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【摘要】探討復(fù)方靈芝口服液改善睡眠功能的最佳配伍劑量.［方法］采用正交設(shè)計(jì)確定和篩選合理的配方，制備復(fù)方靈芝口服液，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察復(fù)方靈芝口服液對(duì)小鼠自主活動(dòng)、體重及對(duì)戊巴比妥鈉誘導(dǎo)的睡眠時(shí)間的影響.［結(jié)果］復(fù)方靈芝口服液的最佳配伍劑量為靈芝取120mL/L或80mL/L，大棗取180mL/L，山楂取60mL/L.復(fù)方靈芝口服液可顯著延長(zhǎng)戊巴比妥鈉誘導(dǎo)的小鼠睡眠時(shí)間，顯著增加閾下劑量戊巴比妥鈉誘導(dǎo)的小鼠睡眠發(fā)生率.［結(jié)論］復(fù)方靈芝口服液可加強(qiáng)深度睡眠，提高睡眠質(zhì)量.

【關(guān)鍵詞】睡眠靈芝最佳劑量小鼠

ABSTRACT:OBJECTIVETostudytheoptimaldoseoforalsolutionofthecomplexprescriptionganodermalucidumforimprovementofsleepfunction.METHODSTheoralsolutionofthecomplexprescriptionganodermalucidumwaspreparedbytheorthogonaldesignandscreeningappropriateformula,anditseffectswereobservedforautonomicactivities,bodyweightandsodiumpentobarbitalinducedhoursofsleepinmice.RESULTSTheoptimaldoseoforalsolutionofthecomplexprescriptionganodermalucidumwas120mL/Lor80mL/Lofganodermalucidumextract,180mL/Lofcommonjujubeextractand60mL/Lofhawthornfruit.Theoralsolutionofthecomplexprescriptionganodermalucidumcouldprolongsignificantlyprolongthesodiumpentobarbitalinducedhoursofsleepandincreasedtheincidenceofsleepinducedbysubthresholddoseofsodiumpentobarbitalinmice.CONCLUSIONTheoralsolutionofthecomplexprescriptionganodermalucidumreinforcesdepthofsleep,improvesthesleepquality,andhashealthcarefunctionforsleepimprovement.

Keywords:sleep;Ganodermalucidum;optimaldose;mice

靈芝（Ganodermalucidum(Leyss.exFr.)Kerst.)屬擔(dān)子菌亞門，層菌綱，非褶菌目，多孔菌科，靈芝屬真菌，俗稱靈芝草，主要成分為麥角甾醇、順蓖麻酸及反丁烯二酸，此外尚含有氨基酸、葡萄糖、多糖類、樹(shù)脂及甘露醇等［1］.近年來(lái)國(guó)內(nèi)外對(duì)靈芝的化學(xué)成分、藥理作用及臨床應(yīng)用等方面進(jìn)行了廣泛的研究.研究結(jié)果表明，靈芝具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗病毒、抗衰老、抗疲勞、降血糖、降血壓、消炎和鎮(zhèn)靜催眠等藥理作用［2］.復(fù)方靈芝口服液是以靈芝為主要原料，配合藥食兩用的山楂和大棗，經(jīng)過(guò)科學(xué)的提取及加工制備而成.本研究通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，探討復(fù)方靈芝口服液改善睡眠功能的最佳配伍劑量.

1材料與方法

1.1材料取昆明種小鼠140只，體重為18～22g，由延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科提供.靈芝、大棗及山楂原液由吉林省延邊原始林生態(tài)保健食品有限公司提供；戊巴比妥鈉為上海行知化工廠產(chǎn)品；褪黑素為江蘇常州醫(yī)藥技術(shù)開(kāi)發(fā)公司產(chǎn)品.

1.2復(fù)方靈芝口服液最佳組合劑量選擇試驗(yàn)最佳組合劑量篩選采用L9(34)3個(gè)因素及3個(gè)水平設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，其因素及水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1.根據(jù)表1制備成9種不同配伍比例的復(fù)方靈芝溶液（表2）.取90只小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為9組，即對(duì)應(yīng)復(fù)方靈芝的9種劑量組合，每組各為10只.每日灌胃給予小鼠相應(yīng)復(fù)方靈芝溶液1次，劑量為10mL/kg,連續(xù)14d.末次灌胃15min后，腹腔注射45mg/kg戊巴比妥鈉.以小鼠的翻正反射消失為指標(biāo)，選擇最佳劑量組合［2，3］.表1因素水平表表2復(fù)方靈芝劑量組合

