辭舊迎新的詩(shī)詞
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辭舊迎新的詩(shī)詞范文第1篇
【關(guān)鍵詞】新課改 中學(xué)英語(yǔ) 詞匯教學(xué)
曾經(jīng)英國(guó)有位語(yǔ)言學(xué)家說(shuō)過(guò)：如果沒(méi)有語(yǔ)法，人們將不知道如何表達(dá)事物，而如果沒(méi)有詞匯，人們將無(wú)法進(jìn)行事物的表達(dá)。英語(yǔ)詞匯教學(xué)的基礎(chǔ)階段便是初中時(shí)期，這也是培養(yǎng)學(xué)生語(yǔ)言交際和思維創(chuàng)造的最佳時(shí)期。英語(yǔ)教學(xué)質(zhì)量的好壞主要取決于詞匯教學(xué)的質(zhì)量。當(dāng)前，實(shí)際詞匯教學(xué)中，使用死記硬背、機(jī)械訓(xùn)練的教學(xué)和學(xué)習(xí)方式，而且大多數(shù)人都認(rèn)為在英語(yǔ)教學(xué)中，語(yǔ)法是最重要的，所以大家都集中精力攻克語(yǔ)法，導(dǎo)致對(duì)詞匯學(xué)習(xí)的疏忽，從而教學(xué)質(zhì)量與效果提不起來(lái)，初中生的英語(yǔ)水平也堪憂。因此，提高教師、學(xué)生以及家長(zhǎng)對(duì)詞匯知識(shí)的認(rèn)知，并且加強(qiáng)英語(yǔ)詞匯教學(xué)的工作刻不容緩。
一、相關(guān)理論研究及反思
文章主要采用問(wèn)卷調(diào)查的方式充分了解初中學(xué)生對(duì)學(xué)習(xí)英語(yǔ)詞匯最真實(shí)的想法，詳細(xì)內(nèi)容如下：
1.研究問(wèn)題：對(duì)選取學(xué)生的個(gè)人基礎(chǔ)信息、學(xué)習(xí)狀況、學(xué)生英語(yǔ)詞匯教學(xué)印象、家庭對(duì)英語(yǔ)詞匯教學(xué)的重視度以及個(gè)人意見(jiàn)等方面進(jìn)行分析調(diào)查，同時(shí)還設(shè)置了九個(gè)問(wèn)題對(duì)學(xué)生學(xué)習(xí)英語(yǔ)詞匯的幾方面因素進(jìn)行對(duì)比分析。
2.研究方式及工具：本文以新形勢(shì)下的初中英語(yǔ)詞匯教學(xué)的現(xiàn)狀對(duì)學(xué)生、家長(zhǎng)以及教師的重視度進(jìn)行分析，采用問(wèn)卷調(diào)查的方式讓學(xué)生評(píng)價(jià)教師教授英語(yǔ)詞匯課堂效果。問(wèn)卷內(nèi)容主要包括：學(xué)生基本信息、學(xué)生學(xué)習(xí)狀況、學(xué)生英語(yǔ)詞匯課堂印象、家庭對(duì)詞匯教學(xué)的重視度、個(gè)人意見(jiàn)。調(diào)查對(duì)象主要是七年級(jí)―九年級(jí)的學(xué)生150名，問(wèn)卷有效率為120例。
3.受試。
1）研究對(duì)象。選取某市初中學(xué)校七年級(jí)―九年級(jí)的學(xué)生150人作為研究對(duì)象。七年級(jí)是學(xué)生由小學(xué)過(guò)渡到初中的一個(gè)適應(yīng)階段，學(xué)生在剛剛步入初中時(shí)期時(shí)教師對(duì)學(xué)生英語(yǔ)詞匯教學(xué)相當(dāng)重視。九年級(jí)與七年級(jí)學(xué)生相比，不管是在認(rèn)知程度還是思維程度上都已經(jīng)漸漸穩(wěn)定。因此，參與到本次研究的受試者中，在認(rèn)知程度上由生疏到成熟。
2）研究結(jié)果。參與研究的學(xué)生年齡基本在15-16歲的范圍內(nèi)，男生70例，女生80例，其中七年級(jí)學(xué)生占總數(shù)的25%，九年級(jí)占75%；研究對(duì)象所在班級(jí)的人數(shù)基本保持在60人左右，學(xué)校多采取大班授課機(jī)制。
二、結(jié)果與分析
1.內(nèi)部因素。第一個(gè)問(wèn)題：針對(duì)學(xué)生是否對(duì)英語(yǔ)詞匯學(xué)習(xí)感興趣進(jìn)行調(diào)查，其中不到一半的學(xué)生一般感興趣，百分之三十左右學(xué)生感興趣，百分之十五左右的學(xué)生一點(diǎn)沒(méi)興趣，只有百分之十的學(xué)生非常感興趣。問(wèn)題二： “你同意掌握充足的詞匯量是提高英語(yǔ)成績(jī)的保證嗎？”66%同意，16% 非常同意，只有 18% 不同意或不清楚。以上數(shù)據(jù)表明學(xué)習(xí)內(nèi)部因素對(duì)英語(yǔ)詞匯學(xué)習(xí)有極大影響，對(duì)英語(yǔ)單詞感興趣，自然而然會(huì)通過(guò)各種各樣的來(lái)源總結(jié)學(xué)習(xí)詞匯的方法。
2.外部因素。
（1）家庭因素。第三個(gè)問(wèn)題是：學(xué)生家長(zhǎng)是否重視英語(yǔ)詞匯的學(xué)習(xí)？一半的學(xué)生回答說(shuō)重視，其中百分之三十左右的學(xué)生覺(jué)得一般，只有不到百分之二十的學(xué)生認(rèn)為自己父母非常重視或者一點(diǎn)不重視。其實(shí)家長(zhǎng)對(duì)孩子英語(yǔ)詞匯學(xué)習(xí)的重視程度直接關(guān)系著孩子學(xué)習(xí)的水平。第四個(gè)問(wèn)題是：學(xué)生在學(xué)習(xí)英語(yǔ)詞匯過(guò)程中家長(zhǎng)是否給予輔導(dǎo)？其中有百分之三的學(xué)生回答是不一定，百分之九十左右的學(xué)生認(rèn)為很少或者幾乎沒(méi)有，而只有百分之十左右的學(xué)生認(rèn)為可以。由上述數(shù)據(jù)顯示，父母是否對(duì)其詞匯學(xué)習(xí)給予關(guān)注，孩子很在意，但是由于部分家庭是農(nóng)民家庭，其父母受教育程度相對(duì)較低，以及家庭瑣事缺少對(duì)孩子學(xué)習(xí)的幫助。
（2）課堂因素。第七個(gè)問(wèn)題是：學(xué)生認(rèn)為教師在英語(yǔ)詞匯教學(xué)課堂中通常采用哪種方式進(jìn)行教學(xué)。調(diào)查結(jié)果如下：
通過(guò)對(duì)文中數(shù)據(jù)觀察可以看出，初中英語(yǔ)詞匯教學(xué)中教師多采用單詞表和語(yǔ)境教學(xué)模式進(jìn)行教學(xué)，很少甚至從不采用其他方式教學(xué)，在教學(xué)模式上還有一定的局限性。
3.個(gè)人建議。第五個(gè)問(wèn)題是：學(xué)生認(rèn)為教師在教授英語(yǔ)詞匯時(shí)采用全新的教學(xué)模式能否幫助你成功記憶詞匯？其中有百分之八十五的學(xué)生認(rèn)為能夠幫助自己成功記住詞匯，而百分之十五的學(xué)生認(rèn)為不能或者不確定。第六個(gè)問(wèn)題是：學(xué)生認(rèn)為在詞匯教學(xué)中需要對(duì)哪些方面進(jìn)行整改？其中，百分之五十的學(xué)生認(rèn)為教師應(yīng)轉(zhuǎn)變?cè)~匯教學(xué)模式，不斷創(chuàng)新和探索，其他百分之五十左右的學(xué)生認(rèn)為應(yīng)該在學(xué)習(xí)過(guò)程中多利用游戲形式進(jìn)行學(xué)習(xí)。
