99久久99久久精品免费看蜜桃,亚洲国产成人精品青青草原,少妇被粗大的猛烈进出va视频,精品国产不卡一区二区三区,人人人妻人人澡人人爽欧美一区

首頁 > 文章中心 > 大人不及格

大人不及格

前言:想要寫出一篇令人眼前一亮的文章嗎?我們特意為您整理了5篇大人不及格范文,相信會(huì)為您的寫作帶來幫助,發(fā)現(xiàn)更多的寫作思路和靈感。

大人不及格范文第1篇

宣傳部作為一個(gè)集信息與宣傳于一體的部門,是需要一定的技術(shù)支撐的。

1、要做好基礎(chǔ)工作,為會(huì)議活動(dòng)拍照攝影記錄;定期更新和整理博客不斷更新學(xué)術(shù)中心的最新動(dòng)態(tài),讓社員能更及時(shí)更準(zhǔn)確的了解本社的活動(dòng)與通知;為重大會(huì)議及活動(dòng)制作視頻和ppt;及時(shí)為會(huì)員上傳有用的資料和信息等。

2、負(fù)責(zé)好社團(tuán)的形象設(shè)計(jì)和宣傳,包括海報(bào)的繪制和粘貼,社刊社報(bào)的發(fā)放,社團(tuán)簡報(bào)的制作等。

3、積極配合各部門的各項(xiàng)工作,各部門間的協(xié)調(diào)工作將會(huì)使學(xué)術(shù)中心的各項(xiàng)工作有條不紊的進(jìn)行,因此我宣傳部要增進(jìn)與其它部門的交流與溝通,促進(jìn)各項(xiàng)工作的有效進(jìn)行。

4、培養(yǎng)新隊(duì)員的繪畫能力、電腦能力、攝影能力等,為他們順利接班提供條件。

5、增進(jìn)部門內(nèi)部感情交流,讓新隊(duì)員有歸屬感,以學(xué)術(shù)中心為傲。在下學(xué)期時(shí)會(huì)的讓新隊(duì)員直接參與我們的活動(dòng)中,我們?cè)诩夹g(shù)上給以引導(dǎo),給他們提出建議,這樣才能保證學(xué)術(shù)中心人才的延續(xù)、不斷層。

新的開始總給人帶來新的希望,愿學(xué)術(shù)中心在大家的努力下永遠(yuǎn)屹立不倒,為有意于學(xué)術(shù)研究的人提供一個(gè)良好的平臺(tái)。

在過去的一年里,我校宣傳部在學(xué)校指導(dǎo)和帶領(lǐng)下,本著全心全意為同學(xué)們服務(wù)的宗旨,以獨(dú)立自主、和諧優(yōu)質(zhì)為原則,以實(shí)現(xiàn)學(xué)生的自主管理為目標(biāo),我們的本職工作做好的同時(shí),配合學(xué)校做好其他工作,結(jié)合我校學(xué)生的特點(diǎn),積極、創(chuàng)新地在同學(xué)中開展各種豐富多彩的校園活動(dòng),活躍校園文化氛圍;做好學(xué)校與同學(xué)們之間的橋梁和紐帶,加強(qiáng)師生間的溝通,為構(gòu)建和諧校園作出了自己的貢獻(xiàn)。我們的工作得到了同學(xué)的肯定。所以我們宣傳部應(yīng)該在去年的工作基礎(chǔ)上再進(jìn)一步,將我們的工作做的更好!

宣傳部是學(xué)生會(huì)的喉舌,也是學(xué)生會(huì)的一個(gè)門面,它負(fù)責(zé)全院各種活動(dòng)的宣傳,通過各種宣傳渠道,傳遞系團(tuán)委、學(xué)生會(huì)工作信息,并根據(jù)形式需要,對(duì)學(xué)生進(jìn)行有效的思想教育。其主要工作就是及時(shí)有效地把系團(tuán)委和學(xué)生會(huì)的信息傳達(dá)出去,讓廣大同學(xué)盡快知曉,并且定期制作主題鮮明、形式多樣的宣傳板報(bào)、反映全院師生的精神面貌和學(xué)生學(xué)習(xí)生活情況;同時(shí)作為學(xué)生會(huì)的一個(gè)部門,它還負(fù)有組織各項(xiàng)校園文化活動(dòng),增進(jìn)校園文化交流,豐富校園文化生活的職責(zé)。并且要求協(xié)助其他部處作好各項(xiàng)活動(dòng)的宣傳,充當(dāng)鼓號(hào)手和開路先鋒的角色。

