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楊萬(wàn)里的詩(shī)范文第1篇

原詩(shī)：坐看深來(lái)尺許強(qiáng)，偏於薄暮發(fā)寒光。半空舞倦居然嬾，一點(diǎn)風(fēng)來(lái)特地忙。

落盡瓊花天不惜，封它梅蕊玉無(wú)香。倩誰(shuí)細(xì)橪成湯餅，換卻人間煙火腸。

譯文：坐看落雪，其深已一尺有余，更在這黃昏時(shí)分發(fā)散著縷縷寒光。雪花在半空中舞到疲倦，顯得輕柔無(wú)力，然而些許微風(fēng)吹過(guò)，又翩然起舞。上天渾然不憐惜，讓瓊花似的雪落盡，將梅蕊、海棠的封存在冰雪之下，花香杳無(wú)。有誰(shuí)能將這高潔的雪做成湯和餅，來(lái)滌蕩人們滿是人間煙火的腸胃。

（來(lái)源：文章屋網(wǎng) ）

楊萬(wàn)里的詩(shī)范文第2篇

在此對(duì)其賠償金額之三次變數(shù)暫且不提，單說(shuō)說(shuō)這5萬(wàn)元的獎(jiǎng)勵(lì)吧。

既是獎(jiǎng)勵(lì)，自然有獎(jiǎng)勵(lì)的理由。在管理心理學(xué)中，獎(jiǎng)勵(lì)是對(duì)人的某種行為給予肯定與表?yè)P(yáng)，使人保持這種行為。那么，參照鐵路系統(tǒng)對(duì)于罹難者的獎(jiǎng)勵(lì)，大抵可以歸納為對(duì)罹難者家屬的某種行為給予肯定與表?yè)P(yáng)了。然而，這似乎并不符合邏輯。罹難者家屬的什么行為引發(fā)了鐵路系統(tǒng)的肯定繼而表?yè)P(yáng)呢？且肯定與表?yè)P(yáng)之下，讓惜金如命的鐵路系統(tǒng)不惜以5萬(wàn)元的“重金”進(jìn)行獎(jiǎng)勵(lì)呢？

罹難家屬幫忙救人了？并不是。罹難者幫鐵路系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)了安全隱患，繼而獎(jiǎng)勵(lì)其家屬？說(shuō)不通。那么，可能存在的原因便是：家屬提前簽訂賠償協(xié)議，使得鐵路系統(tǒng)在此次事故中應(yīng)該承擔(dān)的責(zé)任變小了，其在事故中的錯(cuò)誤造成的整個(gè)系統(tǒng)的壓力變小了，總而言之，鐵路系統(tǒng)在事故中最重要的麻煩變少了，這就需要獎(jiǎng)勵(lì)。

當(dāng)然“獎(jiǎng)”遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，尚需要“勵(lì)”！不僅此次不要惹太多麻煩，下次、下下次，以后更多次，（我當(dāng)然希望這是最后一次，但是，您信嗎？）不要再發(fā)生此類事故之后給當(dāng)事單位惹麻煩，這就是獎(jiǎng)勵(lì)機(jī)制，通過(guò)這種獎(jiǎng)勵(lì)來(lái)減少壓力、解脫自己。這不能不說(shuō)是利用人最寶貴的生命來(lái)?yè)Q取“平安符”的丑惡做法，表面是增加了賠償，實(shí)則是輕視生命、不尊重生命的表現(xiàn)。其用心之險(xiǎn)惡，“獎(jiǎng)勵(lì)”二字可見一斑！

獎(jiǎng)勵(lì)這個(gè)詞，自然不是鐵路系統(tǒng)隨口說(shuō)出來(lái)的，既然已經(jīng)知道其獎(jiǎng)勵(lì)背后的卑劣目的，自然就知道了其選用這個(gè)詞的時(shí)候是怎樣的心領(lǐng)神會(huì)：“這是怎樣的一個(gè)詞啊。感謝倉(cāng)頡先生，造出了這樣兩個(gè)字，太貼切了！”這個(gè)目的的存在，實(shí)在讓他們想不到還有哪個(gè)詞比“獎(jiǎng)勵(lì)”更能真切地體現(xiàn)他們的處境，以及急于擺脫這種不利處境的迫切心情。

楊萬(wàn)里的詩(shī)范文第3篇

關(guān)鍵詞：工商管理專業(yè)；人才培養(yǎng)模式；監(jiān)控體系；實(shí)踐基地

中圖分類號(hào)：G642 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1002-2589（2016）03-0192-02

隨著我國(guó)高等教育規(guī)模不斷擴(kuò)大，高校學(xué)生毛入學(xué)率的不斷提高，生源質(zhì)量也不同于精英教育階段，高等教育已經(jīng)進(jìn)入了大眾化教育階段，給高校發(fā)展帶來(lái)機(jī)遇的同時(shí)，提出了更嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)?！秶?guó)家中長(zhǎng)期教育改革和發(fā)展規(guī)劃綱要（2010-2020年）》（以下簡(jiǎn)稱《綱要》）[1]中明確指出：“提高質(zhì)量是教育改革發(fā)展的核心任務(wù)，樹立以提高質(zhì)量為核心的教育發(fā)展觀，注重教育內(nèi)涵發(fā)展，鼓勵(lì)學(xué)校辦出特色、辦出水平，出名師，育英才?！币虼?，在實(shí)際教學(xué)過(guò)程中，如何實(shí)現(xiàn)分類分層教學(xué)，如何提高人才培養(yǎng)質(zhì)量，形成具有本校特色的人才培養(yǎng)模式，是擺在工商管理專業(yè)教師面前的一項(xiàng)艱巨任務(wù)。

一、工商管理專業(yè)人才培養(yǎng)模式的現(xiàn)狀

（一）實(shí)行彈性學(xué)分制

這種人才培養(yǎng)模式主要是針對(duì)課程設(shè)置而進(jìn)行的改革，學(xué)生可以在八年時(shí)間里修完專業(yè)要求的所有課程而畢業(yè)[2]。這種模式在一定程度上緩解了過(guò)去課程設(shè)置的弊端，增強(qiáng)了學(xué)生選課的自主性，學(xué)生可以根據(jù)自己的實(shí)際情況和興趣愛好自主選擇課程。但是，有很多學(xué)生為了盡量早畢業(yè)，用大學(xué)三年的時(shí)間把大學(xué)四年要修的課程都修完，這就造成了學(xué)生一周之內(nèi)需要上大量的課程，影響了學(xué)生對(duì)于知識(shí)的消化和吸收，同時(shí)也影響了學(xué)生的全面發(fā)展。