三、結(jié)語(yǔ)
綜上所述，詞匯教學(xué)是學(xué)習(xí)語(yǔ)言的基礎(chǔ)，占據(jù)著非常重要的位置。英語(yǔ)教師應(yīng)該在教學(xué)過(guò)程中不斷創(chuàng)新和完善教學(xué)模式，在新形勢(shì)背景下更加重視英語(yǔ)詞匯教學(xué)的趣味性和多樣性，積極創(chuàng)設(shè)一定的語(yǔ)境，適應(yīng)學(xué)生的要求，激發(fā)學(xué)生的興趣，刺激學(xué)生的思維，從而養(yǎng)成良好積極的學(xué)習(xí)詞匯的習(xí)慣，為語(yǔ)言知識(shí)的正確、恰當(dāng)使用打下結(jié)實(shí)的基礎(chǔ)。
辭舊迎新的詩(shī)詞范文第2篇
一、引用經(jīng)典，文采飛揚(yáng)
在文章開(kāi)始引用經(jīng)典，可以使起點(diǎn)高遠(yuǎn)。文章開(kāi)頭妙引詩(shī)詞名句，往往能引起讀者的情感共鳴，增加文章的文采。如柯藍(lán)的《飛紅滴翠記黃山》開(kāi)頭：“說(shuō)起黃山，人們很容易想起徐霞客對(duì)黃山的贊譽(yù)：‘五岳歸來(lái)不看山，黃山歸來(lái)不看岳?！弊髡唛_(kāi)篇不凡，引用徐霞客名言，不僅能提攜全文，凸顯主旨，于娓娓道來(lái)中切入正題，而且給全文定下了詩(shī)意的審美基調(diào)，可謂引人入勝，令人贊嘆。
也可以插文中，使作文詩(shī)意盎然。寫作時(shí)，如果在文中精心穿插幾個(gè)名句，定能使文章詩(shī)意盎然。如：“《千家詩(shī)》中很大部分詩(shī)歌歌詠?zhàn)鎳?guó)風(fēng)物，按春夏秋冬時(shí)序編排，打開(kāi)書往下念，四季風(fēng)光就活生生地展現(xiàn)在眼前：‘萬(wàn)紫千紅總是春’，‘春城無(wú)處不飛花’；‘綠樹(shù)蔭濃夏日長(zhǎng)’，‘五月榴花照眼明’；‘青女素娥俱耐冷，月中霜里斗嬋娟’；‘梅雪爭(zhēng)春未肯降，騷人擱筆費(fèi)評(píng)章’……”（于漪《往事依依》）巧妙引用大量的詩(shī)詞名句，描繪了春花秋月、夏云冬雪的自然特征，表現(xiàn)出讀書對(duì)作者的影響，即抒發(fā)了對(duì)四季的熱愛(ài)，更為文章增添了詩(shī)情畫意，顯示了于漪老師豐富的閱讀積累。
還可以用有哲理的詩(shī)文充當(dāng)論據(jù)，支撐觀點(diǎn)。議論文引用古詩(shī)名句充當(dāng)事理論據(jù)，支撐中心論點(diǎn)，可以增強(qiáng)文章的說(shuō)服力。如：“人生活在社會(huì)中，總要與人相處，與外界發(fā)生各種聯(lián)系，因此，建立和諧的人際關(guān)系十分重要。要建立和諧的人際關(guān)系，最重要的是要豁達(dá)大度，善于容納與自己志趣、風(fēng)格不同的人。古人說(shuō)：‘海納百川，有容乃大；壁立千仞，無(wú)欲則剛?！保ü缠P《多一些寬容》）文段所引用的林則徐的自題聯(lián)，從個(gè)人胸襟的角度證明中心論點(diǎn)，充分論證“多一些寬容對(duì)于人生的重要作用”這一觀點(diǎn)，富有文采和說(shuō)服力。
另外，將經(jīng)典詩(shī)文置于結(jié)尾處，可以到達(dá)深化主題的作用。以詩(shī)文名句來(lái)結(jié)尾，可以使之成為點(diǎn)睛之筆，深化文章的主題，自然貼切，可以獲得水到渠成，水融的效果。如：“‘噴云吹霧花無(wú)數(shù)，一條錦繡游人路’，是的，是一條花巷，一條花街，上天下地都是花，可謂花天花地?？墒?，這些說(shuō)法都不行，都不足以說(shuō)出花的動(dòng)態(tài)，‘四廂花影怒如潮’‘四山花影下如潮’，還是‘花潮’好?！保ɡ顝V田《花潮》）結(jié)尾引用龔自珍名言，表現(xiàn)了作者對(duì)海棠花勝景的逐步加深的感受，并提升審美愉悅的完整過(guò)程。
經(jīng)典詩(shī)詞名句，內(nèi)涵豐富，意旨深遠(yuǎn)，是人類智慧的結(jié)晶。巧妙引用經(jīng)典詩(shī)詞名句，可以使語(yǔ)言顯得厚重，警策，含蓄，具有豐富的哲理意蘊(yùn)。
二、仿寫詩(shī)文，妙趣橫生
詩(shī)歌有“文學(xué)之母”、“語(yǔ)言的鉆石”之美譽(yù)。在語(yǔ)文教學(xué)中拓展語(yǔ)文的應(yīng)用范圍，加強(qiáng)語(yǔ)文的應(yīng)用性，正是我們所倡導(dǎo)的“大語(yǔ)文”的觀念。如何拓展與應(yīng)用，以使詩(shī)詞名句與學(xué)生生活結(jié)合起來(lái)？仿擬是一種重要的方法。仿擬是根據(jù)表達(dá)的需要，有意識(shí)地在格式上仿照現(xiàn)成的或者已為人們所熟知的語(yǔ)言材料（本體），通過(guò)聯(lián)想類比等方式，臨時(shí)創(chuàng)造出新的詩(shī)詞句段（仿體）。魯迅曾仿擬《黃鶴樓》詩(shī)：“闊人已騎文化去，此地空余文化城。文化一去不復(fù)返，古城千載冷清清?！狈聰M可以鍛煉學(xué)生的想象力，訓(xùn)練學(xué)生思維的嚴(yán)密性和流暢性，提高學(xué)生語(yǔ)言應(yīng)用和表達(dá)能力，鼓勵(lì)學(xué)生自覺(jué)靈活地遷移到作文實(shí)踐中。
首先，可以仿語(yǔ)句。仿照已有的句式、語(yǔ)氣、修辭等，臨時(shí)創(chuàng)作新的結(jié)構(gòu)相同的句子或段落。例如，正可謂“起座而喧嘩者，一家歡也；喜上眉梢，欣欣然其間者，老媽笑也。”作者巧妙地仿擬歐陽(yáng)修在《醉翁亭記》中寫“太守醉”的語(yǔ)句，新穎別致，妙趣橫生，寥寥幾筆勾勒出一幅“家庭溫馨圖”。
其次也可以仿詩(shī)文。依據(jù)原作的語(yǔ)言形式，改變?cè)鞯膬?nèi)容，重新謀篇立意，創(chuàng)作出體式相同、風(fēng)格迥異的新詩(shī)文。古詩(shī)古詞古文，都可仿擬。繁重的學(xué)業(yè)壓得學(xué)生喘不過(guò)氣來(lái)，于是，有學(xué)生寫道：“是昨亦考，今亦考，明日復(fù)亦考，然則何時(shí)能樂(lè)耶？其必曰：考試自得其樂(lè)。”
蘇霍姆林斯基指出：“我一千次地確信，沒(méi)有一條富有詩(shī)意的感情和美的清泉，就不可能有學(xué)生的全面智力的發(fā)展。”（《教育的藝術(shù)》）我們正可以借詩(shī)歌美文的仿擬來(lái)濡染心靈、陶冶性情、培養(yǎng)文學(xué)純正趣味、提高學(xué)生的文學(xué)綜合素養(yǎng)。
三、創(chuàng)新運(yùn)用，美不勝收
對(duì)古典詩(shī)詞進(jìn)行創(chuàng)造性再運(yùn)用，王國(guó)維可謂成功者。晏殊《蝶戀花》中“昨夜西風(fēng)凋碧樹(shù)，獨(dú)上高樓，望盡天涯路”；柳永《鳳棲梧》中“衣帶漸寬終不悔，為伊消得人憔悴”；辛棄疾《青玉案》中“眾里尋他千百度，驀然回首，那人卻在燈火闌珊處”；原詞作者要表達(dá)的無(wú)非是纏綿情思或高潔志行。然而，王國(guó)維在《人間詞話》中巧妙地將三句話分別從原詞中提取，結(jié)合自身感受構(gòu)成一套令人耳目一新的組合。這可算是古典詩(shī)詞創(chuàng)造性再運(yùn)用的典范，令人擊掌叫絕。這種極富創(chuàng)造性的組合，使詩(shī)詞的生命之光照射得更遠(yuǎn)。