新的一年開始了,校學(xué)生會(huì)的各項(xiàng)工作已經(jīng)緊鑼密鼓的展開,我們宣傳部也將飽滿的精神面貌做好新學(xué)期的部門工作,在上學(xué)期,我學(xué)系宣傳部全體干部、干事相互協(xié)作,積極配合,最終使我部門各項(xiàng)工作及活動(dòng)順利開展并取得相應(yīng)效果,完成了計(jì)劃任務(wù)。但我們自身的宣傳工作也存在著一定缺陷,為了吸取在以往工作中經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn),展現(xiàn)一個(gè)優(yōu)秀部門的實(shí)干精神,為更好地開展XX年下半年學(xué)生會(huì)宣傳部的各項(xiàng)工作,真正做到有計(jì)劃、有步驟的進(jìn)行各項(xiàng)工作,同時(shí)使我們的工作做出特色和成效,作為新一屆的宣傳部部長,更是深感肩上責(zé)任之重。我們對(duì)新學(xué)期的工作主要?jiǎng)澐譃閮蓚€(gè)大部分:加強(qiáng)部門自身建設(shè)和加強(qiáng)本部門與其他部門的交往。針對(duì)學(xué)生會(huì)提出的“團(tuán)結(jié)、嚴(yán)謹(jǐn)、求實(shí)、創(chuàng)新”的工作理念,我部作出了學(xué)生會(huì)宣傳部新學(xué)期的工作計(jì)劃。內(nèi)容

一、工作目標(biāo)加強(qiáng)宣傳部的紐帶作用,積極配合個(gè)方面的工作。加強(qiáng)各部門的聯(lián)系,積極主動(dòng)的行使宣傳職能,為我校學(xué)生會(huì)的宣傳工作再添亮點(diǎn);

2、積極挖掘和培養(yǎng)宣傳人才,為我校宣傳工作注入新鮮血液;

3、充分利用好展板和櫥窗欄,做好院會(huì)活動(dòng)總結(jié)和宣傳工作;

4、改革宣傳部內(nèi)部的運(yùn)行機(jī)制。讓每個(gè)人的能力都得以發(fā)揮,得以提高,擁有鍛煉的空間;

5、把宣傳部建設(shè)成一個(gè)人性化的溫暖大家庭。

二、加強(qiáng)部門自身建設(shè)和部門間的交流進(jìn)一步完善部門內(nèi)部的規(guī)章制度,提高工作成員的工作積極性,提高工作質(zhì)量。

2、細(xì)化部門內(nèi)的工作記錄,詳細(xì)記錄每位干事在任職期間所做的工作事跡,并將添加部內(nèi)的會(huì)議記錄。

3、節(jié)約經(jīng)費(fèi)開支,為保證此項(xiàng)工作開展,每次海報(bào)幕布等打印所出經(jīng)費(fèi)均采取透明制度,以收據(jù)為證。

4、鼓勵(lì)部門成員與其他部門成員交往,及時(shí)了解其他部門信息,把工作狀態(tài)由原來的被動(dòng)轉(zhuǎn)為主動(dòng),協(xié)助其他部門工作的完成,以更好的起到宣傳作用。

5、盡可能的美化校園的宣傳環(huán)境,增強(qiáng)宣傳部的宣傳力度。

6、部長例會(huì)每周與各部碰頭,了解他們的工作計(jì)劃和動(dòng)態(tài)。部內(nèi)每周舉行一次例會(huì),安排下周工作和總結(jié)工作情況;

7、積極主動(dòng)開展校園文化活動(dòng),豐富校園文化內(nèi)涵,并配合各部處活動(dòng),積極進(jìn)行宣傳;

8、每次活動(dòng)后詳細(xì)的記載工作情況,同時(shí)詳細(xì)記載材料使用情況;

9、將工作主力轉(zhuǎn)向大一干事,逐漸鍛煉干事們獨(dú)立工作的能力。

10、每次大型活動(dòng)后,或者至少每個(gè)月都必須將院里參加活動(dòng)的情況加以總結(jié),以照片和圖文的形式備案并在櫥窗里張貼;

11、部長、副部平時(shí)要熱心關(guān)心干事,在學(xué)習(xí)和生活上予以幫助。

三、工作重點(diǎn)

首先,海報(bào)、噴繪、通訊稿的宣傳是我們宣傳部的主要陣地,也是同學(xué)們獲得信息的重要渠道,其宣傳的力量和效果不言而喻,我部會(huì)發(fā)揮好學(xué)校的喉舌作用,為學(xué)校即將開展的系迎新晚會(huì),百科知識(shí)競賽等活動(dòng)做好宣傳工作。我們可在原有工作習(xí)慣上,銳意創(chuàng)新,時(shí)刻保持宣傳形式的多樣化新穎化。校園內(nèi)單一的常規(guī)宣傳模式已經(jīng)在某些程度上給大家造成了視覺疲勞,如何在宣傳方式上創(chuàng)新,將成為決定宣傳效果好壞的重要因素。因此,宣傳部將開拓的宣傳途徑,或是改良傳單、海報(bào)的版面來吸引同學(xué)們對(duì)于活動(dòng)信息的關(guān)注。此外,往日的宣傳工作,每每將重點(diǎn)放在前期宣傳上,因而也就忽略了在活動(dòng)舉辦后的后續(xù)報(bào)道。后期宣傳不僅是面向大眾的重要一筆,更是組織對(duì)于活動(dòng)的一次總結(jié)。

