前言：想要寫出一篇令人眼前一亮的文章嗎？我們特意為您整理了5篇醫(yī)學(xué)檢驗常用染色方法范文，相信會為您的寫作帶來幫助，發(fā)現(xiàn)更多的寫作思路和靈感。

醫(yī)學(xué)檢驗常用染色方法范文第1篇

1 資料與方法

1.1試劑和器材 金胺O熒光染色液和萋-尼染色液均按《結(jié)核病診斷實驗室檢驗規(guī)程》[1]進(jìn)行配制；使用德國蔡司CX-21發(fā)光二極管全冷光源熒光顯微鏡及奧林巴斯CH30生物顯微鏡。

1.2檢測標(biāo)本 痰標(biāo)本來自2014年1月～2015年12月丹陽市人民醫(yī)院結(jié)核病門診就診的可疑肺結(jié)核患者，全部為初診患者。本實驗共收集432例患者的痰標(biāo)本1296份。每位患者收集3份深咯痰標(biāo)本，分別為清晨痰、夜間痰和即時痰。標(biāo)本量為3～5 ml，每份痰標(biāo)本涂抹2張玻片，分別進(jìn)行萋-尼染色和金胺O熒光染色。

1.3涂片 用竹簽挑取痰標(biāo)本的膿樣、血樣或干酪樣部分約0.05～0.1 ml于玻片正面的右側(cè)2/3中央處，均勻涂抹成寬1.0 cm，長2.0 cm的橢圓形痰膜，厚薄適中，室溫下自然干燥。按照《結(jié)核病診斷實驗室檢驗規(guī)程》[1]進(jìn)行初染、脫色、復(fù)染。

1.4鏡檢及結(jié)果判定 萋-尼染色用普通光學(xué)顯微鏡鏡檢，10倍目鏡、100倍油鏡觀察。在淡藍(lán)色背景下，結(jié)核分枝桿菌呈紅色，其他細(xì)菌和細(xì)胞呈藍(lán)色。金胺O熒光染色用發(fā)光二極管顯微鏡，10倍目鏡、40倍物鏡觀察痰涂片，在暗視野背景下，結(jié)核分枝桿菌呈現(xiàn)橘黃色熒光，呈桿狀或短棒狀。萋-尼染色鏡檢結(jié)果報告標(biāo)準(zhǔn)為：抗酸桿菌陰性：連續(xù)觀察300個不同視野，未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌；報告抗酸桿菌菌數(shù)：1～8條/300視野；抗酸桿菌陽性（1+）：3～9條/100視野；抗酸桿菌陽性（2+）：1～9條/10視野；抗酸桿菌陽性（3+）：1～9條/視野；抗酸桿菌陽性（4+）：≥10條/每視野。金胺O熒光染色鏡檢結(jié)果報告標(biāo)準(zhǔn)為：金胺O熒光染色抗酸桿菌陰性：0條/50視野；金胺O熒光染色報告抗酸桿菌菌數(shù)：1～9條/50視野；金胺O熒光染色抗酸桿菌陽性（1+）：10～99條/50視野；熒光染色抗酸桿菌陽性（2+）：1～9條/視野；金胺O熒光染色抗酸桿菌陽性（3+）：10～99條/視野；金胺O熒光染色抗酸桿菌陽性（4+）：≥100條/每視野。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法 采用STATA 10.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行χ2檢驗，P

2 結(jié)果

金胺O熒光染色組432例可疑結(jié)核病患者的痰標(biāo)本中檢出138例陽性，陽性率為31.9%；萋-尼組檢出80例陽性，陽性率為18.5%；χ2=7.21，P

3 討論

金胺O熒光染色方法染色鏡檢時抗酸桿菌在暗視野背景下發(fā)出橘黃色熒光，黑色背景與抗酸桿菌對比鮮明，非常明顯容易發(fā)現(xiàn)，金胺O熒光染色染色讀片放大倍數(shù)為400倍（40倍物鏡，10倍目鏡），所觀察的視野面積大，故它的靈敏度比萋-尼染色方法普通顯微鏡鏡檢高[2]。本研究結(jié)果顯示，金胺O熒光染色組檢出陽性率為31.9%，萋-尼組為18.5%，χ2=7.21，P

參考文獻(xiàn)：

[1]中國防癆協(xié)會基礎(chǔ)專業(yè)委員會.結(jié)核病診斷實驗室檢驗規(guī)程[M].北京：中國教育文化出版社，2006：13-29.