讓古典詩(shī)詞之花在新詞中綻放，可以提高學(xué)生的審美能力，可以培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)造性思維。下面是學(xué)生的幾篇的寫作品：
虞美人?初三
老師拖堂何時(shí)了，作業(yè)知多少？近來(lái)老師常發(fā)瘋，作業(yè)如山寫到月當(dāng)空。近視眼鏡應(yīng)猶在，只是度數(shù)改。問(wèn)君能有幾多愁？恰是江水東流無(wú)止休。（《哦，初三》）
如夢(mèng)令?勸學(xué)
嘗記考試結(jié)束，惶惶不敢歸宿，錯(cuò)題多無(wú)數(shù)，傷心絕望無(wú)助，痛苦，痛苦，都是懶惰所誤。（《珍惜所擁有的青春》）
山坡羊?死人調(diào)惹禍
喇叭，嗩吶，曲兒小，腔兒大，嗚里哇啦亂如麻。男生聽(tīng)了切齒，女生聽(tīng)了咬牙。眼見(jiàn)得吹錯(cuò)了這題，吹差了那道，只吹得滿紙紅叉叉。（《都是“死人調(diào)”惹的禍》）
水調(diào)歌頭?快樂(lè)幾時(shí)有
快樂(lè)幾時(shí)有，擲筆問(wèn)青天，不知灌籃高手，何時(shí)能相見(jiàn)。我欲棄學(xué)而逃，又恐老爸翻臉，心驚膽亦寒。書包太沉重，何似在童年？
上面這些學(xué)生所填古詩(shī)詞，雖然含有戲謔成分，但對(duì)陶冶學(xué)生的性情，提高學(xué)生的心智，充實(shí)精神生活，培養(yǎng)審美能力還是其積極意義的。
辭舊迎新的詩(shī)詞范文第3篇
各個(gè)國(guó)家都為此作出了貢獻(xiàn)，也在其中體現(xiàn)出各自的文化潮流。
2007年1月5日，美國(guó)方言學(xué)會(huì)宣布“Pluto”(冥王星)一詞當(dāng)選2006年度最流行詞匯。這不是個(gè)新詞兒，國(guó)際天文學(xué)聯(lián)合會(huì)大會(huì)去年投票決定將冥王星列入矮行星，而不再是行星。這一降級(jí)引發(fā)了全美人民對(duì)冥王星的深深同情，一個(gè)行將被拋棄的專有名詞變成了美國(guó)人的口頭語(yǔ)――“Youare plutoed”，你被降級(jí)了；“Ameri canDollors are plutoed”，美元在貶值。這是詞語(yǔ)自身的生命力。
差不多同時(shí)公布的Google2006年十大最流行搜索詞匯中，vide。和World Cup分列前兩位，每個(gè)詞的搜索點(diǎn)擊量都超過(guò)十億次，為Google帶來(lái)3000萬(wàn)美元利潤(rùn)。這是詞語(yǔ)的生產(chǎn)力。
而詞語(yǔ)本身更重要的命名、定義與闡釋功能則在一些新詞上得到體現(xiàn)，一個(gè)生于嬰兒潮一代的中年人無(wú)論如何也理解不了什么是Netroots(網(wǎng)根族)，什么是Hiki Komori(家里蹲)，什么是“Mouse Potato”(鼠標(biāo)土豆)。同樣，你能指望現(xiàn)在的年輕人理解什么是Highbrow(自以為文化修養(yǎng)很高的人，有人翻譯作“高眉”，誕生于1903年)嗎?
美國(guó)flog+dooce
這兩詞都與博客相關(guān)，“flog”釋義為“促銷商品的假冒博客”，“dooce”則意味著某個(gè)人因?yàn)樽约旱牟┛投粏挝婚_(kāi)除。
個(gè)人博客是今年網(wǎng)絡(luò)新寵，“flog”這個(gè)詞由fake(假冒)與blog結(jié)合而成，看似一般博客，實(shí)際上卻是公司作為行銷商品的博客。這事兒中國(guó)也有，某博客門戶網(wǎng)站就盡干這事，拉攏人寫博客，整公司整公司地端，有些公司還把公司博客當(dāng)成營(yíng)銷手段，員工分批定期維護(hù)，這樣的博客，想好看都難。
2002年，美國(guó)一個(gè)叫阿姆斯特朗的人在其個(gè)人網(wǎng)頁(yè)dooce．com上因?yàn)槊枋鲎约旱墓ぷ骱屯露怀戳唆滛~一一她也由此為美國(guó)英語(yǔ)創(chuàng)造了一個(gè)新詞dooce。2004年10月，一個(gè)空姐因?yàn)樵谧约旱牟┛蜕险迟N了她身著航空制服站在一架飛機(jī)上的照片而被開(kāi)除。而2006年最大的dooce事件則發(fā)生于號(hào)稱“華盛頓寶貝”的國(guó)會(huì)山參議員助手杰西卡?卡特勒，她的性博客風(fēng)靡一時(shí)，人稱美國(guó)“木子美”。
英國(guó) prav+broadloid
Pray，the proud realiser of added value，驕傲的附加值實(shí)現(xiàn)者，倫敦新的潮流術(shù)語(yǔ)，有如下癥狀：特別愿意買便宜貨，并且四處?kù)乓@些東西到底有多便宜；相信東西貴不一定就更好；對(duì)名牌嗤之以鼻。這些人大多生活富足，卻仍為買到了便宜貨而自豪?？傊矚g便宜貨，再有錢也喜歡買罪受，和前幾年的“no Logo”族有一脈相承之處，聽(tīng)上去很，但這群人對(duì)抗的就是前幾年流行過(guò)的Chav文化，那才真叫呢。
Chav指那些沒(méi)受過(guò)多少教育、沒(méi)文化并且有或者不道德行為傾向的人。英國(guó)的小報(bào)給他們歸納了以下特征：通常是工人階級(jí)出身；身著名牌運(yùn)動(dòng)服、頭戴棒球帽；身上戴滿了金飾物(男的必戴大金戒指、女的必戴大金耳圈)；手機(jī)從不離手，且越新潮越好、越耀眼越好；音樂(lè)，男的必聽(tīng)Rap，女的必選R&B；開(kāi)的車即使再舊也必然噴刷一新、顏色搶眼，駕車時(shí)車窗必然搖下、音樂(lè)震耳欲聾；總露出一副對(duì)生活滿不在乎、對(duì)外界漠不關(guān)心的神情。代表人物是貝克漢姆夫婦。
2006年7月，英國(guó)Teletext Holidays公司所作的一項(xiàng)調(diào)查顯示，70％的人都說(shuō)自己是Prav，只有6％的人勇于承認(rèn)自己是Chav。
broadloid，來(lái)自于broad-sheet(大報(bào))與tab]old(八卦小報(bào))。受新媒體沖擊，大報(bào)的日子越來(lái)越不好過(guò)，許多老牌大報(bào)也只好把版面縮小，不僅看上去如同小報(bào)，辦報(bào)風(fēng)格也朝八卦路線上走。還有一個(gè)新詞是“infortainment”(信息娛樂(lè)化)，由信息(information)和娛樂(lè)(entertainment)兩個(gè)詞匯連綴而成――基于信息的娛樂(lè)，或者叫信息娛樂(lè)。
2003年至2006年，英國(guó)傳統(tǒng)三大報(bào)《獨(dú)立報(bào)》、《泰晤士報(bào)》和《衛(wèi)報(bào)》相繼“瘦身”。余風(fēng)所及，美國(guó)紐約時(shí)報(bào)公司也于2006年7月18日宣布，王牌產(chǎn)品《紐約時(shí)報(bào)》將于2008年開(kāi)始改版，將版面寬度從54英寸變窄為48英寸，頁(yè)面也將同時(shí)收窄1．5英寸。
全民小報(bào)化，全民八卦化。
中國(guó)coolie，ganbu還是ganbei?