（二）分類分層人才培養(yǎng)模式

這種人才培養(yǎng)模式主要針對(duì)學(xué)生對(duì)專業(yè)知識(shí)的學(xué)習(xí)而言[3]。學(xué)生進(jìn)入專業(yè)課學(xué)習(xí)階段后，學(xué)?？梢愿鶕?jù)學(xué)生的自身特點(diǎn)和興趣，實(shí)行分類、分層教學(xué)，設(shè)置不同的專業(yè)課程模塊供學(xué)生來(lái)選修，也可以把專業(yè)方向細(xì)化為不同的模塊，比如人力資源管理、物流管理、生產(chǎn)與運(yùn)作管理、創(chuàng)業(yè)管理等，學(xué)生可以根據(jù)自己的喜好、優(yōu)勢(shì)等情況選擇相關(guān)模塊的課程，通過(guò)學(xué)習(xí)，使學(xué)生在某一方面具有較深厚的造詣。

（三）“3+1”人才培養(yǎng)模式

這種人才培養(yǎng)模式是近年來(lái)比較盛行的模式[4]，即要求學(xué)生在大學(xué)前三年主要從事專業(yè)學(xué)習(xí)，在大學(xué)的最后一年從事社會(huì)實(shí)踐。這種模式的優(yōu)點(diǎn)就是能夠使學(xué)生有足夠的時(shí)間從事社會(huì)實(shí)踐，但是學(xué)生要用三年時(shí)間將四年的課程學(xué)完，一定程度上增加了學(xué)生的學(xué)習(xí)壓力，而且如果學(xué)校沒有校外實(shí)踐基地，讓學(xué)生自己從事社會(huì)實(shí)踐，就必然會(huì)導(dǎo)致學(xué)生盲目地到企業(yè)打工掙錢，從而與專業(yè)培養(yǎng)目標(biāo)相悖。

（四）“3.5+0.5”人才培養(yǎng)模式

這種人才培養(yǎng)模式也受很多高校所推崇，即要求學(xué)生用三年半的時(shí)間學(xué)完大學(xué)所有課程，最后半年通過(guò)社會(huì)實(shí)踐來(lái)撰寫畢業(yè)論文。這種人才培養(yǎng)模式既能夠讓學(xué)生有足夠的時(shí)間從事專業(yè)知識(shí)的學(xué)習(xí)，又能夠抽出一定的時(shí)間讓學(xué)生從事社會(huì)實(shí)踐。但是如果專業(yè)課程設(shè)置不合理也必然無(wú)法實(shí)現(xiàn)專業(yè)人才培養(yǎng)目標(biāo)。

（五）“1+2.5+0.5”人才培養(yǎng)模式

這種人才培養(yǎng)模式是在高校專業(yè)大類招生情況下實(shí)施的，即按照大類專業(yè)來(lái)招收學(xué)生，在大學(xué)一年級(jí)不分具體專業(yè)，到大學(xué)二年級(jí)學(xué)生根據(jù)自己的興趣可以任意選擇大類專業(yè)下的具體專業(yè)進(jìn)行學(xué)習(xí)。這種培養(yǎng)模式的優(yōu)勢(shì)就是能夠讓學(xué)生通過(guò)一年的學(xué)習(xí)，再根據(jù)對(duì)自身、專業(yè)、社會(huì)人才需求的認(rèn)識(shí)，重新進(jìn)行專業(yè)的選擇和定位。

二、工商管理專業(yè)人才培養(yǎng)模式存在的問題

北方工業(yè)大學(xué)是一所北京市教委主管的地方院校，目前工商管理專業(yè)本科有3個(gè)班，專升本有2個(gè)班，每一屆學(xué)生有170人左右。目前，工商管理專業(yè)的人才培養(yǎng)模式已逐步從“3.5+0.5”模式向“1+2.5+0.5”模式轉(zhuǎn)化，但從人才培養(yǎng)的過(guò)程和培養(yǎng)目標(biāo)來(lái)看，仍然存在一些問題。

（一）培養(yǎng)目標(biāo)與人才培養(yǎng)過(guò)程脫節(jié)

學(xué)校工商管理專業(yè)培養(yǎng)學(xué)生的目標(biāo)是把學(xué)生培養(yǎng)成既懂技術(shù)又懂管理的復(fù)合應(yīng)用型人才。但是，在人才培養(yǎng)過(guò)程中，不僅學(xué)生的管理理論素養(yǎng)沒能得到提高，學(xué)生的實(shí)踐能力也沒有得到鍛煉。學(xué)生在選擇就業(yè)單位時(shí)，往往感到無(wú)所適從，達(dá)不到用人單位的高標(biāo)準(zhǔn)、嚴(yán)要求，培養(yǎng)過(guò)程質(zhì)量與培養(yǎng)目標(biāo)嚴(yán)重脫節(jié)。

（二）個(gè)別專業(yè)課程設(shè)置不合理

一般情況下，在大學(xué)學(xué)習(xí)階段，通識(shí)課、專業(yè)基礎(chǔ)課應(yīng)當(dāng)盡量安排大學(xué)一、二年級(jí)，專業(yè)必修課安排在大學(xué)三、四年級(jí)。學(xué)校工商管理專業(yè)的課程設(shè)置中，部分課程設(shè)置不合理，有個(gè)別專業(yè)課程安排在了大學(xué)一、二年級(jí)，而且還呈現(xiàn)過(guò)度娛樂化，這勢(shì)必會(huì)讓學(xué)生與其他課程進(jìn)行對(duì)比，從降低了對(duì)其他課程學(xué)習(xí)的積極性。

（三）校外實(shí)踐基地不健全

學(xué)校校內(nèi)的實(shí)踐教學(xué)內(nèi)容已經(jīng)非常豐富，但對(duì)于校外實(shí)踐基地的建設(shè)一直落后于同類院校，無(wú)法達(dá)到教學(xué)大綱規(guī)定的實(shí)踐教學(xué)目標(biāo)。因此建立校外實(shí)踐基地對(duì)于工商管理專業(yè)學(xué)生的培養(yǎng)來(lái)講顯得非常重要，也是提高學(xué)生實(shí)踐能力的有力保障。

三、工商管理專業(yè)人才培養(yǎng)模式的完善

（一）完善人才培養(yǎng)監(jiān)控體系

通過(guò)對(duì)人才培養(yǎng)方案的完善修訂，建立健全各類人才培養(yǎng)監(jiān)測(cè)點(diǎn)的考核標(biāo)準(zhǔn)，明確培養(yǎng)計(jì)劃中專業(yè)評(píng)價(jià)各監(jiān)測(cè)點(diǎn)的內(nèi)容、目標(biāo)以及人才培養(yǎng)質(zhì)量考核的標(biāo)準(zhǔn)和方法，具體體現(xiàn)學(xué)校的專業(yè)建設(shè)特色和專業(yè)評(píng)價(jià)體系的有效實(shí)施[5]。在人才培養(yǎng)過(guò)程中，應(yīng)當(dāng)建立配套的監(jiān)測(cè)點(diǎn)和監(jiān)控體系，完善工商管理專業(yè)的人才培養(yǎng)監(jiān)控體系，如圖1所示。

學(xué)校和學(xué)院可以通過(guò)制訂人才培養(yǎng)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)施方案和相關(guān)規(guī)章制度，建立起高效優(yōu)質(zhì)的人才培養(yǎng)保障、服務(wù)和支撐體系，確保人才培養(yǎng)質(zhì)量監(jiān)控有效實(shí)施，保障人才培養(yǎng)方案的順利實(shí)施。