[2]尚美.劉冠，趙立平，等.發(fā)光二極管熒光顯微鏡實驗室診斷效果評價[J].中國防癆雜志，2010，32（5）：275-278.

[3]陳燕梅，錢明，江勇，等.熒光染色發(fā)光二極管顯微鏡檢測結(jié)核分枝桿菌的效果分析[J].中國防癆雜志，2011，33（9）：585-587.

醫(yī)學(xué)檢驗常用染色方法范文第2篇

[中圖分類號]R-331[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]C [文章編號]1673-7210（2007）11（b）-139-01

發(fā)熱是內(nèi)科中最常見的癥狀。發(fā)熱的原因絕大多數(shù)是病毒或細(xì)菌感染。如何快速準(zhǔn)確地鑒別出感染性發(fā)熱是細(xì)菌還是病毒引起的，對病人的治療有重要意義。硝基藍(lán)四氮唑（NBT）試驗對鑒別細(xì)菌與病毒性感染有重要參考價值[1]。 但是，我們在多年的實踐中發(fā)現(xiàn)NBT試驗有以下缺點：它所用的試劑需要自己配制，質(zhì)量不易得到保證，并且容易失效。中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶（NAP）染色是血細(xì)胞化學(xué)染色中一種常用的染色方法。我們通過實踐發(fā)現(xiàn)NAP染色與NBT試驗都能快速、比較準(zhǔn)確地鑒別出病毒感染與細(xì)菌感染。

1 原理與意義

中性粒細(xì)胞中的堿性磷酸酶在堿性條件下將α-磷酸萘酚水解，產(chǎn)生的α-萘酚與重氮鹽偶聯(lián)形成沉淀，定位于胞質(zhì)中。具體操作方法參見上海太陽生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶測定試劑盒（批號為507007）的說明書，最后計算出陽性率和積分值。細(xì)菌性感染時NAP活性增高，從而出現(xiàn)陽性率和積分值增高，單純病毒性感染時NAP活性一般無變化，據(jù)此可大致鑒別出感染類型。NBT試劑自己配制，具體實驗方法參見鄭州大學(xué)微生物教研室編寫的《微生物學(xué)實驗指導(dǎo)》。NBT陽性細(xì)胞超過10%，該標(biāo)本就是NBT試驗陽性；病毒性感染時，該試驗陰性。

2 結(jié)果

細(xì)菌性感染時NAP活性增高，NBT試驗陽性。我們?yōu)榱吮容^這兩種方法診斷細(xì)菌性感染的靈敏性，隨機(jī)選擇100名已被確診為細(xì)菌性感染并且沒有血液病的發(fā)熱病人，同時進(jìn)行NAP染色及NBT試驗。結(jié)果如下：100名病人中NAP活性增高的有98人，NBT試驗陽性的有96人。經(jīng)χ2檢驗，NAP活性增高率與NBT陽性率無顯著性差異（χ2=0.72，P>0.05）。

對于感染性發(fā)熱病人，NAP活性不增高的一般不是細(xì)菌感染，NBT實驗陰性的一般不是細(xì)菌感染。我們?yōu)榱吮容^這兩種方法診斷細(xì)菌性感染的特異性，隨機(jī)選擇100名被確診為單純病毒感染并且沒有血液病的發(fā)熱病人，同時進(jìn)行NAP染色及NBT試驗，結(jié)果如下：100名病人NAP活性增高的有13人，活性正常的有87人；NBT試驗陽性的有4人，陰性的有96人。經(jīng)χ2檢驗，NAP活性正常率與NBT陰性率有非常顯著性差異（χ2＝4.11，P

3 討論

由以上資料可看出，在鑒別發(fā)熱是否為細(xì)菌感染時，NAP染色與NBT試驗相比靈敏性相似，特異性稍差。NAP的活性還受某些生理因素的影響可能是特異性稍差的原因[2]。NAP染色雖有以上缺陷，但是它有市售的試劑盒，質(zhì)量有保證，操作不太復(fù)雜，不需特殊設(shè)備，所以對感染性發(fā)熱的鑒別診斷很有價值。要利用好NAP染色要注意以下幾點：第一，發(fā)熱病人是否有影響NAP活性的血液病。第二，不同年齡段NAP活性不同，要建立不同年齡段的參考值。

[參考文獻(xiàn)]

[1]付立礎(chǔ).NBT試驗在感染性發(fā)熱中的應(yīng)用[J].河南醫(yī)藥信息,2002,10(22):36-37.