辭舊迎新的詩(shī)詞范文第4篇
【摘要】 目的：用體外自然實(shí)驗(yàn)體系對(duì)納米級(jí) Fe3O4 磁流體和抗癌藥物長(zhǎng)春新堿（VCR）體外對(duì)系統(tǒng)血液免疫功能的影 響進(jìn)行分子水平的探討。方法：采用免疫熒光標(biāo)記流式細(xì)胞儀分析方法，檢測(cè)血細(xì)胞表面相關(guān)免疫分子的變化情況。結(jié)果：使用納米級(jí) Fe3O4 磁流體和抗癌藥物 VCR 以后，自然實(shí)驗(yàn)組 CD4 細(xì)胞陽(yáng)性率（38.87±6.37）% 較自然對(duì)照組（35.52±6.76）%明顯增高（P < 0.01），自然實(shí)驗(yàn)組白細(xì)胞 CD55 陽(yáng)性細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度（68.79±8.98）% 較自然對(duì)照組（74.78±18.60）%明顯降低（P < 0.05）。與自然對(duì)照組相比 CD4 分子均表現(xiàn)出一定程度的上調(diào)，CD8 分子均表現(xiàn)出一定程度的下調(diào)。結(jié)論：VCR（0.2 g/mL）和納米級(jí) Fe3O4 磁流體對(duì)血細(xì)胞的免疫功能都沒(méi)有不良影響，甚至磁流體還可以提高血液免疫反應(yīng)中白細(xì)胞的免疫功能，為紅細(xì)胞包載磁流體和抗癌藥物治療腫瘤提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為抗癌藥紅細(xì)胞載體靶向抗腫瘤免疫提供新的治療途徑。
【關(guān)鍵詞】 紅細(xì)胞；磁流體；長(zhǎng)春新堿；靶向；CD4；CD8；CD55；CD59
〔Abstract〕
Objective
To research the molecular level effects of Fe3O4 nano-magnetic ferrofluid and anticancer drug vincristine (VCR) on systemic hematogenic immunologic function by means of natural experimental system in vitro.
Methods
The expression of correlated moleculars on the surface of blood cells were detected and compared using flow cytometry assay.
Results
The level of CD4 on T cells (38.87±6.37)% in natural experimental group was significantly increased than that of natural control group (35.52±6.76)% (P < 0.01)， while the mean fluorescence intensity of CD55 in natural experimental group (68.79±8.98)% was much lower than that of natural control group (74.78±18.60)% (P < 0.05). Compared to natural control group， the expression
of CD4 was up-regulated in some degree while CD8 was down-regulated in experimental group.
Conclusion VCR (0.2 g/mL) and Fe3O4 nano-magnetic ferrofluid have no harmful effects to hematogenic immunologic function. Magnatic ferrofluid can even elevate the function of leucocytes. The results can supply experimental foundation for erythrocytes to capsulate both magnetic ferrofluid and anticancer drug， and also can provide treatment pathway for anticancer drug erythrocyte carrier targeting antitum or immunity.
〔Key Words〕
Erythrocytes; Magnetic ferrofluid; Vincristine; Targeting; CD4; CD8; CD55; CD59
納米級(jí) Fe3O4 磁流體（magnetic ferrofluid， MF）是目前國(guó)內(nèi)外靶向給藥和醫(yī)用高分子材料研究領(lǐng)域的熱門方向之一。磁流體因具有獨(dú)特的性質(zhì)（流動(dòng)性、磁響應(yīng)性、靶向可控性）而應(yīng)用廣泛，與現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)相結(jié)合使用則更加顯示其優(yōu)越性。長(zhǎng)春新堿（VCR）是臨床常用的抗腫瘤藥物，抗腫瘤譜廣。有關(guān)研究資料已經(jīng)證明，紅細(xì)胞作為 VCR 載體可減少用藥量和提高療效[1]，但其靶向性差，還有待于深入研究。我們?cè)O(shè)想用紅細(xì)胞雙載 VCR 和磁流體，借助于外加磁場(chǎng)以解決 VCR 紅細(xì)胞載體的靶向問(wèn)題。此前首先要弄清磁流體對(duì)機(jī)體生理功能的影響，特別是對(duì)免疫功能是否有負(fù)面影響。我們想利用現(xiàn)代系統(tǒng)免疫學(xué)理論與方法[2]研究磁流體和 VCR 聯(lián)合應(yīng)用對(duì)系統(tǒng)血液免疫功能是否有正負(fù)影響，目前尚未見(jiàn)到這種報(bào)道，現(xiàn)將有關(guān)資料報(bào)道如下。
1
材料與方法
1.1
材料
酸性枸櫞酸鈉葡萄糖溶液（acid citrate dextrose， ACD）抗凝的健康成人新鮮全血由中國(guó)上海血站提供，其中男 2 例，女 9 例，中位年齡 30 歲。鼠抗人 CD55-FITC、CD59-PE、CD3/4、CD3/8 等直接法熒光單克隆抗體購(gòu)自美國(guó) BD 公司。注射用硫酸長(zhǎng)春新堿粉針劑（國(guó)藥準(zhǔn)字 H44021772，批號(hào) 0609V1）購(gòu)自深圳萬(wàn)樂(lè)藥業(yè)有限公司，以 0.9% 生理鹽水配制成濃度為 0.2 g/mL 待用。納米級(jí) Fe3O4 磁流體〔含超順磁性氧化鐵（SPIO）氨基硅烷 Fe3O4 納米顆粒，直徑 8~12 nm〕由上海交通大學(xué)納米科學(xué)與技術(shù)工程中心惠贈(zèng)，樣品使用前均以超聲波處理 10~15 min，使 Fe3O4 粒子分布更均勻。流式細(xì)胞儀（BD FACS Calibur， USA），分析軟件為 Cell Quest。
1.2
方法
1.2.1
預(yù)備實(shí)驗(yàn)：血漿及全血細(xì)胞懸液的制備
新鮮采集的健康成人 ACD 抗凝全血 4~5 mL，室溫下 2 500 r/min，離心 5 min，吸取上層血漿至另一試管備用。將上述全血細(xì)胞用 0.9% 生理鹽水（NS）洗滌并 2 500 r/min，離心 5 min 2 次，用 NS 恢復(fù)原體積，混勻即為全血細(xì)胞懸液。
1.2.2
正式實(shí)驗(yàn)：自然反應(yīng)實(shí)驗(yàn)體系的設(shè)計(jì)
每管加入 0.3 mL 血漿和 0.2 mL 全血細(xì)胞懸液，除自然對(duì)照組加入 0.2 mL NS 以外，自然實(shí)驗(yàn)組分別加入0.1 mL VCR、0.1 mL MF 或 0.1 mL NS。即：
試管 1：0.3 mL 血漿 + 0.2 mL 全血細(xì)胞懸液 + 0.1 mL VCR + 0.1 mL MF（自然體系實(shí)驗(yàn) 1 組）。
試管 2：0.3 mL 血漿 + 0.2 mL 全血細(xì)胞懸液 + 0.1 mL MF + 0.1mL NS（自然體系實(shí)驗(yàn) 2 組）。
試管 3：0.3 mL 血漿 + 0.2 mL 全血細(xì)胞懸液 + 0.1 mL VCR + 0.1 mL NS（自然體系實(shí)驗(yàn) 3 組）。
試管 4：0.3 mL 血漿 + 0.2 mL 全血細(xì)胞懸液 + 0.2 mL Ns（自然體系對(duì)照組）。