（二）突出特色，注重質(zhì)量，提高人才培養(yǎng)質(zhì)量

工商管理專業(yè)是學(xué)校的老牌專業(yè)，從學(xué)校到學(xué)院都非常重視學(xué)科建設(shè)和人才培養(yǎng)模式的改革。為了提高學(xué)生的實(shí)踐能力，實(shí)踐教學(xué)的比重在逐步增大，但是校外實(shí)習(xí)基地的建設(shè)還一直不夠健全。因此，加強(qiáng)校外實(shí)習(xí)基地建設(shè)對(duì)于突出人才培養(yǎng)特色，提高人才培養(yǎng)質(zhì)量有著重要的意義。在現(xiàn)有教學(xué)實(shí)習(xí)的模式下，可以逐步與一些大型國(guó)有企業(yè)建立長(zhǎng)期合作關(guān)系，定期派學(xué)生到企業(yè)去實(shí)習(xí)、鍛煉，使學(xué)生真正把所學(xué)理論知識(shí)與企業(yè)實(shí)踐結(jié)合起來(lái)，從實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)問題，再結(jié)合所學(xué)知識(shí)解決問題，實(shí)現(xiàn)理論與實(shí)踐的有機(jī)結(jié)合，從而更加突出北方工業(yè)大學(xué)工商管理專業(yè)的人才培養(yǎng)特色。

（三）構(gòu)建人才培養(yǎng)模塊，優(yōu)化人才培養(yǎng)方案

結(jié)合學(xué)校工商管理專業(yè)特色和社會(huì)需求，構(gòu)建人才培養(yǎng)特色模塊。在加強(qiáng)理論教學(xué)（通識(shí)課+基礎(chǔ)課+專業(yè)課）的同時(shí)，注重實(shí)踐教學(xué)的質(zhì)量和效果，聯(lián)系幾家大型企業(yè)作為學(xué)生校外實(shí)踐基地，在實(shí)踐中構(gòu)建“1+2+1”人才培養(yǎng)模塊或“1+2+0.5+0.5”人才培養(yǎng)模塊，加強(qiáng)課堂教學(xué)、實(shí)踐教學(xué)、企業(yè)實(shí)踐的密切聯(lián)系。

1.“1+2+1”人才培養(yǎng)模塊

在學(xué)校工商管理專業(yè)大類招生背景下，構(gòu)建“1+2+1”人才培養(yǎng)模塊勢(shì)在必行。在這種人才培養(yǎng)模塊中，校外實(shí)踐基地的建設(shè)顯得尤為重要。學(xué)生在大學(xué)期間除了學(xué)習(xí)專業(yè)知識(shí)，要用最后一年的時(shí)間去企業(yè)實(shí)習(xí)和鍛煉，在實(shí)踐中檢驗(yàn)所學(xué)專業(yè)知識(shí)的掌握程度，發(fā)現(xiàn)問題，及時(shí)補(bǔ)救。

2.“1+2+0.5+0.5”人才培養(yǎng)模塊

這種人才培養(yǎng)模塊也是符合學(xué)校工商管理專業(yè)發(fā)展和社會(huì)需求的。學(xué)生在大學(xué)期間除了學(xué)歷理論知識(shí)外，在最后一年中用半年時(shí)間在企業(yè)實(shí)習(xí)，再用半年的時(shí)間結(jié)合企業(yè)實(shí)踐撰寫畢業(yè)論文，從實(shí)現(xiàn)理論與實(shí)踐的有機(jī)結(jié)合。

3.優(yōu)化人才培養(yǎng)方案

結(jié)合人才培養(yǎng)模塊，優(yōu)化人才培養(yǎng)方案，是實(shí)現(xiàn)工商管理專業(yè)人才培養(yǎng)目標(biāo)的重要途徑。制訂新的人才培養(yǎng)方案應(yīng)著重從課程設(shè)置、專業(yè)實(shí)習(xí)、課程設(shè)計(jì)、校外實(shí)踐等幾個(gè)方面來(lái)進(jìn)行改進(jìn)。首先課程設(shè)置應(yīng)從學(xué)生實(shí)際和學(xué)校的人才培養(yǎng)目標(biāo)出發(fā)，科學(xué)、合理地制訂學(xué)生在三個(gè)階段的課程，在第一階段（一年級(jí)）應(yīng)著重通識(shí)課程的學(xué)習(xí)，把數(shù)學(xué)、外語(yǔ)、專業(yè)基礎(chǔ)課的學(xué)習(xí)作為重中之重；在第二階段（二、三年級(jí)）著重專業(yè)基礎(chǔ)課和專業(yè)必修課程的學(xué)習(xí)，在第三階段（四年級(jí)）重點(diǎn)放在學(xué)生的實(shí)踐方面，努力提高學(xué)生的實(shí)踐能力。其次，專業(yè)實(shí)習(xí)可放在每年的寒假和暑假，學(xué)校和與企業(yè)達(dá)成合作意向，組織學(xué)生進(jìn)入企業(yè)調(diào)研和實(shí)踐。課程設(shè)計(jì)課程的設(shè)置根據(jù)課程特點(diǎn)和專業(yè)培養(yǎng)目標(biāo)而制訂。校外實(shí)踐基地是專業(yè)實(shí)習(xí)和畢業(yè)實(shí)踐的重要保障，學(xué)校應(yīng)當(dāng)把建設(shè)校外實(shí)踐基地作為人才培養(yǎng)的重中之重。

四、結(jié)語(yǔ)

工商管理是一門實(shí)踐性非常強(qiáng)的學(xué)科，該專業(yè)的人才培養(yǎng)目標(biāo)應(yīng)該定位于著重培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)踐能力、協(xié)調(diào)溝通能力和創(chuàng)新能力。當(dāng)前，學(xué)校工商管理專業(yè)正面臨著前所未有的挑戰(zhàn)和發(fā)展機(jī)遇，為實(shí)現(xiàn)人才培養(yǎng)目標(biāo)，應(yīng)堅(jiān)持以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，以學(xué)生為中心，抓住重點(diǎn)，突出特色，重點(diǎn)培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)習(xí)能力、應(yīng)變能力、適應(yīng)能力、人際溝通、協(xié)調(diào)和創(chuàng)新能力，提高學(xué)生發(fā)現(xiàn)、分析和解決實(shí)際問題的能力。

參考文獻(xiàn)：

[1]顧明遠(yuǎn).國(guó)家中長(zhǎng)期教育改革和發(fā)展規(guī)劃綱要（2010-2020年）[M].北京：北京師范大學(xué)出版社，2010.

[2]程春.論高校彈性學(xué)分體質(zhì)的創(chuàng)新與發(fā)展[J].知識(shí)經(jīng)濟(jì)，2013（24）：153.

[3]梁川.基于動(dòng)機(jī)激發(fā)理論的分層教學(xué)模式的實(shí)踐研究[J].遼寧高職學(xué)報(bào)，2015，17（8）：40-42.