醫(yī)學(xué)檢驗常用染色方法范文第3篇

1.川北醫(yī)學(xué)院病原生物與免疫學(xué)教學(xué)實驗中心，四川南充 637000；

2.西華師范大學(xué)生命科學(xué)院，四川南充 637002

[摘要] 目的 比較細(xì)菌在不同培養(yǎng)基和不同菌齡條件下鞭毛的染色效果，探索細(xì)菌鞭毛染色形態(tài)鑒定理想的培育基和培育時間。 方法 ①將普通變形桿菌分別接種在肉湯培養(yǎng)基、瓊脂培養(yǎng)基、血瓊脂培養(yǎng)基3種不同培養(yǎng)基內(nèi)，37℃培養(yǎng)18 h后，染色鏡檢，選擇取出染色效果最好的理想培養(yǎng)基；②將普通變形桿菌接種到理想培養(yǎng)基上分別培育8、12、18、24 h不同時間后，染色鏡檢，選擇出細(xì)菌鞭毛染色效果最好的培育時間。 結(jié)果 ①血瓊脂中培養(yǎng)的細(xì)菌鞭毛結(jié)構(gòu)清晰、形態(tài)完整、背景干凈，鏡檢效果最好；②12～18 h菌齡的細(xì)菌菌體中等大小，鞭毛清晰完整，鏡檢效果好。 結(jié)論 血瓊脂是鞭毛染色教學(xué)和形態(tài)鑒定理想的培養(yǎng)基；12～18 h是細(xì)菌在血瓊脂培養(yǎng)基中的最佳生長時間。

[關(guān)鍵詞] 鞭毛染色；培養(yǎng)基和培養(yǎng)時間；鍍銀染色；普通變形桿菌

[中圖分類號] R446 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210（2014）03（b）-0035-03

The study of culture conditions in bacterial flagella staining

WANG Yan1 ZENG Yu2

1.Experimental Teaching Center for Pathogenic Subject， North Sichuan Medical University， Sichuan Province， Nanchong 637000， China； 2.College of Life Science， China West Normal University， Sichuan Province， Nanchong 637002， China

[Abstract] Objective To compare the bacterial flagella staining effect in different medium and different age conditions， and to explore the best medium and incubation time for bacterial flagella staining teaching and morphological identification. Methods ①The Proteus vulgaris were inoculated in broth medium， agar medium， and blood agar medium 3 different media， cultured for 18 hours based on 37℃， then stained and checked with the microscopic， and the best medium was chosen. ②The Proteus vulgaris were inoculated into the ideal medium culture for 8， 12， 18， 24 h respectively， then stained and checked with microscopic， and the best time of cultivation in flagella staining effect was selected. Results ①The bacterial growth on blood agar had good results， with complete structure， clear morphological and clean background. ②12-18 hours age had the best effect with clear and complete flagella. Conclusion The blood agar is the best medium for bacterial flagella staining teaching and morphological identification. Meanwhile， the best time of bacteria in culture is 12-18 hours.

[Key words] Flagella staining； Media and incubation time； Silver staining； Proteus vulgaris

細(xì)菌鞭毛是指存在于細(xì)菌細(xì)胞壁外的呈波浪彎曲的細(xì)長絲狀物，是細(xì)菌的運動器官。細(xì)菌鞭毛在不同細(xì)菌中的著生位置和數(shù)量是不一樣的，是細(xì)菌種類鑒定和分類的重要依據(jù)之一[1-4]。細(xì)菌的鞭毛非常纖細(xì)，長5～20 μm，直徑僅10～20 nm，小于光學(xué)顯微鏡的0.2 μm的分辨率，因此，鞭毛需經(jīng)過增粗直徑后再染色才能在光學(xué)顯微鏡下觀察[5]。鞭毛的染色效果與細(xì)菌的培養(yǎng)條件和培養(yǎng)基的類型密切相關(guān)，如劉少有等[6]發(fā)現(xiàn)嗜肺軍團(tuán)菌在BCYE培養(yǎng)基上生長的鞭毛較NYE培養(yǎng)基中數(shù)量多、生長好；謝文熙[7]研究結(jié)果表明，8～12 h為細(xì)菌鞭毛染色的最佳觀察時間。