1.3復(fù)方靈芝口服液改善睡眠的實(shí)驗(yàn)根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果,將原液按最佳組合劑量組合后，配制成3種劑量，即高、中、低劑量（分別相當(dāng)于人體推薦量的20、10、5倍）［4～6］.取50只小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為5個(gè)組，即空白對(duì)照組、褪黑素組、復(fù)方靈芝口服液大、中、小劑量組，每組各為10只.每日分別灌胃給予復(fù)方靈芝口服液大、中、小劑量組小鼠220、110、55mg/kg復(fù)方靈芝溶液；灌胃給予空白對(duì)照組小鼠等體積生理鹽水；灌胃給予褪黑素組小鼠1mg/kg褪黑素腦白金溶液；連續(xù)21d.末次給藥15min后，腹腔注射60mg/kg戊巴比妥鈉.以小鼠體重及翻正反射消失對(duì)小鼠體重及睡眠時(shí)間的影響為指標(biāo)，觀察復(fù)方靈芝口服液對(duì)小鼠體重及睡眠時(shí)間的影響.數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析.2結(jié)果

2.1復(fù)方靈芝口服液的最佳劑量組合方案睡眠潛伏期正交試驗(yàn)結(jié)果示，復(fù)方靈芝口服液最佳配方為靈芝取第3水平(P＜0.01)，山楂取第1水平(P＜0.01)，大棗取任意水平(P＞0.05)；睡眠時(shí)間正交試驗(yàn)結(jié)果示，復(fù)方靈芝口服液的最佳配方為靈芝取第2水平（P＜0.01），大棗取第3水平(P＜0.01)，山楂取任意水平(P＞0.05).由上述2個(gè)正交試驗(yàn)結(jié)果得出，復(fù)方靈芝口服液的最佳配方為靈芝取3或2水平，大棗取3水平，山楂取1水平.

2.2復(fù)方靈芝口服液改善睡眠實(shí)驗(yàn)各劑量組小鼠實(shí)驗(yàn)前后體重與空白對(duì)照組比較均無(wú)顯著性差異（P＞0.05），提示復(fù)方靈芝口服液對(duì)小鼠體重?zé)o影響，見(jiàn)表3；褪黑素組、空白對(duì)照組、復(fù)方靈芝口服液大、中、小劑量組小鼠睡眠時(shí)間分別為(132.7±30.1)min，(92.0±28.2)min，(172.1±28.2)min，(148.8±26.9)min，(120.1±28.2)min，各劑量組小鼠睡眠時(shí)間均較空白對(duì)照組小鼠明顯延長(zhǎng)，相比較均有顯著性差異(P＜0.01)，提示復(fù)方靈芝口服液具有顯著延長(zhǎng)戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間的作用.褪黑素組、空白對(duì)照組、復(fù)方靈芝口服液大、中、小劑量組小鼠睡眠潛伏期分別為(30.1±4.0)min，(34.6±5.9)min，(50.7±17.1)min，(35.7±12.0)min，(36.7±10.1)min，各劑量組小鼠睡眠潛伏期均無(wú)明顯變化，與空白對(duì)照組比較均無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，提示復(fù)方靈芝口服液對(duì)戊巴比妥鈉睡眠潛伏期無(wú)明顯的作用.表3小鼠體重的變化情況

3討論

人類三分之一的時(shí)間在睡眠中度過(guò)，睡眠與健康的關(guān)系逐漸受到關(guān)注.隨著現(xiàn)代化進(jìn)程的推進(jìn)，社會(huì)競(jìng)爭(zhēng)日益激烈，生活方式亦發(fā)生變化，造成失眠癥的發(fā)病率不斷升高.長(zhǎng)期失眠對(duì)人體的身心健康有害，易引發(fā)多臟器功能紊亂和免疫功能下降，且與潰瘍病、高血壓病、冠心病、糖尿病及其他精神疾病亦有一定的相關(guān)性.近年來(lái)，開(kāi)發(fā)研制了多種改善睡眠的藥物及保健品，雖然對(duì)睡眠改善作用是肯定的，但其中大部分含有動(dòng)物激素，且有不良反應(yīng)，故不宜長(zhǎng)期使用［7，8］.本實(shí)驗(yàn)采用正交試驗(yàn)，篩選出復(fù)方靈芝口服液的最佳配方為靈芝取120mL/L或80mL/L，大棗取180mL/L，山楂取60mL/L.本實(shí)驗(yàn)藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，復(fù)方靈芝口服液可顯著延長(zhǎng)小鼠戊巴比妥鈉誘導(dǎo)的睡眠時(shí)間，但對(duì)其睡眠潛伏期無(wú)影響.綜上所述，復(fù)方靈芝口服液具有改善小鼠睡眠的作用，其機(jī)制有待于進(jìn)一步探討.

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