楊萬(wàn)里的詩(shī)范文第4篇

（內(nèi)蒙古師范大學(xué)，內(nèi)蒙古 010020）

【摘　要】隨著新媒體的急速發(fā)展，媒介融合日益成為社會(huì)傳播的焦點(diǎn)，2015年央視春晚便是這一融合的新生兒。本文分析媒介融合的內(nèi)涵，以央視2015年的羊年春晚為例，探討媒介融合的價(jià)值所在。

關(guān)鍵詞 傳統(tǒng)媒體；新媒介；媒介融合；融合價(jià)值

伴隨著新型媒介技術(shù)的勁爆發(fā)展，舊的傳媒格局迅速被新的媒介系統(tǒng)侵蝕，在這種情況下，媒介融合的進(jìn)程表現(xiàn)得緊鑼密鼓，短時(shí)間內(nèi)，形成蔚為大觀之勢(shì)。2014年8月18日，中央全面深化改革領(lǐng)導(dǎo)小組第四次會(huì)議審議通過(guò)了《關(guān)于推動(dòng)傳統(tǒng)媒體和新興媒體融合發(fā)展的指導(dǎo)意見》，主席特別強(qiáng)調(diào)，要著力打造一批形態(tài)多樣、手段先進(jìn)、具有競(jìng)爭(zhēng)力的新型主流媒體，建成幾家擁有強(qiáng)大實(shí)力和傳播力、公信力、影響力的新型媒體集團(tuán)。媒介融合被提升至國(guó)家層面，映射出它的重要戰(zhàn)略意義。

1　媒介融合的內(nèi)涵解析

媒介融合并非新近幾年才出現(xiàn)的樣態(tài)，它是與人類文明史始終相隨的常態(tài)過(guò)程，只是每個(gè)歷史時(shí)期融合的速率大相徑庭。近年來(lái)，率先由西方傳媒業(yè)界提及的媒介融合，再一次成為全球新聞傳播界所關(guān)注的對(duì)象。那么，何為媒介融合，它的內(nèi)涵究竟怎樣呢？

“媒介融合”（Media Convergence）這一概念最早由美國(guó)馬薩諸塞州理工大學(xué)的Ithiel De Sola Pool教授在1983年出版的《自由的科技》一書中論及。他認(rèn)為：數(shù)碼電子科技導(dǎo)致涇渭分明的傳播形態(tài)聚合，致使各種媒介呈現(xiàn)出多功能一體化的趨勢(shì)。由于時(shí)代的局限性，他對(duì)媒介融合的定義還停留在傳統(tǒng)傳播介質(zhì)的視域內(nèi)。時(shí)至今日，媒介融合的定義仍未達(dá)成共識(shí)，專家學(xué)者的詮釋日趨多元、深邃，給人以啟迪。美國(guó)學(xué)者Andrew Nachison認(rèn)為，“媒介融合應(yīng)是印刷的、音頻的、視頻的、互動(dòng)性數(shù)字媒體組織之間的戰(zhàn)略的、操作的、文化的聯(lián)盟”；道爾（Doyle）認(rèn)為媒介融合是指電子通訊技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)和媒體的融合；詹金斯（Jenkins）詳細(xì)闡述了媒介融合的五種形式：技術(shù)融合、經(jīng)濟(jì)融合、社會(huì)或組織融合、文化融合和全球融合；美國(guó)西北大學(xué)教授Rich Gordon對(duì)媒介融合進(jìn)行了詳細(xì)地探討和劃分，稱融合應(yīng)包括所有權(quán)融合、策略性融合、結(jié)構(gòu)性融合、信息采集融合和新聞表達(dá)融合。與此同時(shí)，國(guó)內(nèi)學(xué)者也紛紛進(jìn)行了熱烈探討，清華大學(xué)熊澄宇教授認(rèn)為，媒介融合是指“所有的媒介都向電子化和數(shù)字化這種形式靠攏，這個(gè)趨勢(shì)是由數(shù)字技術(shù)驅(qū)動(dòng)的，并在網(wǎng)絡(luò)技術(shù)的推動(dòng)下變得可能?！敝袊?guó)人民大學(xué)蔡雯教授將媒介融合定義為，“在以數(shù)字技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)和電子通訊技術(shù)為核心的科學(xué)技術(shù)的推動(dòng)下，組成大媒體業(yè)的各產(chǎn)業(yè)組織在經(jīng)濟(jì)利益和社會(huì)需求的驅(qū)動(dòng)下通過(guò)合作、并購(gòu)和整合等手段，實(shí)現(xiàn)不同媒介形態(tài)的內(nèi)容融合、傳播渠道融合和媒介終端融合的過(guò)程。”

學(xué)者們對(duì)媒介融合的定義均有可取之處，卻因立足的媒介文化環(huán)境和媒介研究視角不同，顯得媒介融合定義難下定論。筆者認(rèn)為，媒介融合涉及到的相關(guān)系數(shù)較為龐雜，但“它肇始于技術(shù)創(chuàng)新，加速于制度創(chuàng)新，深化于市場(chǎng)創(chuàng)新，最終表現(xiàn)為產(chǎn)品創(chuàng)新”的規(guī)律是不變的。因此把握好媒介融合的內(nèi)涵比下定義更為合理。有鑒于此，筆者將媒介融合的內(nèi)涵囊括于三個(gè)維度之下：

一是，傳播介質(zhì)方面的融合。介質(zhì)作為一種有形的物質(zhì)存在，是承載傳播信息和觀念的基礎(chǔ)工具，媒介融合就是要將報(bào)紙、電視等傳統(tǒng)傳播介質(zhì)與借助網(wǎng)絡(luò)技術(shù)發(fā)展起來(lái)的新型媒體技術(shù)相融合，實(shí)現(xiàn)“你中有我，我中有你”，優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)的全媒體平臺(tái)。

二是，業(yè)務(wù)經(jīng)營(yíng)方面的融合。新老媒介的融合必將沖擊傳統(tǒng)的業(yè)務(wù)操作與媒介經(jīng)營(yíng)，媒介融合要求傳媒業(yè)者必須提升自身素質(zhì)，學(xué)會(huì)并掌握融媒體下的新聞采寫技能、攝影攝像技能、不同媒介的編輯與傳輸技能等，還得樹立融媒體的工作視眼，將工作實(shí)踐立足于媒體融合大格局之下。媒介融合也改變著經(jīng)營(yíng)管理方式，機(jī)構(gòu)的兼并與重組、資本的運(yùn)作與經(jīng)營(yíng)等具體操作，都需要依據(jù)媒介融合的要求進(jìn)行整合與聯(lián)動(dòng)，以破除獨(dú)立經(jīng)營(yíng)的弊端。

三是，價(jià)值理念的融合。媒介融合不僅要改變?cè)忻浇樾螒B(tài)，催生新的媒介形態(tài)，還要踐行融合理念，而不是簡(jiǎn)單相加。媒介融合需要一個(gè)漫長(zhǎng)的磨合過(guò)程，是系統(tǒng)性工程，它有自身發(fā)展規(guī)律，需要學(xué)界和業(yè)界共同探討與摸索。這一過(guò)程中，需要我們改變定勢(shì)思維，呼喚制度與理念創(chuàng)新，使不同媒介與融合大勢(shì)相匹配，真正產(chǎn)生融合實(shí)效。