其次,達(dá)到海報(bào),噴繪、通訊稿宣傳的結(jié)合。使宣傳的效果最大化。宣傳不僅是一個(gè)部門的工作,做好宣傳需要每個(gè)部門的協(xié)調(diào)配合?;顒?dòng)前,我部會(huì)積極與主管部門做好相關(guān)的溝通,包括橫幅、海報(bào),制作要求,活動(dòng)現(xiàn)場的攝影需求等。

再次,加強(qiáng)新進(jìn)成員的培訓(xùn),以老帶新,注意新老交替的適應(yīng)過程,努力使各部員在工作中積極主動(dòng),充分發(fā)揮自己的主觀能動(dòng)性,講求創(chuàng)新。宣傳部的工作任務(wù)在學(xué)生會(huì)各部中是相對(duì)比較繁忙的、我們將會(huì)在指定時(shí)間內(nèi)完成學(xué)生會(huì)及各部委托的任務(wù),做好各項(xiàng)活動(dòng)的宣傳工作。完善宣傳部自身的建設(shè),把宣傳部建設(shè)成一個(gè)團(tuán)結(jié)積極向上的整體、宣傳部各個(gè)成員將在工作中努力提高自身素質(zhì),并積極主動(dòng)的工作,豐富宣傳形式,在工作中推陳出新,不斷提高自己。

最后,利用宣傳部作為學(xué)生會(huì)宣傳部和同學(xué)們之間的紐帶,利用他們把我們的信息帶給大眾,把我們的工作開展的更徹底。使同學(xué)們能了解最新活動(dòng)信息的同時(shí),也通過他們把同學(xué)們的心聲反饋給我們。做到上情下達(dá),下情上達(dá),使我們的宣傳工作能更有目的性的開展。

這里需要著重提出的是:我部將積極的配合其它部的工作,團(tuán)結(jié)各部以及各成員去應(yīng)對(duì)本學(xué)期即將到來的挑戰(zhàn)、在今后的工作中,要盡職盡則,要盡心盡力,要以飽滿的熱情,要以端正的態(tài)度去做好每一件工作、爭取使宣傳部的工作取得更好的效果,在新的一學(xué)年內(nèi)有大的進(jìn)步,爭做優(yōu)秀,為創(chuàng)建優(yōu)秀的部門做出我們自己應(yīng)有的努力。我相信,只要學(xué)生會(huì)宣傳部能夠上下同心,共同努力,在各部門的協(xié)助下,在老師的指導(dǎo)和幫助下,宣傳部會(huì)越5走越遠(yuǎn),越走越好。

大人不及格范文第2篇

相信有很多人都會(huì)盲目而不切實(shí)際的羨慕電視偶像劇里,那男女主角多彩多姿、豐富多變的感情生活。其實(shí),每個(gè)人都是這個(gè)世界上獨(dú)一無二的個(gè)體,誰也無法被他人所復(fù)制與取代,如同世上沒有指紋一樣的人,任何一個(gè)人都有一條屬于自己的人生軌道,不論你這一路上會(huì)遭遇到的喜怒哀樂與人生事物為何,都是經(jīng)過量身定做,而且只適合你自己去扮演的角色與戲份。

通常大部分的人都只是選擇性的節(jié)選你羨慕的對(duì)象,以及想要模仿的部分,所謂家家有本難念的經(jīng),你所欽羨的對(duì)象在你看不到的另一面,有什么樣的煩惱與缺憾,你不會(huì)知道,或者你也不感興趣。

什么叫做平淡無奇如白開水般的日子?你每天上學(xué)固定坐同一班捷運(yùn),或許當(dāng)天出門前還跟媽媽慪氣,接著中午吃六十塊的便當(dāng),上課時(shí)與同學(xué)間發(fā)生些小爭執(zhí),到了周末跟男朋友人擠人的看場電影,在假日的夜晚上網(wǎng)聊天,或者參加朋友在KTV舉辦的生日聚會(huì)等,以上這些日常生活中的瑣碎細(xì)節(jié),全部總結(jié)起來,就已經(jīng)算是一種人生戲劇,你已經(jīng)在演以自己為主角的偶像劇了。