普通變形桿菌（proteus vulgaris），廣泛分布于自然界，為周鞭毛菌，易于觀察，是細(xì)菌鞭毛教學(xué)和實驗的理想菌種之一。鞭毛染色步驟繁瑣且結(jié)果不穩(wěn)定，不同的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件對細(xì)菌鞭毛的染色效果影響很大，如何選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件是細(xì)菌鞭毛形態(tài)學(xué)研究的熱點問題之一[8-11]。同時由于操作過程復(fù)雜，影響因素多，成功率偏低，使得鞭毛染色在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教學(xué)中往往較難取得預(yù)期的效果。因此，本研究以普通變形桿菌為菌種，通過常規(guī)染色方法（鍍銀染色法）來比較普通變形桿菌在不同培養(yǎng)基（基礎(chǔ)肉湯培養(yǎng)基、普通瓊脂培養(yǎng)基、血瓊脂培養(yǎng)）和不同培育時間（8、12、18、24 h）下的鞭毛染色效果，探討適宜普通變形桿菌鞭毛培育的最佳條件（培養(yǎng)基和培育時間），以提高鞭毛染色的成功率，從而更好地服務(wù)于基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的實驗教學(xué)。

1 材料與方法

1.1 材料

菌種為普通變形桿菌，保存于川北醫(yī)學(xué)院病原生物與免疫學(xué)教學(xué)實驗中心。實驗中所用的試劑： 肉浸膏、蛋白胨、瓊脂粉購于杭州天和微生物試劑有限公司；NaCl、FeCl3購于成都科龍化工試劑廠；硝酸銀購于天津市博迪化工有限公司；兔血來源于川北醫(yī)學(xué)院動物中心；培養(yǎng)箱購于上海精宏實驗設(shè)備有限公司（型號為SHP-250）。

1.2 培養(yǎng)基[12]

1.2.1 基礎(chǔ)肉湯培養(yǎng)基 于1000 mL蒸餾水中加入固體物質(zhì)，包括3.0 g肉浸膏，10.0 g蛋白胨，5.0 g NaCl，1000 ml蒸餾水，混合加熱溶解；校正pH至7.4～7.6，煮沸3～5 min，用濾紙過濾；分裝于適當(dāng)試管內(nèi)，121℃高壓蒸汽滅菌20 min后，置陰暗處貯存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 基礎(chǔ)瓊脂培養(yǎng)基 于基礎(chǔ)肉湯培養(yǎng)基中加入15%的瓊脂粉，121℃高壓蒸汽滅菌20 min后倒入平板上冷卻待用。

1.2.3 血瓊脂培養(yǎng)基 將已滅菌的普通瓊脂培養(yǎng)基加熱融化，待其冷卻至50℃左右，在無菌條件下加入脫纖維兔血5%～10%，輕搖勻（勿使有氣泡）后倒入平板上冷卻待用。

1.3 菌種

從菌種庫取出普通變形桿菌，采用點接法將細(xì)菌接種于基礎(chǔ)培養(yǎng)基平板上，放入37℃恒溫培養(yǎng)箱里連續(xù)培養(yǎng)18～24 h，后再轉(zhuǎn)接于另一新鮮平板培養(yǎng)基中繼續(xù)培育，如此重復(fù)培育3代（次）后備用。

1.4 染液制作

媒染劑A[13]：3.0 g FeCl3·6H2O，溶于0.01 mol/L的HCl溶液100 mL中，室溫存放，長期穩(wěn)定。

媒染劑B[13]：單寧酸15.0 g溶解于100 mL蒸餾水中，加入37%甲醛1.0 mL。室溫存放，長期穩(wěn)定。

銀染液C[14]：AgNO3 5.0 g溶于100 mL蒸餾水，取出10.0 mL備用，向余下的90 mL硝酸銀溶液緩慢滴加濃氨水，邊加邊搖動，直至形成沉淀完全溶解重新形成澄清液為止，再將備用的AgNO3溶液緩慢回滴，直至形成穩(wěn)定薄霧狀溶液。

1.5 載玻片處理

將新載玻片放入洗衣粉水清潔液中煮沸10 min，取出冷卻后用自來水沖洗干凈，再用清潔液浸泡煮沸10 min，自來水沖洗干凈。使用前放入95%酒精浸泡24 h，用時取出用紗布擦干。

1.6 染色方法

1.6.1 細(xì)菌培養(yǎng) ①將傳代后的普通變形桿菌分別以液體培養(yǎng)基接種法接種于肉湯管，點接法接種于基礎(chǔ)瓊脂平板和點接法接種于血瓊脂平板內(nèi)，37℃恒溫培養(yǎng)18 h，經(jīng)染色鏡檢后，選取染色效果最好的培養(yǎng)基。②將傳代的普通變形桿菌接種于染色效果最好的培養(yǎng)基上（隨機(jī)接種3份），分別在37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)8、12、18、24 h后染色鏡檢，確定染色效果最好的培育時間。