將上述試管混勻后置于 37℃水浴箱中溫育 1 h，加蓋防止水蒸氣進(jìn)入。中間輕輕搖勻 2 次，使反應(yīng)充分進(jìn)行；取出后 2 500 r/min，離心 5 min；小心取出上清液，將沉淀物用 2 mL PBS 重懸，2 500 r/min，離心 5 min，棄上清，加入 200
L PBS 使其體積為 200
L。
1.2.3
流式細(xì)胞儀檢測(cè)血細(xì)胞表面相關(guān)免疫分子
紅細(xì)胞表面分子 CD55、CD59 檢測(cè)：取待測(cè)樣品 1 L、PBS 緩沖液 50 L、 CD55-FITC、CD59-PE 單抗 4 L，充分混勻，室溫避光 20 min；再加入2 mL PBS 液，1 000 r/min，離心 5 min，棄上清，加入 400 L PBS，立即上流式細(xì)胞儀檢測(cè)。
白細(xì)胞表面分子 CD55、CD59、CD4、CD8 檢測(cè)：取待測(cè)樣品 50
L，每管加入紅細(xì)胞裂解液 1 mL，室溫避光反應(yīng) 10 min，1 000 r/min，離心 5 min，棄上清，加入 CD55-FITC、CD59-PE 抗體各 4 L，CD3/4、CD3/8 抗體各 3 L，充分混勻后室溫避光 20 min；抗體結(jié)合后，再加入 2 mL PBS 液，1 000 r/min，離心 5 min，棄上清，加入 400 L PBS，立即上流式細(xì)胞儀檢測(cè)。
1.3
統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以 x±s 表示，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用 t 檢驗(yàn)。
2
結(jié)
果
2.1
磁流體（MF）對(duì)系統(tǒng)血液免疫功能的影響
自然體系實(shí)驗(yàn) 2 組白細(xì)胞CD55 陽(yáng)性細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度低于自然體系對(duì)照組（P < 0.05）。與自然體系對(duì)照組相比，自然體系實(shí)驗(yàn) 2 組 CD4 分子、紅細(xì)胞 CD59 分子、白細(xì)胞 CD59 分子表現(xiàn)出一定程度的上調(diào)，CD8 分子、紅細(xì)胞 CD55 分子表現(xiàn)出一定程度的下調(diào)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其指標(biāo)結(jié)果詳見(jiàn)表 1。
2.2
長(zhǎng)春新堿（VCR）對(duì)系統(tǒng)血液免疫功能的影響
與自然體系對(duì)照組相比，自然體系實(shí)驗(yàn) 3 組CD4、CD8、白細(xì)胞 CD59 分子表現(xiàn)出一定程度的上調(diào)，紅細(xì)胞和白細(xì)胞 CD55 分子表現(xiàn)出一定程度的下調(diào)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其指標(biāo)結(jié)果詳見(jiàn)表 1。
2．3
磁流體（MF）和長(zhǎng)春新堿（VCR）混合物對(duì)系統(tǒng)血液免疫功能的影響
與自然體系實(shí)驗(yàn) 3 組相比，自然體系實(shí)驗(yàn) 1 組CD4 分子、紅細(xì)胞 CD59 分子、白細(xì)胞 CD59 分子、白細(xì)胞 CD55 分子表現(xiàn)出一定程度的上調(diào)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其指標(biāo)結(jié)果詳見(jiàn)表 1。
與自然體系對(duì)照組相比，自然體系實(shí)驗(yàn) 1 組 CD4 細(xì)胞陽(yáng)性率明顯高于自然體系對(duì)照組（P < 0.01）。其中紅細(xì)胞 Cd59 分子、白細(xì)胞 CD59 分子均表現(xiàn)出一定程度的上調(diào)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其指標(biāo)結(jié)果詳見(jiàn)表 1。
轉(zhuǎn)貼于
2.4
各組內(nèi)指標(biāo)之間的相關(guān)性
自然體系實(shí)驗(yàn) 1 組中 RCD55 與 RCD59、WCD55 與 WCD59 顯著正相關(guān)（P 值分別為 P < 0.01、P < 0.01），RCD55 與WCD59、RCD59 與 WCD59、CD4 與 WCD55、CD4 與 WCD59 成正相關(guān)，但相關(guān)性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其指標(biāo)結(jié)果詳見(jiàn)表 2。
自然體系實(shí)驗(yàn) 2 組中 RCD55 與 RCD59、RCD55 與 WCD59、RCD59 與 WCD59、CD4 與 WCD59 顯著正相關(guān)（P 值分別為 P < 0.01、P < 0.01、P < 0.05、P < 0.05），WCD55 與 WCD59、CD4 與 WCD55 成正相關(guān)，但相關(guān)性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其指標(biāo)結(jié)果詳見(jiàn)表 2。
自然體系實(shí)驗(yàn) 3 組中 CD4 與 WCD55、CD4 與 WCD59、WCD55 與 WCD59 顯著正相關(guān)（P 值分別為 P < 0.05、P < 0.01、P < 0.01），RCD55 與 RCD59、RCD59 與 WCD59 成正相關(guān)，RCD55 與 WCD59 成負(fù)相關(guān)，但相關(guān)性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其指標(biāo)結(jié)果詳見(jiàn)表 2。
自然體系對(duì)照組中 RCD55 與 RCD59、RCD59 與 WCD59、CD4 與 WCD59 顯著正相關(guān)（P 值分別為 P < 0.05、P < 0.05、P < 0.05），WCD55 與 WCD59 成正相關(guān)，CD4 與 WCD55、RCD55 與 WCD59 成負(fù)相關(guān)，但相關(guān)性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其指標(biāo)結(jié)果詳見(jiàn)表 2。
3
討
論
自 1981 年 Siegel 提出“紅細(xì)胞免疫系統(tǒng)”全新概念以來(lái)，人們開(kāi)始認(rèn)識(shí)到紅細(xì)胞不僅在運(yùn)輸 O2、CO2 和清除循環(huán)免疫復(fù)合物等方面發(fā)揮功能，而且在機(jī)體天然免疫屏障方面也具有重要作用。紅細(xì)胞表達(dá)多種免疫相關(guān)分子，較為重要的有 CD55、CD59 等。CD59 又稱為保護(hù)素、同種限制因子-20，它通過(guò)與 C7、C8 或 C9 的結(jié)合而阻止膜攻擊復(fù)合物（MAC）的組裝，防止 MAC 對(duì)同種或自身細(xì)胞的溶解破壞，保護(hù)宿主細(xì)胞免受補(bǔ)體介導(dǎo)的損傷。CD55 即衰變加速因子（DAF），其分子基礎(chǔ)和化學(xué)構(gòu)成與 CD59 相似，可競(jìng)爭(zhēng)性與 C3b 結(jié)合，阻止C3、C5 轉(zhuǎn)化酶的裝配，并加速已形成的 C3、C5 轉(zhuǎn)化酶衰變，從而抑制補(bǔ)體攻擊單位的活化。
機(jī)體免疫過(guò)程中，T 淋巴細(xì)胞發(fā)揮著重要作用。研究表明，使用納米級(jí) Fe3O4 磁流體和抗癌藥物 VCR 以后，與自然對(duì)照組相比 CD4 和 CD8 分子分別表現(xiàn)出一定程度的上調(diào)和下調(diào)，說(shuō)明無(wú)論是 VCR （一定劑量范圍內(nèi)），還是納米級(jí) Fe3O4 磁流體對(duì)白細(xì)胞的免疫功能都沒(méi)有不良影響，甚至一定程度上還可以提高白細(xì)胞的免疫功能。由于 T 淋巴細(xì)胞的分型和功能有著密切相關(guān)性，使用磁流體和 VCR 以后對(duì)于 CD4+ CD25+ 和 CD4+ CD25- T 淋巴細(xì)胞、CD8+ CD28+ 和 CD8+ CD28- T 淋巴細(xì)胞的影響有待于進(jìn)一步深化研究。