大人不及格范文第3篇

3.自我意識(shí)發(fā)展程度偏低。

弗洛伊德心理動(dòng)力學(xué)理論強(qiáng)調(diào)潛意識(shí)領(lǐng)域內(nèi)的心理沖突在損害個(gè)體心理健康和造成心理異常中的作用[5]。處于青春期的青少年,常伴隨不安、情緒不穩(wěn)定等心理特征,容易受到各種心理沖突和壓力的影響,使身心發(fā)展失去平衡而出現(xiàn)問題行為。青少年的問題行為,是指青少年由于個(gè)人行為表現(xiàn)無法順利適應(yīng)多變的環(huán)境、致使他們開始感到適應(yīng)困難,無論在家庭、學(xué)校還是社會(huì)等各個(gè)方面,可能發(fā)生生理上或者精神上的困擾[4]。單親家庭對(duì)多數(shù)青少年來說是一種家庭不幸,由于青少年心理比較脆弱,往往很難面對(duì)和接受家庭的變故。父(母)愛的缺失,給他們帶來巨大的心理壓力。如果沒有積極的干預(yù)和引導(dǎo),他們就容易采用消極的心理防御機(jī)制以暫時(shí)達(dá)到心理平衡。在很多單親家庭中,青少年容易運(yùn)用壓抑或否認(rèn)的心理防御機(jī)制,有意識(shí)或無意識(shí)地拒絕承認(rèn)和回避那些使他們感到焦慮痛苦的事,以原始、幼稚的方法應(yīng)付當(dāng)前情景,使其心理發(fā)展落后于生理發(fā)展。當(dāng)自身不能滿足周圍環(huán)境對(duì)他們的期望和要求時(shí),就會(huì)產(chǎn)生更大的內(nèi)部沖突和緊張,如焦慮、自責(zé)、軀體化癥狀等。如果這種反應(yīng)過于強(qiáng)烈和持久,超過自身調(diào)節(jié)和控制能力,就會(huì)干擾他們正常人格的健康發(fā)展,甚至誘發(fā)犯罪[4]。

三、完善單親家庭大學(xué)生人格的對(duì)策

1.強(qiáng)化單親家庭大學(xué)生的交往意識(shí)。

人際交往是人的社會(huì)屬性之一,是人類所特有的一種精神層面的需求,是個(gè)體與周圍人之間進(jìn)行心理和行為的溝通、交流信息的活動(dòng)方式。是人類社會(huì)生活中非常重要的、不可缺少的行為,是現(xiàn)代社會(huì)中最現(xiàn)實(shí)的最重要的生活現(xiàn)象。大學(xué)生的人際交往,是指大學(xué)生群體之間及大學(xué)生與其他個(gè)體之間信息的溝通、思想的交流、情感的表達(dá)和協(xié)調(diào)能力的互動(dòng)行為。大學(xué)生開展健康積極的人際交往活動(dòng),有助于自我意識(shí)的形成,實(shí)現(xiàn)個(gè)體社會(huì)化。大學(xué)生的自我意識(shí)發(fā)展完善與他們的人際交往活動(dòng)范圍、層次有著一定的關(guān)系[6]。在我國現(xiàn)階段的教育中,由于升學(xué)壓力,在中考、高考階段學(xué)生沒有更多的閑暇和精力進(jìn)行人際交往。步入大學(xué)后,學(xué)習(xí)壓力相對(duì)減少,大學(xué)生又處于青春期的重要時(shí)期,對(duì)于人際交往的需求增強(qiáng),因此,我國青年時(shí)期的大學(xué)階段成為人際交往的重要需求時(shí)期。而且在大學(xué)期間人際關(guān)系的好壞直接決定大學(xué)生在與家人、老師、同學(xué)的交往中所獲得的社會(huì)經(jīng)驗(yàn)豐富與否,大學(xué)生通過廣泛的卓有成效的人際交往,會(huì)使他們從中學(xué)習(xí)到社會(huì)生活中必需的相關(guān)知識(shí)、技能、倫理道德規(guī)范、價(jià)值觀導(dǎo)向等,從而激起強(qiáng)烈的社會(huì)責(zé)任感,建立起自身的社會(huì)地位和社會(huì)責(zé)任。

單親家庭大學(xué)生由于家庭因素,或多或少都存在自卑、孤僻、悲觀厭世等人格特征,性格內(nèi)向、沉默寡言,在交往中常表現(xiàn)為交往不主動(dòng)、不積極。教育大學(xué)生掌握一定的交往知識(shí)和技巧對(duì)他們的人際交往能力的提升有促進(jìn)作用[5]??梢栽凇端枷氲赖滦摒B(yǎng)與法律基礎(chǔ)》課中充實(shí)人際交往的有關(guān)內(nèi)容,也可以開設(shè)類似《人際關(guān)系學(xué)》的理論課程,還可以邀請(qǐng)有關(guān)專家舉辦人際交往知識(shí)講座,針對(duì)大學(xué)生人際交往中的現(xiàn)實(shí)問題,教給他們適合的交際禮儀知識(shí)、交往方法和技巧,講授人際交往的重要性及良好人際關(guān)系對(duì)心理健康的影響,激發(fā)單親大學(xué)生的交往意識(shí),引導(dǎo)、強(qiáng)化單親大學(xué)生的交往意識(shí),使他們變被動(dòng)交往為主動(dòng)交往。切忌不能對(duì)單親大學(xué)生漠不關(guān)心甚至歧視、嘲笑,傷害離異家庭子女的自尊心,挫傷他們的交往積極性。