1.6.2 制片 于處理過的載玻片一端滴加2～3滴蒸餾水，用接種環(huán)以無菌操作法取菌落邊緣細(xì)菌一環(huán)，懸于蒸餾水中，待水滴稍變渾濁后立即移開接種環(huán)，靜置5 min讓鞭毛舒張開來，稍傾斜玻片，使菌液從玻片的一端流向另一端，放置臺上，自然干燥。

1.6.3 染色 取A液1 mL滴入帶有塞的試管內(nèi)，再加入B液1 mL，充分混合，用酒精燈火焰微熱20 s，稍冷卻后取適量混合液滴于制片好的菌膜上并完全覆蓋菌膜染50 s，用蒸餾水沖洗干凈。因A、B混合物不穩(wěn)定，故要盡快使用，否則影響染色效果。

滴加銀染液C覆蓋住菌膜，加熱至蒸氣微冒（約持續(xù)20 s），用蒸餾水沖洗干凈，并保證染液不被蒸干。

1.7 鏡檢觀察

用吸水紙吸干已染色好的載玻片，后在顯微鏡（油鏡）下鏡檢、觀察、拍照。為了避免實驗誤差，每次實驗均在同等條件下重復(fù)3次，不同批次所得的染色玻片均由同一人進(jìn)行鏡檢觀察。

2 結(jié)果

2.1 培養(yǎng)基對細(xì)菌鞭毛染色效果的影響

分別比較接種于3種不同培育基（普通肉湯培養(yǎng)基、普通瓊脂培養(yǎng)基和普通血瓊脂培養(yǎng)基）上普通變形桿菌鞭毛的鏡檢效果可知，在血瓊脂培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)菌鞭毛伸展性好，菌體形態(tài)完整，粗細(xì)均勻，總體效果好，而普通肉湯培養(yǎng)基和普通瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)的鞭毛較稀疏，結(jié)果則相對較差。

2.2 菌種培育時間對細(xì)菌鞭毛染色效果的影響

培養(yǎng)時間長短對普通變形桿菌的鞭毛生長也有較大影響。將普通變形桿菌接種在培育效果較好的血瓊脂培養(yǎng)基中培育，分別培養(yǎng)8、12、18、24 h，比較不同的培養(yǎng)時間下普通變形桿菌的鏡下效果：8 h菌齡的細(xì)菌菌體粗大且很長、鞭毛周身如毛絨狀，這可能是變形桿菌菌體還處于分裂繁殖階段，而鞭毛也正在發(fā)育；12 h菌齡細(xì)菌菌體中等大小，鞭毛清晰完整，效果好；18 h菌齡的細(xì)菌菌體較短小，鞭毛周身且完整，易于觀察，24 h菌齡細(xì)菌菌體短小，鞭毛比較稀疏，有些菌體的鞭毛已脫落。因此選用12～18 h菌齡的細(xì)菌做鞭毛染色效果好，易于觀察。見圖1。

a：8 h；b：12 h；c：18 h；d：24 h

圖1 培養(yǎng)不同時間的細(xì)菌鞭毛染色圖（1000×）

3 討論

鞭毛染色步驟較多、過程復(fù)雜，影響其染色效果的因子較多，且難以量化，使得細(xì)菌的鞭毛染色歷來被認(rèn)為是難點多、不易掌握的一種方法。筆者結(jié)合本研究結(jié)果及工作實踐中的多次試驗，不斷總結(jié)，就如何提高細(xì)菌鞭毛染色效果提出以下建議和注意事項：①載玻片要處理干凈，不能有油漬，否則細(xì)菌游動不開堆積在一起，無法進(jìn)行觀察。較好的玻片標(biāo)準(zhǔn)：當(dāng)?shù)渭右坏握麴s水在上面時，水滴能快速均勻的擴(kuò)散開來。②在平板上接種細(xì)菌采用點接法，一般一個平板點接3處。③培養(yǎng)時間要掌握好，一般培養(yǎng)時間控制在12～18 h內(nèi)，若時間太短，剛形成的鞭毛較小，且菌體較粗大不利于觀察鞭毛，若時間太長則鞭毛易脫落也不利于觀察。④制片時，應(yīng)選取菌落邊緣的幼齡菌，且接種環(huán)應(yīng)先放入載玻片上的蒸餾水中靜置待用，當(dāng)細(xì)菌游動開來再拿出，切忌用涂抹法制片，否則易造成鞭毛脫落。⑤制得的片子只能自然干燥，不能加熱固定，否則細(xì)菌變形后鞭毛脫落不利于觀察。⑥染液A、B混合時要掌握好時間，且混合后盡快使用，不可久置，特別注意每一步染色后均需用蒸餾水進(jìn)行充分地漂洗，否則背景雜質(zhì)顆粒，不利于觀察。⑦用銀染液染色時要加熱，且加熱過程中應(yīng)及時添加染液，保證染液不干涸。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 李凡，徐志凱.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2013：18-20.