我們的研究發(fā)現(xiàn)，使用了 VCR 以后，CD4、CD8、白細(xì)胞 CD59 分子表現(xiàn)出一定程度的上調(diào)，紅細(xì)胞和白細(xì)胞 CD55 分子表現(xiàn)出一定程度的下調(diào)。眾所周知，常規(guī)劑量抗癌藥能明顯破壞細(xì)胞的免疫功能，然而有資料表明低劑量化療藥卻可以提高細(xì)胞免疫功能[3]，這與我們的研究（VCR 0.2 g/mL，明顯低于臨床常規(guī)劑量）一致，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，分析可能由于實(shí)驗(yàn)例數(shù)太少所致。
我們的研究表明使用了 MF 以后 CD4 與 WCD59 顯著正相關(guān)（P < 0.05），CD4 與 WCD55 成正相關(guān)，使用了 VCR 以后 CD4 與 WCD55、CD4 與 WCD59 顯著正相關(guān)（P 值分別為 P < 0.05、P < 0.01），共同使用 VCR 和 MF 以后 CD4 與 WCD55、CD4 與WCD59 成正相關(guān)，與自然體系對(duì)照組 CD4 與WCD59 顯著正相關(guān)（P < 0.05）類似。有報(bào)道指出，CD55 可以分別刺激 CD4、CD8 表達(dá)[4]。CD4+ 或CD8+ T 細(xì)胞生長(zhǎng)至少部分依靠 Cd59 分子，但是CD8+ T 細(xì)胞比 CD4+ T 細(xì)胞敏感[5]；CD59 表達(dá)下降與 CD8+ T 細(xì)胞關(guān)系密切，而非 CD4+ T 細(xì)胞[6]。后者報(bào)道與我們的實(shí)驗(yàn)有些不符，但具體機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。從以上分析，我們可以認(rèn)為納米級(jí) Fe3O4 磁流體和抗癌藥物 VCR 合用對(duì)血細(xì)胞的免疫活性有上調(diào)作用。
Fe3O4 磁流體在生命科學(xué)領(lǐng)域里的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，如可作為生物醫(yī)藥領(lǐng)域中磁共振成像的造影劑[7]，與抗體結(jié)合用于生物分離[8]，與外部磁場(chǎng)結(jié)合用于監(jiān)測(cè)腫瘤化療效果[9]等，尤其在腫瘤治療領(lǐng)域以及磁流體熱療[10]等，都為腫瘤的治療帶來(lái)了新的契機(jī)和希望， 同時(shí)也使其生物安全性受到人們的重視。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)，我們認(rèn)為醫(yī)用納米級(jí) Fe3O4 磁流體對(duì)系統(tǒng)血液免疫功能有良好的上調(diào)作用，可用于靶向治療，體現(xiàn)了醫(yī)學(xué)界所追求的高效低毒甚至無(wú)毒的目標(biāo)。
紅細(xì)胞可用作多種抗癌制劑的載體[11]。VCR 是臨床常用的抗腫瘤藥物，抗腫瘤譜廣，作用于細(xì)胞周期的 M 期，主要用于治療急性淋巴性白血病、霍奇金病和惡性淋巴瘤。本文采用的 VCR 劑量在紅細(xì)胞的載藥劑量范圍內(nèi)，用量微小，對(duì)血液免疫功能有上調(diào)作用，可避免臨床 VCR 常規(guī)用量的免疫抑制作用。我們認(rèn)為 VCR 載體紅細(xì)胞的制備技術(shù)和生物學(xué)特性研究[1]現(xiàn)已經(jīng)比較成熟。如果將藥物載體紅細(xì)胞技術(shù)與磁性藥物傳輸系統(tǒng)的研究結(jié)合起來(lái)，既可以改善藥物載體紅細(xì)胞靶向性單一的不足，又可以有效解決磁性藥物載體在安全性、生產(chǎn)成本和載藥量等方面的缺陷，從而使紅細(xì)胞成為良好的靶向給藥載體，改變腫瘤化療策略，擴(kuò)大紅細(xì)胞輸血治療的臨床應(yīng)用。通過(guò)體外自然體系實(shí)驗(yàn)的研究，仿真磁流體和 VCR 在體內(nèi)對(duì)血液免疫功能的影響，為紅細(xì)胞包載磁流體和抗癌藥物治療腫瘤提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為靶向抗腫瘤免疫提供新的治療研究思路和方法。
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辭舊迎新的詩(shī)詞范文第5篇
【摘要】 目的 觀察雙心室起搏對(duì)病態(tài)竇房結(jié)綜合征(sick sinus syndrome， SSS)患者的急性血液動(dòng)力學(xué)變化及心臟絕對(duì)不應(yīng)期電刺激對(duì)心功能的影響，通過(guò)計(jì)算機(jī)仿真研究，探討絕對(duì)不應(yīng)期電刺激的離子流作用機(jī)制。 方法 對(duì)10例SSS患者經(jīng)冠狀靜脈左室后外側(cè)支和右心室心尖部進(jìn)行雙心室起搏，通過(guò)漂浮導(dǎo)管觀察起搏前后5min的血流動(dòng)力學(xué)和心電圖變化的指標(biāo)。應(yīng)用計(jì)算機(jī)仿真技術(shù)，觀察心臟絕對(duì)不應(yīng)期電刺激前后鈣濃度的變化。 結(jié)果 雙心室起搏時(shí)，心臟每分輸出量(cardiac output， CO)、心臟排血指數(shù)(cardiac index， CI)分別增加16.2%、16.8%，肺毛細(xì)血管嵌壓(pulmonary capillary wedge pressure， PCWP)下降，跨室壁復(fù)極離散度(transmural dispersion of repolarization， TDR)變小，絕對(duì)不應(yīng)期電刺激使仿真的心室肌細(xì)胞在絕對(duì)不應(yīng)期正向波刺激，可明顯增加Ca2+內(nèi)流。 結(jié)論 雙心室起搏可增加心肌收縮功能，減小跨室壁復(fù)極離散度。心臟絕對(duì)不應(yīng)期電刺激可觸發(fā)電壓依賴性鈣通道開(kāi)放，使心肌鈣濃度增加，增強(qiáng)衰竭心室肌細(xì)胞的收縮功能。
【關(guān)鍵詞】 雙心室起搏；絕對(duì)不應(yīng)期電刺激；心臟再同步治療； 鈣濃度；計(jì)算機(jī)仿真
ABSTRACT: Objective To observe the acute homodynamic changes of biventricular pacing (BivP) in patients with sick sinus syndrome (SSS) and investigate the Ca2+ changes during absolute refractory period electrical stimulation (ARPES) by applying computer simulation. Methods The hemodynamic parameters and ECG changes were measured in ten SSS patients five minutes before and after BivP connecting RVA and LVB. The extent of contraction and Ca2+ transient (CaT) changes during ARPES were recorded through computer simulation. Results During BivP cardiac output per minute and cardiac index increased by 16.2% and 16.8%， respectively. In contrast， pulmonary capillary wedge pressure and transmural dispersion of repolarization decreased. The inward calcium current was increased by applying repolarization stimulation during ARPES. Conclusion Appropriate biventricular pacing may strengthen contractility and decrease transmural dispersion of repolarization. ARPES can trigger voltagedependent calcium channel to open， thus increasing inward calcium current and contractility of myocytes in failure ventricles.