2.建立家庭、學(xué)校、社會(huì)相結(jié)合的教育機(jī)制。

學(xué)校應(yīng)爭取將家庭教育、社會(huì)教育納入學(xué)校教育要求的軌道上來,并充分發(fā)揮學(xué)校教育的主導(dǎo)作用。創(chuàng)造塑造健康人格的良好環(huán)境,通過一定的物質(zhì)環(huán)境和精神氛圍,使大學(xué)生在思想觀念、心理素質(zhì)、行為方式、價(jià)值趨向等諸方面對(duì)積極、健康的文化產(chǎn)生認(rèn)同,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)大學(xué)生的精神、心靈、人格的塑造。要重視發(fā)揮優(yōu)秀校園文化的育人功能,結(jié)合學(xué)校實(shí)際,在大學(xué)生中強(qiáng)化以校訓(xùn)為核心的校園精神,加強(qiáng)優(yōu)良校風(fēng)、教風(fēng)、學(xué)風(fēng)的建設(shè),引導(dǎo)和鼓勵(lì)單親家庭大學(xué)生參加豐富多彩的科技、文化、藝術(shù)、體育活動(dòng),使他們?cè)诹己玫姆諊惺艿綕撘颇挠绊?。學(xué)校還可以與離異家庭學(xué)生的監(jiān)護(hù)人建立密切聯(lián)系,互通情況、互相配合,可以開設(shè)專題講座為家長們講授離異家庭子女在情緒、情感上的特點(diǎn),并幫助離異家庭的家長學(xué)會(huì)如何與單親大學(xué)生進(jìn)行良好的溝通,父母離異后如何營造健康和諧的家庭氛圍及建立親子關(guān)系。家長的支持是單親家庭大學(xué)生進(jìn)入大學(xué)并維持其學(xué)習(xí)生活直至畢業(yè)就業(yè)的基本保障。單親家長作為未成年子女的監(jiān)護(hù)者,對(duì)子女承擔(dān)著從經(jīng)濟(jì)撫養(yǎng)到生活照料、情感慰藉等方面的責(zé)任和義務(wù)。要做到這一點(diǎn),不僅需要單親家長自身的勇氣和自信,而且需要一個(gè)支持性的親緣氛圍,以便給單親家庭大學(xué)生的成長成才提供力所能及的幫助,促其盡早從孤立無援的狀態(tài)中解脫出來。

任何弱勢群體的生存和發(fā)展都離不開政府支持。實(shí)際上,正是政府制定的助學(xué)貸款和減免學(xué)費(fèi)的政策,在很大程度上幫助貧困大學(xué)生完成了學(xué)業(yè)。但是,由于來自單親家庭的支持往往比一般貧困家庭更孱弱,加之單親家長自身的弱勢地位也常常令其子女難以釋懷,所以僅靠助學(xué)貸款和減免學(xué)費(fèi)仍不足以保障單親家庭大學(xué)生像其他大學(xué)生一樣學(xué)習(xí)生活。在此情況下,政府如果能在完善社會(huì)保障體制的過程中,對(duì)單親家庭問題予以充分考慮,盡快制定和完善相關(guān)的福利政策,對(duì)單親家庭及其未成年子女的撫養(yǎng)、教育問題予以特別的關(guān)懷和照顧,比如,可在就業(yè)和再就業(yè)的引導(dǎo)性政策上,向單親者及其子女傾斜,在學(xué)校、醫(yī)院和各種公共服務(wù)中,對(duì)單親者及其子女提供優(yōu)待,等等,那么不僅能從根本上解決單親家庭大學(xué)生的經(jīng)濟(jì)困難,而且能在很大程度上幫其減輕思想負(fù)擔(dān),為其提供精神支持[8]。

參考文獻(xiàn):

[1]王世軍,單親家庭及其對(duì)子女成長的影響[J].學(xué)海,2002,(4).

[2]劉媛,姜潮,林媛,等.單親大學(xué)生領(lǐng)悟社會(huì)支持及心理健康狀況的研究[J].中國健康心理學(xué)雜志,2009,17(5):604-606.

[3]趙坤,張林.心理學(xué)導(dǎo)論.北京:中國傳媒大學(xué)出版社,2009.10.

[4]劉寶花,黃悅勤,字燕華,等.父母養(yǎng)育方式及其影響因素與神經(jīng)癥關(guān)系的多因素分析[J]中國心理衛(wèi)生雜志,1999,12(3):156-157.

[5]鄧世英,劉視湘,鄭日昌.西方有關(guān)父母教養(yǎng)方式與青少年問題行為關(guān)系的理論及其研究綜述[J].心理發(fā)展與教育,2001(4):50-54.