2　媒介融合的成功典范：2015年央視羊年春晚

央視春晚歷經(jīng)33年的發(fā)展，已經(jīng)成為中國(guó)百姓春節(jié)不可缺少的年度盛宴。三十多年來(lái)，央視春晚始終緊隨時(shí)代脈搏，不斷推陳出新，給觀眾留下了深刻的印象。近年來(lái)，在新媒體巨浪的卷攜下，央視春晚同其它傳統(tǒng)媒體一樣，受眾受到瓜分，收視率連年下跌。然而，2015年央視春晚卻不拘一格，改頭換面，充分將多媒體炫酷科技嫁接到聯(lián)歡晚會(huì)，在媒介融合大潮下成功涅槃。

借力新型媒介，創(chuàng)新媒介產(chǎn)品，強(qiáng)化品牌文化。媒介融合是信息技術(shù)不斷創(chuàng)新與應(yīng)用的結(jié)果，它沒有終極目標(biāo)，只有不斷地推進(jìn)與演化，其特征多趨向?yàn)椋骸岸嗝襟w信息在同一平臺(tái)上的能量互補(bǔ)；各類媒體之間的信息能量交換；信息傳播者與信息接受者之間的信息能量交互；外部產(chǎn)業(yè)對(duì)傳媒業(yè)的能量支持?！毖胍暣和碜鳛橐粰n品牌節(jié)目，過(guò)去幾十年間，缺乏品牌形象意識(shí)，被業(yè)界笑稱只會(huì)“聯(lián)歡”的節(jié)目。2015年羊年春晚一反常態(tài)，有效地將新媒體應(yīng)用嵌入熒屏，并借助多維媒介科技，大力開發(fā)媒介產(chǎn)品，形成了宣傳曲、宣傳片、吉祥物等一系列媒介產(chǎn)品，使觀眾生動(dòng)地了解春節(jié)與春晚的同時(shí)，也助推了自身品牌文化的傳播。特別是微信紅包的發(fā)放，以及春晚首個(gè)吉祥物“陽(yáng)陽(yáng)”的開發(fā)，不僅傳遞了傳統(tǒng)春節(jié)文化，寄寓了新年愿望，還極大地躍動(dòng)了觀眾的欲望與激情，更重要的是通過(guò)媒介產(chǎn)品研發(fā)，潛移默化地塑造了春晚欄目形象，增強(qiáng)了品牌的識(shí)別度。

拓展傳播渠道，爭(zhēng)取市場(chǎng)份額，擴(kuò)大欄目影響。多元傳播渠道的共融與多維聲像技術(shù)的集成應(yīng)用是媒介融合帶來(lái)的最顯著變化。這種變化看似新媒體對(duì)老媒體進(jìn)行沖擊，實(shí)質(zhì)是新老媒體的一種交混與更新、優(yōu)化與培植，關(guān)鍵在于媒體順勢(shì)而為，傳播渠道和方式的拓展與運(yùn)籌。以往央視春晚只在央視、衛(wèi)視頻道，以及個(gè)別海外媒體播出，而今年破格將直播權(quán)授予像愛奇藝這樣的視頻網(wǎng)站，并加深了與微信、微博、客戶端、You Tube等社交媒體的合作，呈現(xiàn)出多渠道融通與聯(lián)動(dòng)的繁榮，擴(kuò)大了央視春晚的聲勢(shì)影響。索福瑞數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示：2015年春晚的熒屏總收視率為29.6%，雖不及去年，但人均收視時(shí)長(zhǎng)較往年大幅增加，是2014年的2倍有余，達(dá)155.55分鐘/人。央視春晚欄目組為了擴(kuò)大海外聲勢(shì)，還特意邀請(qǐng)美聯(lián)社、路透社等國(guó)際媒體參加首次春晚海外推薦會(huì)，并與TWITTER、FACEBOOK等海外社交平臺(tái)合作，開展2015年春晚預(yù)熱活動(dòng)。此外，在海外播發(fā)宣傳片和廣告、組織春節(jié)活動(dòng)等方面也做了巨大努力，有效擴(kuò)展了春節(jié)文化和央視春晚的傳播渠道，獲取了更多的“注意力”，而這種“注意力”正是媒介市場(chǎng)化時(shí)代的制勝法寶。

更新價(jià)值理念，增強(qiáng)受眾體驗(yàn)，提升春晚價(jià)值。媒介技術(shù)的發(fā)展使信息傳播由大眾傳媒的“點(diǎn)對(duì)面”向傳媒分眾的“點(diǎn)對(duì)點(diǎn)”過(guò)度，媒介受眾由以往的單向閱聽的被動(dòng)角色轉(zhuǎn)變?yōu)閭髅綖槠淞可矶ㄖ瀑Y訊、娛樂服務(wù)的用戶。這種傳媒趨向直接引發(fā)社會(huì)階層和文化需求的“碎片化”，“使原有的社會(huì)階層經(jīng)由社會(huì)觀念達(dá)到集體行動(dòng)的邏輯發(fā)生了某種斷裂，社會(huì)觀念的利益化和個(gè)性化傾向明顯”。為了適應(yīng)“碎片化”、“個(gè)性化”的時(shí)代要求，媒體只有揣度與滿足消費(fèi)者的需求，轉(zhuǎn)變“傳者至上”的價(jià)值理念，才可能獲得受眾認(rèn)可。2015年羊年春晚之所以獲贊，就是欄目組能夠站在媒介受眾的角度去思考節(jié)目設(shè)置，從而較好地滿足了受眾需要。春晚期間，央視通過(guò)微信“搖一搖”平臺(tái)，與觀眾互動(dòng)總量超過(guò)110億次，微信祝福在185個(gè)國(guó)家之間傳遞了約30000億公里，相當(dāng)于往返地月370余萬(wàn)次。再如“曬曬全家?！?，觀眾通過(guò)新型媒介，將全家福上傳到央視演播現(xiàn)場(chǎng)，直接拉近了與春晚現(xiàn)場(chǎng)的距離，有一種賓至如歸的親切感。這樣的媒介創(chuàng)制，不僅激發(fā)了全民跨屏互動(dòng)的熱情，傳遞了新年夙愿，還把“溜走”的觀眾再次拉回?zé)善?，提升了央視春晚的價(jià)值，堪稱傳統(tǒng)媒體攜新媒體的一次華麗亮彩。

3　媒介融合的意義

新媒體攜領(lǐng)傳統(tǒng)媒體奏演的融合之勢(shì)如火如荼，它刷新了媒介發(fā)展歷史，催生了新的社會(huì)變革力量，改變著社會(huì)的多維發(fā)展，特別是在社會(huì)互動(dòng)、媒介內(nèi)容、媒介運(yùn)營(yíng)模式等方面，凸顯出巨大的融合價(jià)值。