[2] Leifson E. Staining shape and arrangement of bacterial flagella [J]. Journal of Bacteriology，1951，62（4）：377-389.

[3] 杜曉艷，鞠曉紅，孫艷美，等.4種細(xì)菌鞭毛染色方法的比較[J].中國病原生物學(xué)雜志，2009，4（5）：390-391.

[4] 楊健，何永林，劉曄華.微生物教學(xué)中常用細(xì)菌染色方法的改進(jìn)[J].川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2003，18（4）：165.

[5] 谷海瀛.細(xì)菌鞭毛染色方法及其應(yīng)用[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2004，27（9）：611-615.

[6] 劉少有，賈力敏，萬超群.嗜肺軍團(tuán)菌簡易鞭毛染色法及在不同培養(yǎng)基上鞭毛的生長觀察[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志，1990，2（3）：57-59.

[7] 謝文熙.細(xì)菌鞭毛染色的效果和影響因素[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7（12）：1208.

[8] Grossart HP，Steward GF，Martinez J，et al. A simple，rapid method for demonstrating bacterial flagella [J]. Applied and Environmental Microbiology，2000，66（8）：3632-3636.

[9] Finegan SM，Smith RA. Enhanced staining of bacterial flagella using aged mordant in the silver stain [J]. Biotechnic & Histochemistry，1994，69（4）：199-202.

[10] Mayfield CI，Inniss WE. A rapid，simple method for staining bacterial flagella [J]. Canadian Journal of Microbiology，1977，23（9）：1311-1313.

[11] 陳翠萍，梁如玉，陳強(qiáng).細(xì)菌鞭毛染色方法的改進(jìn)[J].實驗科學(xué)與技術(shù)，2004，2（4）：19-21.

[12] 楊繼文.病原生物與免疫實驗學(xué)[M].北京：科學(xué)出版社，2013：40-60.

[13] 谷海瀛.細(xì)菌鞭毛鍍銀染色法的創(chuàng)新[J].中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2002，22（1）：106-111.

醫(yī)學(xué)檢驗常用染色方法范文第4篇

【關(guān)鍵詞】：婦科體檢； 宮頸刮片； 宮頸癌； 發(fā)病年齡； 病理學(xué)

【中圖分類號】R36 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】2095-6851（2014）04-0560-02

宮頸癌在我國是僅次于乳腺癌的惡性腫瘤，由于女性生殖道的生理構(gòu)造的特點，使子宮頸很容易受外界的影響，是最常見的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，使婦女的健康和生命受到了嚴(yán)重的威脅。從宮頸癌前病變發(fā)展成為宮頸癌需要經(jīng)歷一個較長且可逆轉(zhuǎn)的瘤前病變時期，因此可以經(jīng)過早期檢查和早期預(yù)防來實現(xiàn)預(yù)防宮頸癌，對其進(jìn)行及早診斷和處理有助于婦女的身體健康。隨著醫(yī)學(xué)水平的發(fā)展，宮頸刮片越來越受到了廣大醫(yī)護(hù)人員和女性的歡迎。宮頸刮片檢查是發(fā)現(xiàn)宮頸癌的有效方法之一，其具有使用方便、患者基本無痛苦、操作簡單、患者能承受的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)等優(yōu)點，是臨床上常用的篩查宮頸癌的檢查方法。本次研究通過分析在我院接受檢查的180名女性，對其宮頸刮片進(jìn)行染色分析，并對可疑的病例進(jìn)行病理學(xué)檢查，研究分析宮頸刮片對宮頸癌治療和各個年齡階段的發(fā)病情況，現(xiàn)具體報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取自2011年5月至 2012年10月期間在我院進(jìn)行體檢的180名女性，對其宮頸刮片進(jìn)行染色分析。所選取的180名女性中，25～35歲的女性有50例，35～45歲的女性有80例，45～55歲的女性有30例，55歲以上的女性20例。

