá)59.19%。來(lái)自四川的P06-7其必需氨基酸含量達(dá)19.55mg/g，氨基酸總量為57.65mg/g，綜合表現(xiàn)優(yōu)良。試驗(yàn)結(jié)果還表明，野生紫蘇的藥效氨基酸和香甜味氨基酸含量均相對(duì)較高，是紫蘇屬植物中氨基酸含量豐富的資源。

關(guān)鍵詞：紫蘇；氨基酸；HPLC法

1材料和方法

1.1供試材料

試驗(yàn)共27份紫蘇屬植物材料，均由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)植物教研室楊光輝老師鑒定。本文將紫蘇和白蘇分開研究。其中紫蘇種有7份材料：P06-4來(lái)自重慶南川，P06-11紫來(lái)自四川雅安，P06-16、P06-17紫來(lái)自四川蘆山，P06-18來(lái)自四川崇州，P07-1來(lái)自四川遂寧，P06-31來(lái)自日本；野生紫蘇種有材料6份：P06-6來(lái)自四川都江堰，P06-7、P06-9、P06-10來(lái)自四川雅安，P06-12紫來(lái)自四川資中，P06-15紫來(lái)自四川簡(jiǎn)陽(yáng)；回回蘇變種有材料5份：P06-1回來(lái)自廣東中山，P06-13來(lái)自四川內(nèi)江，P06-20A、P06-20B、P06-20C來(lái)自四川成都；白蘇種有材料有9份：P06-11白來(lái)自四川雅安，P06-15白來(lái)自四川簡(jiǎn)陽(yáng)，P06-17白來(lái)自四川蘆山，P06-30、P06-36來(lái)自美國(guó)，P06-32來(lái)自泰國(guó)，P06-33來(lái)自韓國(guó)，P06-37來(lái)自日本，P07-2來(lái)自四川廣元。

1.2儀器與試劑

Agilent公司1100型高效液相色譜儀（含脫氣機(jī)、四元梯度泵、自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣、柱溫箱、DAD檢測(cè)器），Sartorius公司BP211D型電子天平，ICE公司Micromax型離心機(jī)，Millipope公司MilliQ型純水儀，Labarey公司微量移液器Autoseienee公司溶劑過(guò)濾器，上海精科雷磁公司PHS一2C型酸度計(jì)。乙腈、甲醇、四氫呋喃均為色譜純，由TEDIA公司提供，內(nèi)標(biāo)物SAR和17種氨基酸混合標(biāo)樣（含AspGluSerHisGlyThrAlaArgCys-SS-CysTyr、Val、Met、Phe、Ile、Leu、Lys、Pro）以及衍生劑OPA和FMOC均由Agilent公司提供，其余試劑為分析純。

1.3方法

1.3.1供試樣品的制備

采取3個(gè)月生植株上的完整健全葉片，在80℃干燥箱中烘干，粉碎，準(zhǔn)確稱取0.5g于10mL安瓿瓶中，加入6mol/L的HCl7mL，充入高純N2，將安瓿瓶封口，置于105℃恒溫干燥箱中消化過(guò)夜。冷卻后過(guò)濾，濾液濃縮近干，加5mL0.1mol/L的HCl溶解，取1.5ml至1.5ml離心管中，10000轉(zhuǎn)/min離心10min，取上清液900ul加入100ul5nmol/ul內(nèi)標(biāo)物SAR，混勻后作為供試樣品。

1.3.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

5nmol/L內(nèi)標(biāo)液制備：精密稱取SAR22.3mg以0.1mol/LHC1定容至50mL。

500pmol/L內(nèi)標(biāo)液制備：精密吸取5nmol/L內(nèi)標(biāo)液5mL以0.1mol/LHC1定容至50mL。

900pmol/L氨基酸混合標(biāo)液制備：精密吸取900ul1000pmol/L氨基酸混合標(biāo)液加入5nmol/L內(nèi)標(biāo)液100ul；

225pmol/L氨基酸混合標(biāo)液制備：精密吸取900ul250pmol/L氨基酸混合標(biāo)液加入5nmol/L內(nèi)標(biāo)液100ul；

90pmol/L氨基酸混合標(biāo)液制備：精密吸取900ul100pmol/L氨基酸混合標(biāo)液加入5nmol/L內(nèi)標(biāo)液100ul。

1.3.3色譜條件

樣品自動(dòng)柱前衍生化程序：吸取硼酸緩沖液5ul，再吸取OPA試劑1ul，洗針1次，吸取樣品1ul，原位混合6次。吸取FMOC試劑1ul，洗針1次，原位混合3次，進(jìn)樣。

色譜柱：HypersilAA-ODSC182．1×200mm

流動(dòng)相A：醋酸鈉1.36±0.025g，加入純水500mL溶解，加EDTA溶液50ul，再加三乙胺90ul，用1％-2％醋酸調(diào)pH=7.20±0.05，再加入四氫呋喃1.5mL，混合均勻。