[6]余鋒.思想政治教育視角下當(dāng)代大學(xué)生人際交往中的瓶頸及對(duì)策.

大人不及格范文第4篇

【關(guān)鍵詞】 骨肉瘤

關(guān)鍵詞: 骨肉瘤;差異表達(dá)基因;反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù);基因表達(dá)

摘 要:目的 篩選數(shù)個(gè)在人骨肉瘤中檢出率高的差異表達(dá)基因片段并探討其臨床意義. 方法 以篩選出的5個(gè)新基因片段作為研究對(duì)象,采用RT-PCR技術(shù)檢測37例骨肉瘤、68例其他骨腫瘤及19例截除肢體上的正常骨組織標(biāo)本. 結(jié)果 在37例骨肉瘤中,表達(dá)檢出率高的5個(gè)片段依次為:ZOL03為92.6%,1C82為89.4%,1C74為73.9%,2G12為66.5%,2A21為53.7%;在23例骨軟骨瘤中表達(dá)率依次為:ZOL03為6.5%,1C82為14.7%,1C74為8.3%,2G12為11.9%,2A21為12.2%;在29例骨巨細(xì)胞瘤中表達(dá)率依次為:ZOL03為8.3%,1C82為15.6%,1C74為12.5%,2G12為13.8%,2A21為5.4%;在16例軟骨肉瘤中表達(dá)率依次為:ZOL03為9.4%,1C82為14.3%,1C74為7.5%,2G12為6.8%,2A21為6.2%;在19例正常骨組織標(biāo)本中表達(dá)率依次為:ZOL03為0,1C82為6.4%,1C74為0,2G12為4.8%,2A21為3.9%;這5個(gè)基因片段檢出率在骨肉瘤與其他骨腫瘤中存在顯著差異(P

Keywords:osteosarcoma;differential expressed gene;RT-PCR;gene expression

Abstract:AIM To screen several genes differentially ex-pressed in human osteosarcoma with higher examination rates and discuss its clinical significance.METHODS By using ZOL03,1C82,1C74,2G12and2A21as research targets,37specimens of human osteosarcoma and68specimens of other musculoskeletal tumors as well as19specimens were screened by quantitative RT-PCR.RESULTS In37speci-mens of osteosarcoma,percentages of the5fragments with higher examination rate were92.6%(ZOL03),89.4%(1C82),73.9%(1C74),66.5%(2G12)and53.7%(2A21)sequentially.In23specimens of osteochondroma,percent-ages of the5fragments with higher examination rate were6.5%(ZOL03),14.7%(1C82),8.3%(1C74),11.9%(2G12)and12.2%(2A21)respectively.In29specimens of giant cell tumor of bone,the percentages of the5fragments in turn were8.3%(ZOL03),15.6%(1C82),12.5%(1C74),13.8%(2G12)and5.4%(2A21).In16specimens of chondrosarcoma,the percentages in succession were9.4%(ZOL03),14.3%(1C82),7.5%(1C74),6.8%(2G12)and6.2%(2A21).The expression rates of the5fragments between osteosarcoma and other musculoskeletal tumors were significantly different(P

0 引言

骨肉瘤單純手術(shù)治療后復(fù)發(fā)率較高.ZOL03,1C82,1C74,2G12及2A21是我們采用差異展示PCR(DD-PCR)技術(shù)從人骨肉瘤組織與正常骨組織之間篩選出的差異表達(dá)基因片段,通過對(duì)收集的骨肉瘤、其他骨腫瘤及正常骨組織標(biāo)本進(jìn)行定量RT-PCR檢測,擬篩選出在骨肉瘤組織中檢出率高的差異表達(dá)基因片段,為建立骨肉瘤的基因診斷方法打下基

1 材料和方法

1.1 材料 ①標(biāo)本:骨肉瘤手術(shù)標(biāo)本37例;其他骨腫瘤手術(shù)標(biāo)本68例,其中23例為骨軟骨瘤,29例為骨巨細(xì)胞瘤,16例為軟骨肉瘤;截除肢體上的正常骨組織標(biāo)本19例.所有標(biāo)本均采集于唐都醫(yī)院全軍骨科中心/全軍骨腫瘤研究所,所有標(biāo)本均經(jīng)病理HE染色確診.②引物:PCR引物由蘇海川博士與李丁碩士共同設(shè)計(jì),上海生物工程公司合成.③試劑:MMLV反轉(zhuǎn)錄酶購自Promega公司,PE5700型PCR擴(kuò)增儀由美國PE公司提供,其他試劑均由第四軍醫(yī)大學(xué)全軍基因診斷技術(shù)研究所提供.