KEY WORDS: biventricular pacing; absolute refractory period electrical stimulation; cardiac synchronization therapy; calcium concentration; computer simulation
慢性心力衰竭(chronic heart failure， CHF)位居心血管疾病死亡病因之首，雖心臟再同步治療(cardiac resynchronization therapy， CRT)采用雙心室起搏(biventricular pacing， BivP)使左右心室的再同步性改善，QRS變窄[1]，但仍有20%～30%患者心功能改善與QRS波的變窄無(wú)相關(guān)性[23]。
研究表明[49]，心臟絕對(duì)不應(yīng)期的電刺激(absolute refractory period electrical stimulation ， ARPES)可以觸發(fā)細(xì)胞膜上的電壓依賴性鈣通道(IcaL)開(kāi)放，使鈣濃度增加，產(chǎn)生鈣瞬變(CaT)，增加心肌的收縮功能。因此，BivP改善心功能可能也與ARPES有關(guān)。我們觀察BivP對(duì)病態(tài)竇房結(jié)綜合征(sick sinus syndrome， SSS)患者的急性血流動(dòng)力學(xué)變化，并通過(guò)ARPES對(duì)心功能及心室肌細(xì)胞鈣離子流的計(jì)算機(jī)仿真研究，探討絕對(duì)不應(yīng)期電刺激的離子流機(jī)制。
1 對(duì)象與方法
1.1 BivP急性血液動(dòng)力學(xué)變化的測(cè)定 選擇心功能正常且QRS正常、需要植入心臟起搏器的SSS患者10例，平均竇性心率(46.8±19.6 )次/min，年齡(54.1±6.8)歲，男7例，女3例；其中3例在臨時(shí)起搏器保護(hù)下進(jìn)行?；颊咴谥橥鈺翔b字后，用自制Y形轉(zhuǎn)換器，分別連接經(jīng)冠狀靜脈的電極。以70次/min的同一起搏頻率，分別行右心室心尖部(right ventricle apex， RVA)、右室流出道(right ventricle outflow tract， RVOT)、左室后外側(cè)基底部(left ventricle base， LVB)、右室雙部位(RVA+RVOT)和BivP (RVA+LVB，其中LVB設(shè)為S1刺激，RVA為S2刺激)，S1與S2的間期約10ms，采用正向波刺激法，其刺激脈寬為0.5ms，脈沖為2.5mV。用SwanGanz漂浮導(dǎo)管熱稀釋法測(cè)定起搏后5min的心臟每分輸出量(cardiac output， CO)、心臟排血指數(shù)(cardiac index， CI)、肺動(dòng)脈壓(pulmanary artery pressure， PAP)和肺毛細(xì)血管嵌壓(pulmanary capillary wedge pressure， PCWP)；同步記錄12導(dǎo)心電圖，測(cè)定QRS離散度(QRS dispersion， QRSd)、QT離散度(QT dispersion， QTd)和跨室壁復(fù)極離散度(transmural dispersion of repolarization， TDR)，即T波頂點(diǎn)至T波終點(diǎn)間期(TpTe)[10] 。
1.2 LR91模型的仿真算法 LR91模型 (1991年發(fā)表的模型 )是基于用 HodgkinHuxley公式對(duì)心室動(dòng)作電位進(jìn)行數(shù)值重建形成的[11]。LR91動(dòng)作電位模型實(shí)現(xiàn)了6種跨膜電流，并且考慮了細(xì)胞膜內(nèi)Ca2 +濃度的改變。膜電位 (V) 的變化率用公式表示：dV/dt= -(1/C) (Iion+ Ist)。其中C=1μA/cm2 是膜電容。 Ist(μA/cm2 )為 單位面積上的刺激電流強(qiáng)度，Iion(μA/cm2) 為六種跨膜離子電流的總和，Iion＝INa+ ISi+ IK + IK1 + IKP+ Ib；快速內(nèi)向Na+電流 INa=GNam3·h·j (V- ENa )；L型 Ca2+電流 ISi=G Na·f (V-ESi)；時(shí)間依賴型延遲整流 K+電流 IK =GKx·x1 (V- EK )；時(shí)間非依賴型 K+電流 IK1 =GK1 K1∞·(V-EK1)；平臺(tái)期 K+電流 IKp = 0.0183Kp(V-EKP )；總的背景電流 Ib=0.03921(V+59.87)。m、h、j、d、f和x為門控因子 ，d和f分別為 L型 Ca2+電流的激活和失活門控因子。
通過(guò)在絕對(duì)不應(yīng)期加不同方式的刺激研究細(xì)胞膜內(nèi)Ca2+濃度的變化情況。首先通過(guò)改變絕對(duì)不應(yīng)期刺激的波形(脈沖=2.5mV，寬度=0.5ms，其計(jì)算機(jī)仿真的數(shù)據(jù)與SSS 患者相同)尋找哪種波形的刺激可引起細(xì)胞膜內(nèi)Ca2+濃度的增加(圖1)，然后調(diào)節(jié)絕對(duì)不應(yīng)期刺激的位置，尋找最佳的刺激時(shí)間點(diǎn)。圖1 3種絕對(duì)不應(yīng)期電刺激波形
心肌細(xì)胞興奮過(guò)程中細(xì)胞膜內(nèi) Ca2+ 濃度越高，心肌細(xì)胞的收縮能力越強(qiáng)。為研究絕對(duì)不應(yīng)期刺激對(duì)細(xì)胞膜內(nèi)Ca2+濃度的影響，我們采用Ca2+濃度的時(shí)間積分[12]來(lái)判斷哪種絕對(duì)不應(yīng)期刺激方式效果最好。Area表示Ca2+濃度曲線與時(shí)間軸之間的面積。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 用Pclamp8.1和Origin6.1軟件進(jìn)行資料測(cè)量和統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用方差分析，以P
2 結(jié)
果
2.1 BivP的急性血液動(dòng)力學(xué)變化 RVA、RVOT、LVB、RVBi和BivP等 5種起搏方式的CO、CI依次增加，后4種方式起搏較RVA起搏CO分別增加5.1%、7.3%、12.6%和16.2%；CI則分別增加6.3%、8.0%、13.9%和16.8%(表1)。其中BivP時(shí)CO和CI分別增加16.2%和16.8%；PCWP下降20%左右，且QRSd、QTd、TDR均顯著縮小，表明 BivP 對(duì)心功能正常QRS正常的患者也可增加心肌收縮功能，減小跨室壁離散度。 表1 不同部位起搏對(duì)CO、CI、PWP和QRSd、QTd、TDR的影響
2.2 絕對(duì)不應(yīng)期刺激波形對(duì)細(xì)胞膜內(nèi)Ca2+濃度的影響 在絕對(duì)不應(yīng)期加不同方式的電刺激對(duì)動(dòng)作電位和細(xì)胞膜內(nèi)的Ca2+濃度將產(chǎn)生不同的影響。從圖2可以看出 ，在絕對(duì)不應(yīng)期加正向波刺激時(shí)可以使細(xì)胞膜內(nèi)Ca2+濃度的峰值增大 ，Ca2+濃度曲線與時(shí)間軸之間的面積增大；在絕對(duì)不應(yīng)期加負(fù)向波刺激時(shí)，細(xì)胞膜內(nèi)Ca2+濃度的峰值減小，Ca2+濃度曲線與時(shí)間軸之間的面積減小；在絕對(duì)不應(yīng)期加雙向波刺激時(shí)，Ca2+濃度曲線與時(shí)間軸之間的面積與不加絕對(duì)不應(yīng)期刺激接近?？梢?jiàn)，要想通過(guò)在絕對(duì)不應(yīng)期加電刺激的方法提高心肌組織的收縮力，所加刺激必須為正向波刺激方式。故Ca2+濃度與刺激波形有關(guān)。