流動(dòng)相B：醋酸鈉1.36±0.025g，加入純水100mL溶解，用1％一2％醋酸調(diào)pH=7.20±0.05，將此溶液加至乙腈200mL和甲醇200mL的混合物中，并混合均勻。

柱溫：40℃紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：338nm；

梯度洗脫：流動(dòng)相A：以0.45ml/min在0-17min由100%減至40%，17min-18min由40%減少至0；流動(dòng)相B：以0.45ml/min在0-17min由0增至60%，17min-18min由60%增至100%，18.1min-23.9min流速由0.45ml/min-0.80ml/min，運(yùn)行至24min結(jié)束。

1.3.4測(cè)定方法和數(shù)據(jù)處理

分別精密量取對(duì)照品溶液和供試樣品各1ul，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至脯氨酸峰出峰后即得。以3種濃度的標(biāo)樣制作校正表，按Agilent公司提供的氨基酸分析軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

2結(jié)果與分析

2.1紫蘇屬植物葉片中氨基酸組成及含量比較

27份材料葉片中均測(cè)得17種氨基酸，其氨基酸種類較齊全。所測(cè)氨基酸中以甘氨酸平均含量最高，達(dá)6.68mg/g，其次是亮氨酸和谷氨酸，分別為4.77mg/g和4.59mg/g。與人體健康關(guān)系最為密切的賴氨酸平均含量有1.87mg/g。7種必需氨基酸總量平均為14.58mg/g，占氨基酸總量的比例為32.43%。

氨基酸總量超過(guò)50mg/g的材料共有6份（P06-11紫、P06-6、P06-7、P06-12紫、P06-15紫、P06-13），其中材料P06-7氨基酸總量最高，達(dá)57.65mg/g，較總含量最低的材料P06-33多23.07mg/g。17種氨基酸中有9種氨基酸（天冬氨酸、谷氨酸、蘇氨酸、丙氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸）含量均以P06-7最高，而有6種氨基酸（絲氨酸、甘氨酸、酪氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸）含量的最低值出現(xiàn)在P06-33中。必需氨基酸含量變化范圍在11.10-19.55mg/g之間，仍以P06-7為最高。非必需氨基酸含量的變化趨勢(shì)與氨基酸總量的變化趨勢(shì)大致相同。

食物中必需氨基酸含量以及所占的比例是決定植物營(yíng)養(yǎng)及食用價(jià)值的重要因素。從表3中可以看出，供試材料的必需氨基酸含量占總氨基酸含量的比例在0.30-0.35之間，必需氨基酸與非必需氨基酸的比例在0.42-0.53之間，基本接近與WHO/提出的E/E+N40%，E/N0.6的參考蛋白模式。

各氨基酸在材料間的變異較大。變異系數(shù)最大的是脯氨酸，達(dá)59.19%，其次是組氨酸和賴氨酸，分別為29.91%和25.63%。異亮氨酸的變異系數(shù)最小，為11.34%，其它氨基酸的變異系數(shù)均在10%-20%之間。氨基酸總量、必需氨基酸和非必需氨基酸含量的變異系數(shù)在10%-15%之間。2.2紫蘇屬植物葉片氨基酸組成及含量比較

比較紫蘇屬植物不同原（變）種葉片中氨基酸組成及含量發(fā)現(xiàn)，同一氨基酸在各原（變）種間含量不同。17種氨基酸中有12種氨基酸（丙氨酸、絲氨酸、甘氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、賴氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸）含量的最高值出現(xiàn)在野生紫蘇中，酪氨酸、脯氨酸、精氨酸、蛋氨酸含量的最高值出現(xiàn)在回回蘇中，組氨酸含量的最高值出現(xiàn)在紫蘇中。而有13種氨基酸（脯氨酸、絲氨酸、甘氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、組氨酸、賴氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸、蘇氨酸）含量的最低值出現(xiàn)在白蘇中。

參照王陸黎等文中的氨基酸分析方法，將氨基酸分為半必需氨基酸、必需氨基酸、藥效氨基酸、香甜味氨基酸等幾大類。通過(guò)對(duì)紫蘇屬不同原（變）種中必需氨基酸、藥效氨基酸、香甜味氨基酸、半必需氨基酸的含量和氨基酸總量比較分析發(fā)現(xiàn)，除半必需氨基酸外，含量由高到低的順序都是野生紫蘇＞回回蘇＞紫蘇＞白蘇。而半必需氨基酸含量的順序是回回蘇＞野生紫蘇＞紫蘇＞白蘇。野生紫蘇中，氨基酸總量達(dá)50.23%，必需氨基酸、藥效氨基酸和香甜味氨基酸的含量分別為16.48%、33.24%和45.21%。由此可以看出，野生紫蘇是紫蘇屬植物中氨基酸含量豐富的資源。