1.2 方法 所有標(biāo)本獲取后,立即投入液氮中保存.采用Promega公司PolyATtractR System1000試劑盒快速提取標(biāo)本組織中的mRNA,經(jīng)紫外掃描定量后稀釋成0.1g?L-1 ,立即進(jìn)行mRNA反轉(zhuǎn)錄:以oligo(dT)18為起始引物,依次加入無RNase的三蒸水10.4μL,5×Buffer4.0μL,dNTP(250μmol?L-1 )1.6μL,mRNA(0.1g?L-1 )1.0μL,oligo(dT)18引物2.0μL;反應(yīng)條件為:65℃5min,37℃60min,75℃5min,MMLV反轉(zhuǎn)錄酶(200mU?L-1 )在37℃10min時(shí)加入.取反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物2μL作為模板,依次加入:10×PCR Buffer3μL,2.5mmol?L-1 dNTPs3μL,上游引物各1μL(10pmol),下游引物各1μL(10pmol),ddH2 O10μL,混合后加入2.5U Taq酶;PCR循環(huán)條件為:94℃36s,55℃1min,72℃35s,35個(gè)循環(huán),最后在72℃條件下延伸7min.在同一條件下,每次PCR以β-actin作內(nèi)對(duì)照,以克隆質(zhì)粒作陽性對(duì)照.PCR產(chǎn)物進(jìn)行10g?L-1 瓊脂糖電泳20min后,在GQS-9600型基因定量分析系統(tǒng)中掃描攝入電泳圖像后,對(duì)特征性條帶進(jìn)行吸光度掃描[2] ,將產(chǎn)物吸光度/對(duì)照產(chǎn)物吸光度比值進(jìn)行成對(duì)資料統(tǒng)計(jì)學(xué)處理.

2 結(jié)果

2.1 差異表達(dá)基因片段在骨肉瘤中表達(dá) 在37例骨肉瘤標(biāo)本中,表達(dá)檢出率高的5個(gè)基因片段依次為:ZOL03的高表達(dá)率為92.6%,1C82高表達(dá)率為89.4%,1C74高表達(dá)率為73.9%,2G12高表達(dá)率為66.5%,2A21高表達(dá)率為53.7%.總體來看,這5個(gè)基因片段在骨肉瘤組織中的表達(dá)率較高,它們的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果如Fig1.

2.2 差異表達(dá)基因片段在其他骨腫瘤標(biāo)本中表達(dá) 在23例骨軟骨瘤中表達(dá)率依次為:ZOL03表達(dá)率為6.5%,1C82表達(dá)率為14.7%,1C74表達(dá)率為8.3%, 2G12表達(dá)率為11.9%,2A21表達(dá)率為12.2%.在29例骨巨細(xì)胞瘤中表達(dá)率依次為:ZOL03表達(dá)率為8.3%,1C82表達(dá)率為15.6%,1C74表達(dá)率為12.5%,2G12表達(dá)率為13.8%,2A21表達(dá)率為5.4%.在16例軟骨肉瘤中表達(dá)率依次為:ZOL03表達(dá)率為9.4%,1C82表達(dá)率為14.3%,1C74表達(dá)率為7.5%,2G12表達(dá)率為6.8%,2A21表達(dá)率為6.2%.該5個(gè)差異表達(dá)基因片段在其他骨組織腫瘤中的表達(dá)率都較低.

圖1 5個(gè)差異表達(dá)基因片段擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果 略

2.3 差異表達(dá)基因片段在正常骨組織標(biāo)本中表達(dá) 在19例正常骨組織標(biāo)本中,5個(gè)基因片段的表達(dá)率依次為:ZOL03的表達(dá)率為0,1C82的表達(dá)率為6.4%,1C74的表達(dá)率為0,2G12的表達(dá)率為4.8%,2A21的表達(dá)率為3.9%.這5個(gè)差異表達(dá)基因片段在正常骨組織中的表達(dá)率都很低或不表達(dá).

將產(chǎn)物吸光度/對(duì)照產(chǎn)物吸光度的比值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理后,發(fā)現(xiàn)這5個(gè)基因片段檢出率在骨肉瘤組織標(biāo)本與其他骨腫瘤組織標(biāo)本中存在顯著差異(P

3 討論

人們發(fā)現(xiàn)骨肉瘤與多種癌基因相關(guān),且與抗癌基因的失活有關(guān)[2] ,這些基因的改變以及表達(dá)的變化決定了骨肉瘤的生物學(xué)與臨床行為;這些基因在骨肉瘤發(fā)生發(fā)展過程中出現(xiàn)的時(shí)間不同、變化不同、意義不同,多基因多表達(dá)的檢測對(duì)于骨肉瘤的早期診斷、鑒別診斷以及惡性程度的判斷均具有重要意義.目前已闡明了一些基因與骨肉瘤的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)聯(lián)[3-5] .我們?cè)谝郧暗墓ぷ髦?,獲得了123個(gè)骨肉瘤差異表達(dá)基因片段,從中找出了11個(gè)同源性很低的序列,其中2個(gè)序列被GenBank收錄.我們根據(jù)所獲得的序列設(shè)計(jì)了11對(duì)引物,運(yùn)用定量PCR技術(shù)對(duì)收集的多個(gè)骨肉瘤組織標(biāo)本進(jìn)行了表達(dá)水平的檢測,篩選出了表達(dá)水平高的5個(gè)基因片段;此5個(gè)基因片段在其他骨腫瘤標(biāo)本及正常骨組織標(biāo)本中的檢出率很低,與在骨肉瘤組織標(biāo)本中的表達(dá)率存在顯著差異(P