有利于打造無(wú)界的社會(huì)互動(dòng)空間。媒介融合肇始于技術(shù)創(chuàng)新，而媒介技術(shù)發(fā)展帶來(lái)最顯著的變化就是信源泛化和信息傳播的裂變呈現(xiàn)，這些新的信息傳播特點(diǎn)，改變了過(guò)去獨(dú)占信息的權(quán)力中心，自上而下的線性傳播變得岌岌可危，民主化、扁平化、去中心化的無(wú)界信息傳播成為潮流。媒體融合大勢(shì)之前，傳統(tǒng)媒體掌握著信息的主動(dòng)權(quán)，信息傳播和渠道選擇受制于國(guó)家利益和精英階層，公眾無(wú)法看到信息的天然狀貌。新媒體的出現(xiàn)，打破了信息的絕對(duì)壟斷，呈現(xiàn)出多元化的傳受趨勢(shì)，公眾對(duì)信息公開透明和主動(dòng)傳播的欲望加強(qiáng)，更重要的是，他們借助網(wǎng)絡(luò)互動(dòng)平臺(tái)，將長(zhǎng)期壓抑的情緒釋放出來(lái)，崩發(fā)出他們對(duì)社會(huì)的長(zhǎng)期關(guān)切。媒介融合大勢(shì)正迎合了他們參與社會(huì)、重置話語(yǔ)權(quán)的期望，有效連接了“上下層”的平等對(duì)話，緩解了社會(huì)氣壓。

有利于開發(fā)高品質(zhì)的媒介傳播內(nèi)容。傳統(tǒng)媒體形態(tài)比較單一，技術(shù)手段應(yīng)用也相對(duì)有限，新型媒介技術(shù)的開發(fā)，使媒介形態(tài)變得繁華，為內(nèi)容、產(chǎn)品、技術(shù)、管理、平臺(tái)和人才的一體化提供了先決基礎(chǔ)，媒體融合可以將擁有高品質(zhì)內(nèi)容的傳統(tǒng)媒體與高技術(shù)的新型媒介進(jìn)行統(tǒng)和，對(duì)傳媒內(nèi)容進(jìn)行多角度、全方位的二次加工、處理和采編，進(jìn)而滿足各類人群的個(gè)性化需求，增強(qiáng)了他們的媒介體驗(yàn)，從而有效地提升了媒介信息產(chǎn)品的檔次和品味，最大地實(shí)現(xiàn)傳播效果。

有利于推進(jìn)高級(jí)的媒介運(yùn)營(yíng)模式。新媒體技術(shù)的應(yīng)用使本來(lái)清晰的媒體邊界變得模糊不堪，媒介市場(chǎng)的激烈競(jìng)爭(zhēng)，迫使獨(dú)立運(yùn)作的媒體企業(yè)與其它媒體合作，重新劃分利益地盤，帶來(lái)組織結(jié)構(gòu)和營(yíng)銷方式的調(diào)整。媒體融合的好處之一就是讓不同媒體之間相互借力，揚(yáng)長(zhǎng)避短，共同架構(gòu)高效的媒介組織與營(yíng)銷方略。中央電視臺(tái)的電視技術(shù)、電視設(shè)備和技術(shù)應(yīng)用都走在了世界前沿，在向新興主流媒體轉(zhuǎn)型的過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)自己有內(nèi)容研發(fā)和節(jié)目生產(chǎn)的優(yōu)勢(shì)，但在多屏傳播上存在欠缺，因此電視臺(tái)有針對(duì)性地改進(jìn)了組織管理體系和產(chǎn)業(yè)經(jīng)營(yíng)體系，如研發(fā)了全流程的采編播體系，建立起了央視影音、央視新聞、央視體育、央視樂動(dòng)為核心的媒體融合產(chǎn)品體系，搭建了全產(chǎn)業(yè)鏈的版權(quán)開發(fā)體系和跨媒體的傳播效果考評(píng)體系，有效地做到了傳統(tǒng)媒體和新興媒體優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)、一體發(fā)展。

參考文獻(xiàn)

［1］蔡雯.新聞傳播的變化融合了什么[J].中國(guó)記者，2005（09）.

［2］朱天，彭泌溢.試論媒介融合中的“加減之道”——時(shí)代華納與美國(guó)在線“世紀(jì)婚姻”終結(jié)對(duì)我國(guó)“三網(wǎng)融合”的啟示.http：//media.people.com.cn[OL/J].

［3］高鋼.媒體融合:追求信息傳播理想境界的過(guò)程[J].國(guó)際新聞界，2007，3.

［4］數(shù)據(jù)來(lái)源：2015年央視春晚索福瑞數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)[Z].

楊萬(wàn)里的詩(shī)范文第5篇

關(guān)鍵詞：甲烷古菌； Hungate除氧系統(tǒng)； 富集； 滾管分離； 純培養(yǎng)

中圖分類號(hào)：Q939文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1006-3315（2014）04-170-003

厭氧微生物的分離是黔南民族師范學(xué)院微生物課程開放性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目之一。目前國(guó)內(nèi)高校多數(shù)實(shí)驗(yàn)室對(duì)嚴(yán)格厭氧菌分離純化主要采用焦性沒食子酸法、厭養(yǎng)罐法、厭養(yǎng)培養(yǎng)箱法等[1]。焦性沒食子酸法進(jìn)行厭養(yǎng)菌分離培養(yǎng),由于其方法簡(jiǎn)單，操作容易,在大專院校微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)中仍廣泛使用,但操作過(guò)程厭氧條件不易控制，特別是對(duì)嚴(yán)格厭氧的甲烷古菌分離效果差。厭養(yǎng)罐法能夠?yàn)閰捬蹙L(zhǎng)提供嚴(yán)格厭氧的環(huán)境，但不能為整個(gè)分離純化操作過(guò)程提供厭氧環(huán)境，使用受到限制。厭養(yǎng)培養(yǎng)箱法雖然能為厭氧菌分離培養(yǎng)提供嚴(yán)格厭氧環(huán)境，需要特制設(shè)備,在厭氧箱中操作也不方便，由于價(jià)格昂貴，因而其應(yīng)用受到一定限制。為此，為了改進(jìn)厭氧細(xì)菌的分離純化方法，結(jié)合對(duì)厭氧消化器中甲烷古菌的分離與純化開放性實(shí)驗(yàn)，借助Hungate除氧系統(tǒng)進(jìn)行稀釋滾管分離，收到了很好的效果，現(xiàn)將有關(guān)技術(shù)介紹如下。

一、材料用具

1.接種物

取自黔南民族師范學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室厭氧發(fā)酵缸（厭氧消化器）底部的沉積物。