3討論

張洪等研究成熟紫蘇葉片中氨基酸含量結(jié)果表明，其葉中氨基酸（除色氨酸）含量范圍為0.11%-1.07%，氨基酸總量達(dá)7.08%。劉月秀等對(duì)3個(gè)月生的完整健全紫蘇葉片中氨基酸含量的研究結(jié)果表明，其葉片中氨基酸（除色氨酸）含量范圍在0.112%-1.071%之間，氨基酸總量為7.372%。兩者的研究結(jié)果基本一致。本實(shí)驗(yàn)對(duì)3個(gè)月生的紫蘇屬植物葉片中氨基酸含量的研究結(jié)果表明，其葉片中氨基酸（除色氨酸因水解被破壞未另作測(cè)定）平均含量在1.03-6.68mg/g（即0.103%-0.668%）之間，氨基酸總量?jī)H為44.96mg/g（即4.496%）。本結(jié)果偏低于前兩者的研究結(jié)果。究其原因，可能一方面與供試材料不同有關(guān)，另一方面還可能與栽培條件以及樣品采收時(shí)期不同等有關(guān)。曾有研究表明，環(huán)境和栽培條件的差異能夠引起作物中蛋白質(zhì)和氨基酸含量的顯著變異。此外，還可能與氨基酸測(cè)定方法不同有一定關(guān)系。

作為食物資源的紫蘇屬植物葉片其蛋白質(zhì)中必需氨基酸含量以及所占的比例是決定紫蘇屬植物營(yíng)養(yǎng)及食用價(jià)值的重要因素。本試驗(yàn)中，必需氨基酸總量平均為14.58mg/g，占氨基酸總量的比例為32.43%。供試材料中P06-7的必需氨基酸含量達(dá)19.55mg/g，氨基酸總量為57.65mg/g，均比其他材料高，且必需氨基酸配比也較為平衡，綜合性狀表現(xiàn)優(yōu)良，可以作為優(yōu)異資源材料加以進(jìn)一步選育和利用。

紫蘇屬植物不同原（變）種葉片中均含有17種氨基酸（包括7種為人體必需氨基酸），以WHO/提出的E/E+N40%，E/N0.6的參考蛋白模式為FAO標(biāo)準(zhǔn)，本試驗(yàn)材料基本接近參考蛋白模式，是重要的氨基酸資源。同時(shí)，本試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)紫蘇屬植物葉片中氨基酸含量有較大變異系數(shù)，具有一定的選擇空間，可考慮育成富含各類氨基酸的新品種。

植物體中的氨基酸不僅是蛋白質(zhì)的組成成分，還是許多植物藥材的藥效物質(zhì)。如，具有清肺止渴、生津滋補(bǔ)的大葉三七葉其氨基酸總量為6.03%，藥效氨基酸含量占總氨基酸的60.70%；有刺激胰島素分泌、降低血糖作用的桑葉其氨基酸總量達(dá)48.75mg/g，藥效氨基酸含量占總氨基酸含量的63.59%。而比較紫蘇屬植物不同原（變）種的各類氨基酸含量，發(fā)現(xiàn)野生紫蘇氨基酸總量達(dá)50.23mg/g，藥效氨基酸含量占氨基酸總量的66.17%，香甜味氨基酸含量占總氨基酸的80%。因此，野生紫蘇在開發(fā)氨基酸食品和提取藥效氨基酸上應(yīng)該具有較大潛力。

參考文獻(xiàn)

［1］劉月秀.紫蘇屬植物的研究和利用［J］.中國(guó)野生植物資源，1996，（3）：24.

［2］劉月秀，張衛(wèi)明.紫蘇化學(xué)成分分析［J］.廣西植物，1999，19（3）：285-288.

［3］于長(zhǎng)青，趙媛，朱剛，等.紫蘇葉的藥用研究［J］.中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng)，2008，（1）：52-53.

［4］王陸黎，張甲生，肖國(guó)拾等.紅景天根中氨基酸含量測(cè)定［J］.白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，25（1）：26-27.

［5］張洪，黃建韻，趙東海.紫蘇營(yíng)養(yǎng)成分的研究［J］.食品與機(jī)械，2006，22（2）：41-43.

［6］曹廣才.栽培條件對(duì)小麥的蛋白質(zhì)和幾種氨基酸含量的影響（綜述）［J］.青海農(nóng)林科技，1985：45-49.

［7］李映麗，呂居?jì)?，馮變玲等.參葉-大葉三七葉中氨基酸及微量元素分析［J］.西北藥學(xué)雜志，1996，11（增刊）：11-13.

［8］魏京廣，代建國(guó)，金剛等.柱前衍生RP-HPLC法測(cè)定桑葉中氨基酸含量［J］.中國(guó)飼料，2007，（1）：32-34.

［9］FAO/WHO.Energyandproteinrequirements［R］.WHO.Tech.Rep.Ser.NO.522，F(xiàn)AO/WHO，Geneva，Switzerland1973，38.