參考文獻(xiàn)

[1]Cui DX,Yan XJ,Zhang L,Zhao JR,Jiang M,Guo YH,Zhang LX,Bai XP,Su CZ.Screening and its clinical significance of6 fragments of highly expressing genes in gastric cancer and pre-cancerous mucosa [J].Shijie Huaren Xiaohua Zazhi(World Chin J Digestol),1999;7(9):770-772.

[2]Li LZ,Wang YJ,Li Y,Li ZY.Clinical significance of expres-sion of tumor suppressor genes and proliferative activity in os-teosarcoma [J].J Clin Orthop,1999;2(3):164-166.

[3]Cui DX,Yan XJ,F(xiàn)an QY,Su CZ,Ji CH.Studies on relation-ship between musculoskeletal neoplasm and oncogene mdm2metastastis suppressor gene nm23-H1[J].Di-si Junyi Daxue Xuebao(J Fourth Mil Med Univ),1997;18(1):20-23.

大人不及格范文第5篇

如果一個(gè)人突然消失般的不見了,不要覺得驚訝。不要認(rèn)為他只是在忙?;蛘呤浅隽耸裁词?。不要再擔(dān)心他了。因?yàn)樵谶@個(gè)時(shí)候他已經(jīng)選擇離開了你。他不聯(lián)系你,是因?yàn)樗麤Q心要走了,要離開你了。

不要覺得這個(gè)是自己的過錯(cuò),其實(shí)不是的,愛情本來就是兩情相悅。單方面的付出,單方面的改變,單方面的感情支撐是不會(huì)堅(jiān)持多久的。不管他曾經(jīng)說過他有多么的愛你。不管他曾經(jīng)是不是曾經(jīng)說過他會(huì)照顧你一輩子。都請(qǐng)你忘了吧。因?yàn)槟侵皇敲利惖闹e言。他給你的只是一段美麗的夢。當(dāng)你醒過來后,你真的應(yīng)該自己好好的去面對(duì)接下來的生活。因?yàn)?,在這個(gè)時(shí)候,你身邊只有你自己了。不再是兩個(gè)人了。不再是遇到什么心煩的事情,不順心的事情,不開心了都會(huì)有個(gè)人立刻來找你,立刻來跟你談心。立刻來安慰你。你要學(xué)會(huì)自己獨(dú)當(dāng)一面的面對(duì)一切的事情。不管你有多么多的朋友,親人。你都要明白一點(diǎn),“他們不可能永遠(yuǎn)的陪著你。他們終有一天會(huì)老去,會(huì)死去,你也將會(huì)有一天會(huì)失去他們。”

所以,靠人還不如靠己。悲傷的時(shí)候自己找個(gè)地方哭一場,哭完之后擦干眼淚重新出發(fā)。遇到困難的時(shí)候,努力的想辦法解決,不再依靠別人來幫你解決一切。感情里沒有誰離不開誰。只是誰還沒有放下誰。我相信,給自己多一點(diǎn)時(shí)間,你一定可以從黑暗中走出來。不管你摔過多少次,你都要勇敢的站起來。告訴自己你可以。不要因?yàn)橐豢脴涠艞壛苏帧?/p>

如果他陪不了你走到最后,只能說明一點(diǎn),他只是一個(gè)過客。你的幸福還沒到。所以你需要繼續(xù)尋找,不能停下奔跑的腳步。只要你不認(rèn)輸,你不停下來。就沒有輸。就還沒有希望!收拾心情,努力的站起來。樂觀的面對(duì)你自己的生活。不管怎么樣,我想屬于你的“Mr. right”肯定會(huì)在很多人的身后等著你。

因?yàn)樯罹褪沁@樣,你需要不斷的跌倒,不斷的尋找,不斷地探索。才會(huì)找到最后屬于自己的真實(shí)答案!

相關(guān)期刊更多

南方文學(xué)

省級(jí)期刊 審核時(shí)間1個(gè)月內(nèi)

中共桂林市委員會(huì)

金山

省級(jí)期刊 審核時(shí)間1個(gè)月內(nèi)

中共鎮(zhèn)江市委宣傳部

黨史博覽

省級(jí)期刊 審核時(shí)間1個(gè)月內(nèi)

中共河南省委黨史研究室