2.儀器用具

2.1Hungate除氧系統(tǒng)。Hungate除氧系統(tǒng)由高純氫氣、高純氮?dú)?，銅柱，加熱套，不銹鋼分支管，橡皮膠管，注射器及9號(hào)針頭等組成。銅柱結(jié)構(gòu)直徑30～50mm、長(zhǎng)300～500mm的石英玻璃管，兩端加工成漏斗狀，便于連接膠管，玻璃管中裝入碎銅絲（長(zhǎng)10～20mm，直徑0.5mm），壓緊，銅絲下面墊上玻璃纖維以防止碎銅絲散落，上端留出50mm左右的空間。銅柱外纏繞加熱帶，銅柱頂端用膠管與具有分支的不銹鋼通氣總管連接。不銹鋼總管下的各分支管用橡皮膠管連接，橡皮膠管的另一端連接1mL塑料質(zhì)注射器，注射器再與9號(hào)針頭連接（圖1）。

圖1Hungate厭氧操作系統(tǒng)示意圖

2.2其它器具。高壓滅菌鍋，恒溫水浴鍋，恒溫培養(yǎng)箱，熒光顯微鏡，厭氧管（16×160mm），厭氧瓶（100mL），光波爐，3000 mL三角瓶，各種規(guī)格的注射器（1mL、2mL、5mL）等。

二、方法

1.獲取無(wú)氧N2、H2、CO2氣體

甲烷菌是嚴(yán)格厭氧微生物，都能利用H2和CO2合成CH4，一般分離甲烷菌都用H2和CO2作為營(yíng)養(yǎng)。其分離過(guò)程需要人工保持一個(gè)無(wú)氧環(huán)境進(jìn)行操作和供其生長(zhǎng)繁殖。用于分離嚴(yán)格厭氧微生物使用的氣體雖然是高純氣體（99.999%），但仍然含有微量的O2，利用Hungate銅柱除氧系統(tǒng)可除掉這些微量的O2，提供和保持無(wú)氧環(huán)境。

2.銅柱除氧與還原

銅柱除氧原理：實(shí)驗(yàn)使用的高純氣體（N2、H2、CO2）中含有微量的O2，當(dāng)氣體經(jīng)過(guò)銅柱時(shí)，這些氣體中的微量O2與Cu反應(yīng)生成CuO（O2＋CuCuO），從而流出銅柱的氣體則為無(wú)O2氣體。

銅柱還原：銅柱使用后，里邊的Cu被氧化為CuO不能繼續(xù)與O2發(fā)生化合反應(yīng)，失去除氧能力。此時(shí)，關(guān)掉其它氣體，通入H2，同時(shí)使銅柱升溫（達(dá)350℃），當(dāng)H2通過(guò)高溫銅柱時(shí)，銅柱內(nèi)CuO與H2反應(yīng)（CuO＋H2Cu＋H2O）生成單質(zhì)Cu，CuO在加熱條件下（350℃）被H2還原為Cu，銅柱恢復(fù)除氧能力可反復(fù)使用。

操作步驟：打開Hungate銅柱除氧系統(tǒng)通氣橡皮管的通氣開關(guān)（止水夾），開啟H2鋼瓶，H2氣流通過(guò)銅柱，從銅柱里流出的H2用橡皮管引出室外。此時(shí)接通電熱套電源，銅柱升溫，溫度達(dá)到350℃左右，20～30min后，銅柱內(nèi)的碎銅絲被H2還原，由黃黑色變?yōu)榧冦~錚亮色，當(dāng)銅柱里面的水蒸氣被排出完全后，關(guān)閉H2鋼瓶，銅柱還原結(jié)束。

3.獲取無(wú)氧N2、H2和CO2氣體

無(wú)氧N2用于厭氧菌分離操作和培養(yǎng)過(guò)程中驅(qū)趕空氣，保證局部無(wú)氧環(huán)境。在銅柱還原結(jié)束后，立即打開N2鋼瓶，氣流大小控制以針頭對(duì)準(zhǔn)操作者手背5cm距離明顯感覺到氣流為宜，并隨時(shí)注意控制氣流的大小。此時(shí)銅柱內(nèi)的碎銅絲處于還原狀態(tài)的單質(zhì)銅，當(dāng)通入高純N2（99.999%）時(shí)，其中所含的極微量氧與單質(zhì)銅反應(yīng)，氧被固定下來(lái)（形成CuO），流出銅柱的則是無(wú)氧N2。利用無(wú)氧N2氣流驅(qū)趕厭氧管、血清瓶等培養(yǎng)容器和培養(yǎng)基中的空氣，以及挑菌時(shí)保證無(wú)氧環(huán)境。使用完畢后，先關(guān)緊N2鋼瓶，接著用止水夾封閉所有橡皮管。無(wú)氧H2、CO2的獲取方法操作步驟相同。

2.制備無(wú)氧培養(yǎng)基

2.1培養(yǎng)基配方（詳見表1）

表1培養(yǎng)基配方表[2]

注：微量元素溶液配制時(shí)先溶解氨三乙酸，NaOH調(diào)pH于6.5左右。依次溶解其它化合物，最后調(diào)pH于7.0。

3.制備方法

按照配方稱取藥品置于事先放有適量蒸餾水的三角瓶中溶解后，加入1mL的1‰刃天青液（W/V），0.4g的鹽酸半胱氨酸，用NaOH調(diào)節(jié)pH值，加足需要水量，用記號(hào)筆在三角瓶外壁標(biāo)上記號(hào)，加入一定量的蒸餾水作蒸發(fā)量后，置于光波爐加熱煮沸10min后，通入無(wú)氧N2（驅(qū)趕空氣，保持培養(yǎng)基為無(wú)氧狀態(tài)）煮沸至培養(yǎng)基顏色變白后再煮10min左右進(jìn)行分裝。用9號(hào)針頭連接的橡皮管，將無(wú)氧N2引入待裝培養(yǎng)基的厭氧管和厭氧瓶（16×160mm厭氧管、100mL厭氧瓶）洗管、瓶（用無(wú)氧N2換出瓶中空氣，使容器中無(wú)氧分子存在），用培養(yǎng)基分液器進(jìn)行分裝，厭氧管裝4.5mL，厭氧瓶裝45mL，待裝好培養(yǎng)基后取出N2管塞上橡膠塞，旋緊蓋子。轉(zhuǎn)好培養(yǎng)基的厭氧試管用專用布袋裝好與厭氧瓶一起置121℃，0.1MPa滅菌20min待用。（厭氧瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基使用前加入無(wú)菌無(wú)氧1%Na2S溶液0.1mL和10%NaHCO30.1mL，厭氧管內(nèi)培養(yǎng)基使用前加入1%Na2S溶液0.02mL和10%NaHCO30.02mL）。

4.甲烷菌富集

用水樣取樣器取沼氣底泥5克于上述裝有45mL培養(yǎng)基的厭氧瓶中，利用Hungate厭氧系統(tǒng)，按H2/CO2體積比為40/10的比例分別加入H280mL、CO220mL，置30℃恒溫培養(yǎng)30天，用化學(xué)吸收法[3]檢測(cè)厭氧瓶是否有甲烷氣體產(chǎn)生，在甲烷菌生長(zhǎng)對(duì)數(shù)增長(zhǎng)中期，從產(chǎn)甲烷氣體的富集瓶中取樣進(jìn)行滾管分離。

5.滾管分離和純化培養(yǎng)