1.2治療方法：在進(jìn)行檢查的前三天不要給予陰道沖洗，不使用陰道內(nèi)的藥物，禁止在經(jīng)期檢查。進(jìn)行宮頸刮片的具體方法如下：首先要輕輕地把宮頸表面的分泌物擦干凈，然后用刮板略微傾斜地放在宮頸鱗柱的結(jié)合處，采用順時針的方向3 圈，將刮取到的物質(zhì)涂抹在載玻片上，再放入 95%的酒精，將其固定13分鐘左右，將其送往病理科進(jìn)行染色，并用光鏡閱片以及分級。

1.3分級標(biāo)準(zhǔn)：采用巴氏五級分類法進(jìn)行分類，具體標(biāo)準(zhǔn)如下：I 級表示正常細(xì)胞的圖像、II 級為炎癥圖像，說明宮頸細(xì)胞有炎性的病變，但經(jīng)過治療之后可以恢復(fù)正常、III 級表示惡性的癌變細(xì)胞圖像，具有核異質(zhì)細(xì)胞以及其他可疑惡性特征、IV 級表示高度的可疑惡性細(xì)胞圖像，應(yīng)加強(qiáng)注意力、V 級表示典型的惡性細(xì)胞，可以確定為不良的惡性細(xì)胞。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理：采用 SPSS 16.0 統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用 t檢驗，計數(shù)資料以百分率表示 ，采用x^2檢驗 ，用P

2 結(jié)果

通過研究分析發(fā)現(xiàn)（1）III 級以上宮頸癌發(fā)病情況為35至45歲的女性和35歲以下的女性進(jìn)行比較，兩個年齡階段的女性在宮頸癌發(fā)病情況比較上具有差異（p45 歲和

3 結(jié)論

宮頸癌在我國是僅次于乳腺癌的惡性腫瘤，由于女性生殖道的生理構(gòu)造的特點，使子宮頸很容易受外界的影響，是最常見的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，使婦女的健康和生命受到了嚴(yán)重的威脅。這次研究結(jié)果表明女性的年齡和宮頸癌的發(fā)病率之間存在密切的關(guān)系，大于35歲的女性是宮頸癌發(fā)病的高發(fā)人群，且經(jīng)過大量的觀察發(fā)現(xiàn)發(fā)病的年齡基本集中在35 ～ 45 歲。我國的宮頸癌的發(fā)病率正在逐步上升，且越來越年輕化，因此應(yīng)該加強(qiáng)預(yù)防和控制。從宮頸癌前病變發(fā)展成為宮頸癌需要經(jīng)歷一個較長且可逆轉(zhuǎn)的瘤前病變時期，因此可以經(jīng)過早期檢查和早期預(yù)防來實現(xiàn)預(yù)防宮頸癌，對其進(jìn)行及早診斷和處理有助于婦女的身體健康。宮頸癌檢查方法主要有以下幾種 ：陰道鏡檢查 、碘試驗 、H P V 檢測，但具有取材難度大、準(zhǔn)確性低、醫(yī)藥費昂貴等缺點而無法在臨床上廣泛使用，本次試驗結(jié)果表明宮頸刮片檢查是發(fā)現(xiàn)宮頸癌的有效方法之一，其具有使用方便、患者基本無痛苦、操作簡單、患者能承受的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)等優(yōu)點，是臨床上常用的預(yù)防宮頸癌的檢查方法，有效地降低了發(fā)病率和死亡率。

總體來說，婦科體檢宮頸刮片篩查是保證女性身體健康的重要方法，女性應(yīng)該定期地進(jìn)行檢查對于及時發(fā)現(xiàn)和控制婦科疾病有著非常重要的意義，婦科體檢宮頸刮片是最簡單、最安全、經(jīng)濟(jì)又有效的預(yù)防婦科疾病的方法之一。

參考文獻(xiàn)

[1]郎景和，李艷華，喬友林，等.宮頸癌-發(fā)展中國家女性的第二大常見惡性腫瘤 [J].中華養(yǎng)生保健，2009，12（3）：5―7.