2.3 絕對(duì)不應(yīng)期刺激位置對(duì)細(xì)胞膜內(nèi)Ca2+濃度的影響 對(duì)處于靜息狀態(tài)的心室肌細(xì)胞，加除極化刺激引起細(xì)胞興奮，產(chǎn)生動(dòng)作電位，延時(shí)20ms后，加正向波刺激(脈沖=2.5mV，寬度= 0.5ms)，用Ca2+濃度曲線與時(shí)間軸之間的面積(area， mMs)來(lái)分析絕對(duì)不應(yīng)期刺激位置對(duì)細(xì)胞膜內(nèi)Ca2+濃度的影響。結(jié)果顯示，動(dòng)作電位0相后160ms左右加正向波刺激可使Ca2+濃度曲線與時(shí)間軸之間的面積最大；當(dāng)在動(dòng)作電位0相后180ms加正向波刺激時(shí)，由于進(jìn)入相對(duì)不應(yīng)期，正向波刺激使心肌細(xì)胞很快復(fù)極，Ca2+濃度曲線與時(shí)間軸之間的面積顯著減小。故Ca2+濃度與0相后的時(shí)間有關(guān)(表2)。表2 正向波刺激位置與細(xì)胞膜內(nèi)Ca2+濃度的關(guān)系
3 討
論
目前認(rèn)為CRT治療CHF的機(jī)制是心房和或心室再同步化[1]。許多研究表明CRT治療對(duì)不同病因的心衰患者多數(shù)可獲益[34]；反之大約有20%～30%的心衰患者CRT治療后并無(wú)改善[2]。提示其治療機(jī)制和預(yù)測(cè)療效除心室再同步化以外，可能還在其他機(jī)制參與(如心房也存在再同步化問(wèn)題)。本課題組的既往研究也有同樣看法[7]。
絕對(duì)不應(yīng)期指心肌細(xì)胞除極后對(duì)電刺激絕不再發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)的時(shí)間間期，相當(dāng)于動(dòng)作電位2位相或ST段。因此，ARPES不會(huì)引起心室?jiàn)Z獲，但是可引起離子流的變化。 因?yàn)镮caL是電壓依賴性通道電流，只要有微小的電壓變化(-50mV左右)就可以引起IcaL再次開(kāi)放，，并觸發(fā)瑞蘭道受體從肌漿網(wǎng)釋放儲(chǔ)存的鈣，產(chǎn)生鈣瞬變。
ARPES可增強(qiáng)衰弱心肌的收縮力，當(dāng)心室肌細(xì)胞受到電信號(hào)的刺激時(shí)(如膜電位上升至-50mV左右)，細(xì)胞膜上的IcaL開(kāi)放，細(xì)胞外的鈣電流快速流入細(xì)胞內(nèi)，并且觸發(fā)肌漿網(wǎng)上的瑞蘭道受體開(kāi)放，使細(xì)胞內(nèi)游離鈣濃度([Ca2+])由10-7瞬時(shí)升高為10-5，引起肌鈣蛋白產(chǎn)生一次收縮運(yùn)動(dòng)。收縮完成后細(xì)胞內(nèi)游離鈣再由胞漿內(nèi)轉(zhuǎn)入肌漿網(wǎng)和轉(zhuǎn)出細(xì)胞外，使[Ca2+]再由10-5瞬時(shí)下降為10-7，完成一次心動(dòng)過(guò)程[1012]。[Ca2+]的瞬時(shí)變化稱為CaT。
本研究結(jié)果表明，BivP能明顯改善心功能和室內(nèi)傳導(dǎo)正常的SSS患者的急性血液動(dòng)力學(xué)變化，提示BivP可能通過(guò)ARPES來(lái)提高心臟的收縮功能。本研究室已研究證明[810]，同一部位S1S2先后刺激，S2進(jìn)入S1的絕對(duì)不應(yīng)期，或S1S2從兩個(gè)不同部位同步或先后刺激，S1和S2也可以進(jìn)入對(duì)方的絕對(duì)不應(yīng)期，不引起有效的心肌除極，但可引起離子流變化。因此我們推測(cè)：BivP時(shí)一個(gè)電信號(hào)必然進(jìn)入另一個(gè)電信號(hào)的絕對(duì)不應(yīng)期，可以觸發(fā)IcaL開(kāi)放，使鈣濃度增加，產(chǎn)生 CaT，增加心肌的收縮功能，故BivP起搏可能也與ARPES有關(guān)。
我們應(yīng)用計(jì)算機(jī)仿真研究來(lái)說(shuō)明正常心室肌細(xì)胞的絕對(duì)不應(yīng)期電刺激改變細(xì)胞膜內(nèi)Ca2+ 濃度的機(jī)理，也證明ARPES可引起Ca2+內(nèi)流加大和胞膜內(nèi)Ca2+濃度增加。正向波刺激雖然導(dǎo)致Ca2 +通道的激活因子d減小，但正向波刺激使細(xì)胞膜內(nèi)電位變負(fù)，增強(qiáng)了Ca2+內(nèi)流的電驅(qū)動(dòng)力，總的結(jié)果使Ca2+內(nèi)向電流增加。負(fù)向波刺激雖然有使Ca2+ 通道激活因子d增加，但由于在絕對(duì)不應(yīng)期能開(kāi)放的Ca2+通道都已經(jīng)基本開(kāi)放，因此在絕對(duì)不應(yīng)期加負(fù)向波刺激不會(huì)使Ca2+通道激活因子d增加，又因?yàn)樨?fù)向波刺激使細(xì)胞膜內(nèi)電位變正，減弱了Ca2+內(nèi)流的電驅(qū)動(dòng)力，其結(jié)果使Ca2+內(nèi)向電流減小。在心肌興奮的絕對(duì)不應(yīng)期給予電刺激，雖然不會(huì)引發(fā)興奮，但可通過(guò)電機(jī)械偶聯(lián)機(jī)制增強(qiáng)心肌收縮力，改善心臟功能。這些結(jié)果為應(yīng)用研究指明了方向。本實(shí)驗(yàn)還存在一定的局限性，由于采用的心室肌細(xì)胞模型較為簡(jiǎn)單，進(jìn)一步研究應(yīng)采用人類心力衰竭的計(jì)算機(jī)仿真模型。另外需建立心肌細(xì)胞以及組織的電機(jī)械模型，將刺激與心肌收縮有效的連接起來(lái)，進(jìn)一步研究絕對(duì)不應(yīng)期刺激與心肌收縮力的關(guān)系，以及多部位同步刺激的結(jié)果。
目前認(rèn)為心電圖的QRS波的寬度不一定能預(yù)測(cè)BivPCRT的治療效果，而QRS波的寬度的縮短率對(duì)預(yù)測(cè)療效可能更有價(jià)值，利用組織多普勒、實(shí)時(shí)多普勒和三維超聲心動(dòng)圖等觀察心室的不同步或不協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)，特別是室間隔左室側(cè)壁延長(zhǎng)時(shí)間>60ms更有價(jià)值。推測(cè)ARPES能觸發(fā)IcaL通道開(kāi)放和產(chǎn)生CaT，而B(niǎo)ivP是一個(gè)電信號(hào)必然進(jìn)入另一個(gè)電信號(hào)的絕對(duì)不應(yīng)期，同樣能觸發(fā)IcaL開(kāi)放和產(chǎn)生CaT。 本文通過(guò)臨床及計(jì)算機(jī)仿真技術(shù)進(jìn)一步說(shuō)明了IcaL的開(kāi)放導(dǎo)致Ca2+濃度的變化即CaT，可能是BivP除了心室再同步化以外的另一個(gè)重要的離子流機(jī)制。
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