5.1滾管分離培養(yǎng)。對(duì)檢測(cè)有甲烷菌存在的富集處理，進(jìn)行第1次滾管分離。在分離培養(yǎng)基中補(bǔ)加瓊脂粉（20g/L），分裝于厭氧試管（16 mm×160mm，4.5mL培養(yǎng)基/管），滅菌。滅菌后置55℃水浴中保持液態(tài)，每支厭氧管中分別加入1%Na2S溶液0.02mL和10%NaHCO30.02mL。用1mL無(wú)菌無(wú)氧注射器取富集的樣品液0.5mL，作10-1～10-9梯度稀釋，重復(fù)3次，每支試管上下倒2～3次（注意不要產(chǎn)生氣泡），使樣品與培養(yǎng)基充分混勻并立即將稀釋管置于裝有4℃以下冰水的磁盤中迅速滾管，使培養(yǎng)基與樣品均勻光滑無(wú)氣泡凝固于管壁上。

將滾管分離樣品的厭氧管置于試管架上，按H2/CO2體積比為40/10的比例分別加入H240mL、CO210mL，置30℃恒溫培養(yǎng)30天，在管壁的培養(yǎng)基上有明顯的菌落出現(xiàn)，用化學(xué)吸收法檢測(cè)是否有甲烷氣體產(chǎn)生。對(duì)有甲烷氣體產(chǎn)生的管子，置于熒光顯微鏡下觀察菌落，對(duì)有熒光反應(yīng)的菌落用記號(hào)筆畫圈作出記號(hào)，待進(jìn)一步分離培養(yǎng)。

5.2甲烷菌純化。純化過(guò)程是多次挑取單菌落、稀釋滾管培養(yǎng)的過(guò)程。截取細(xì)玻璃管（內(nèi)徑0.5cm、外徑0.8cm，長(zhǎng)15cm），兩端塞上脫脂棉，在酒精燈的火焰上加熱并拉成毛細(xì)管，高溫滅菌并烘干。在無(wú)氧條件下挑菌：將有熒光反應(yīng)菌落的管子置于鐵架臺(tái)上固定，打開管口，用無(wú)氧N2吹入管中，使管內(nèi)保持無(wú)氧狀態(tài)。取毛細(xì)管一端與橡膠管連接（橡膠管一端用夾子封住，含在口中），另一端（2mm左右處）在酒精燈火焰上加熱并使之彎成約90℃，用它的彎頭接觸到有熒光記號(hào)的菌落，輕吸一口氣，使菌落進(jìn)入毛細(xì)管，移出毛細(xì)管并快速放入有4.5mL培養(yǎng)基的無(wú)氧管子中，迅速塞上膠塞的同時(shí)折斷毛細(xì)管并旋上外蓋。按H2/CO2體積比為40/10的比例分別加入H240mL、CO210mL，置30℃恒溫培養(yǎng)30天，在管壁的培養(yǎng)基上有明顯的菌落出現(xiàn)，用化學(xué)吸收法檢測(cè)是否有甲烷氣體產(chǎn)生。

通過(guò)單菌落分離獲取的菌液經(jīng)培養(yǎng)后底部有沉淀出現(xiàn)，用吸收法檢測(cè)管中有無(wú)甲烷氣體產(chǎn)生。對(duì)有甲烷氣體的菌管，用上述方法再進(jìn)行2次滾管分離，則可獲得甲烷菌的純培養(yǎng)。挑取純培養(yǎng)菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)30d后，置4℃條件下進(jìn)行保藏，同時(shí)進(jìn)行鑒定。

6.甲烷菌鑒定

6.1菌落熒光反應(yīng)檢測(cè)。利用產(chǎn)甲烷古菌在特定波長(zhǎng)（420nm）激發(fā)下能產(chǎn)生特有的藍(lán)綠熒光，對(duì)分離到的樣品管進(jìn)行菌落熒光反應(yīng)檢測(cè)，有熒光反應(yīng)的樣品管證明其有甲烷菌存在。

6.2產(chǎn)甲烷氣體檢測(cè)。利用甲烷菌能產(chǎn)生甲烷氣體的特性，將有熒光反應(yīng)的樣品管用氣相色譜儀或化學(xué)吸收法進(jìn)行產(chǎn)甲烷氣體檢測(cè)，有甲烷氣體產(chǎn)生的樣品管，再一次證明樣品中有甲烷菌存在。

6.3產(chǎn)甲烷菌純度檢測(cè)。用1mL注射器抽取有熒光反應(yīng)的樣品液置熒光顯微鏡下觀察，菌體有熒光產(chǎn)生，物氣體雜菌，則為甲烷菌純菌，并將置常溫冰箱4℃保藏，待進(jìn)一步研究或應(yīng)用。

三、結(jié)果與小結(jié)

1.結(jié)果

1.1利用稀釋滾管分離法從厭氧消化器中分離獲得99支甲烷古菌純培養(yǎng)，經(jīng)產(chǎn)甲烷氣體和熒光反應(yīng)鑒定證明是甲烷菌（圖2）。

甲烷桿菌屬甲烷短桿菌屬甲烷球菌屬甲烷微球菌屬

Methanobacterium Methanobrevibacter Methanococcus Methanobacterium

（1000×） （1000×）（1000×）（1000×）

圖2采用稀釋滾管分離純化法得到的甲烷菌圖片

1.2甲烷菌分離純化技術(shù)流程

經(jīng)上述試驗(yàn)，歸納建立甲烷菌分離純化技術(shù)，其流程如下：

第一次滾管分離

第二次滾管分離

第三次滾管分離

1.3小結(jié)

采用Hungate厭氧操作系統(tǒng)清除氧氣徹底，操作過(guò)程能及時(shí)發(fā)現(xiàn)和控制無(wú)氧環(huán)境。培養(yǎng)基中加入對(duì)氧氣敏感的刃天青指示劑，能及時(shí)觀察操作過(guò)程的無(wú)氧狀態(tài)，使整個(gè)操作過(guò)程和培養(yǎng)都在無(wú)氧狀態(tài)，滿足嚴(yán)格厭氧的要求。建立的稀釋滾管分離法操作簡(jiǎn)便、利用熒光顯微鏡觀察，菌落易于辨認(rèn)，易挑取，操作過(guò)程不易污染，分離效率高等優(yōu)點(diǎn)。只要滿足厭氧微生物的營(yíng)養(yǎng)需求，樣品中的厭氧微生物都能分離出來(lái)。

基金項(xiàng)目：黔教高發(fā)[2012]426號(hào)；黔南民族師范學(xué)院微生物學(xué)重點(diǎn)學(xué)科[2011.6]；黔南民族師范學(xué)院教學(xué)質(zhì)量工程項(xiàng)目院教發(fā)[2011]5號(hào)。

參考文獻(xiàn)：

[1]龐德公,楊紅建.產(chǎn)甲烷菌的分離純化培養(yǎng)及其培養(yǎng)基對(duì)于菌株的選擇作用[J]中國(guó)畜牧獸醫(yī),2010，37(6)：32―35