醫(yī)學(xué)檢驗常用染色方法范文第5篇

1.菲林試劑檢測可溶性還原糖

原理：還原糖+菲林試劑磚紅色沉淀

注意：菲林試劑的甲液和乙液要混合均勻后方可使用，而且是現(xiàn)用現(xiàn)配，條件是需要加熱。

應(yīng)用：檢驗和檢測某糖是否還原糖；不同生物組織中含糖量高低的測定；在醫(yī)學(xué)上進(jìn)行疾病的診斷，如糖尿病、腎炎。

2.蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ檢測脂肪

原理：蘇丹Ⅲ+脂肪橘黃色；蘇丹Ⅳ+脂肪紅色

注意：脂肪的鑒定需要用顯微鏡觀察。

應(yīng)用：檢測食品中營養(yǎng)成分是否含有脂肪。

3.雙縮脲試劑檢測蛋白質(zhì)

原理：蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑紫色

注意：雙縮脲試劑在使用時，先加A液再加B液，反應(yīng)條件不需要加熱。

應(yīng)用：鑒定某些消化液中含有蛋白質(zhì)；用于劣質(zhì)奶粉的鑒定。

4.碘液檢測淀粉和觀察動植物細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)的染色劑

原理：淀粉+碘液藍(lán)色；碘液能使動植物細(xì)胞著色。

注意：這里的碘是單質(zhì)碘，而不是離子碘。

應(yīng)用：檢測食品中營養(yǎng)成分是否含有淀粉；驗證光合作用產(chǎn)生淀粉；在觀察動植物細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)--細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核時用碘液做染色劑，使細(xì)胞核染上顏色便于觀察。

5.DNA的染色與鑒定

染色原理：DNA+甲基綠綠色

應(yīng)用：可以顯示DNA在細(xì)胞中的分布

鑒定原理：DNA+二苯胺藍(lán)色

應(yīng)用：用于DNA粗提實驗的鑒定試劑

6.吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色

原理：RNA+吡羅紅紅色

應(yīng)用：可以顯示RNA在細(xì)胞中的分布。

7. 臺盼藍(lán)使死細(xì)胞染成藍(lán)色

原理：正常的活細(xì)胞，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整具有選擇透過性能夠排斥臺盼藍(lán)，使之不能夠進(jìn)入胞內(nèi)；死細(xì)胞或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞，胞膜的通透性增加，可被臺盼藍(lán)染成藍(lán)色。

應(yīng)用：區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞；檢測細(xì)胞膜的完整性。

8.線粒體的染色

原理：健那綠染液是專一性染線粒體的活細(xì)胞染料，可以使活細(xì)胞中的線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色，而細(xì)胞質(zhì)接近無色。

應(yīng)用：可以用高倍鏡觀察細(xì)胞中線粒體的存在。

9.酒精的檢測

原理：橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與酒精發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，變成灰綠色。

應(yīng)用：探究酵母菌細(xì)胞呼吸的方式；制作果酒時檢驗是否產(chǎn)生了酒精；檢查司機(jī)是否酒后駕駛。

10.CO2的檢測

原理：CO2可以使澄清的石灰水變混濁，也可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠在變黃。

應(yīng)用：根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍(lán)水溶液變黃的時間長短，可以檢測酵母菌培養(yǎng)液中CO2的產(chǎn)生情況。

11.染色體（或染色質(zhì)）的染色

原理：染色體容易被堿性染料（如龍膽紫溶液、醋酸洋紅溶液、改良苯酚品紅染液）染成深色。

應(yīng)用：用高倍鏡觀察細(xì)胞的有絲分裂；觀察低溫誘導(dǎo)植物細(xì)胞染色體數(shù)目變化；植物花藥離體培養(yǎng)時，可以通過染色鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜離體培養(yǎng)的發(fā)育期。

12.吲哚酚試劑與維C溶液呈褪色反應(yīng)

原理：吲哚酚即2，6-二氯酚靛酚鈉，其水溶液為藍(lán)紫色，維C具有還原性，能將其褪色。

應(yīng)用：可用于檢測食品營養(yǎng)成分中是否含有維生素C。

13.亞硝酸鹽的檢測出現(xiàn)玫瑰紅

原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。

應(yīng)用：將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。

14.脲酶的檢測

原理：細(xì)菌合成的脲酶可以將尿分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，使PH升高，從而使酚紅指示劑變紅。

應(yīng)用：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，看指示劑變紅與否可以鑒定這種細(xì)菌能否分解尿素。

15.伊紅美藍(lán)檢測大腸桿菌

原理：在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上，大腸桿菌的代謝產(chǎn)物（有機(jī)酸）與伊紅美藍(lán)結(jié)合使菌落呈深紫色。

應(yīng)用：用濾膜法測定水中大腸桿菌的含量。

16.剛果紅檢測纖維素分解菌

原理：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素分解菌分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。

應(yīng)用：篩選纖維素分解菌。

17.植物花粉細(xì)胞核的染色