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平安夜在80年代流傳到中國(guó)以后就加入了中國(guó)的傳統(tǒng)色彩,只有在中國(guó)才會(huì)送蘋果,因?yàn)橹袊?guó)人不想要完全的效仿西方的國(guó)家,所以在平安夜就加入了自己國(guó)家的傳統(tǒng)元素,下面是小編為大家收集的關(guān)于平安夜送蘋果的層數(shù)的意義2021。希望可以幫助大家。
平安夜送蘋果的層數(shù)的意義是什么一層是一心一意
兩層是比翼雙飛
十一層是一心一意
三十一層是祝你幸福
五十二層是用遠(yuǎn)愛(ài)你
一百層是永不變心
但一般送別人一般不可能別人還一層一層的數(shù),好看心意到就行。
送蘋果的來(lái)源1.從中國(guó)的大學(xué)生中開(kāi)始流傳的。
時(shí)間大約是80年代中期的時(shí)候,地點(diǎn)是廣州和武漢。這些人是當(dāng)時(shí)的天之驕子,他們有這樣的學(xué)習(xí)機(jī)會(huì),接觸了部份的外國(guó)留學(xué)生,外籍教師,了解一些外國(guó)的文化傳統(tǒng)。
于是他們也過(guò)起了圣誕這個(gè)節(jié),但是他們把圣誕節(jié)理解為外國(guó)人的新年,他們?cè)谶@個(gè)節(jié)日里添加了中國(guó)的傳統(tǒng)元素,平安夜吃蘋果取意平平安安的意思。版本也有很多個(gè),有說(shuō)要向24個(gè)不同姓氏的人要24個(gè)蘋果。有說(shuō)要去24個(gè)不同的地方買24個(gè)蘋果。有說(shuō)要6個(gè)蘋果,其中3個(gè)紅的,3個(gè)青的。等等……
2.從港澳臺(tái)的留學(xué)生中傳過(guò)來(lái)的。
時(shí)間大約是80年代的初期,地點(diǎn)是廣州和廈門,當(dāng)時(shí)改革開(kāi)放剛剛才開(kāi)始,從港澳臺(tái)來(lái)的留學(xué)生并不是很多,中國(guó)社會(huì)的物資也不是很多,他們中的部份人有過(guò)圣誕節(jié)的習(xí)慣,但沒(méi)有火雞,也沒(méi)有圣誕大餐,有錢也買不到些什么東西。12月市面上只有蘋果這種水果賣,于是他們就開(kāi)始吃蘋果慶祝。寓意著在新的一年中,平平安安。
3.從賣蘋果的小販中開(kāi)始流傳的。
時(shí)間不清楚有說(shuō)是90年代中期,地點(diǎn)基本上遍布全中國(guó),原因是外來(lái)的水果大量流入中國(guó)市場(chǎng),價(jià)格非常的便宜,本土生產(chǎn)的蘋果泄銷,于是販賣蘋果的商人就借平安夜賣蘋果。于是這個(gè)平安夜吃蘋果的中國(guó)傳統(tǒng)在這個(gè)時(shí)候就正式產(chǎn)生。
平安夜的由來(lái)圣誕節(jié)前夕也就是大家通常說(shuō)的平安夜,當(dāng)晚,全家人會(huì)團(tuán)聚在家里的客廳中,圍繞在圣誕樹(shù)旁唱圣誕歌曲,彼此相互交換禮物,彼此分享一年來(lái)生活中的喜怒哀樂(lè),表達(dá)自己內(nèi)心的祝福和愛(ài)。
在這天晚上都會(huì)看到一群可愛(ài)的小男生或者是小女生,手拿詩(shī)歌彈著吉他,一家一家的唱著詩(shī)歌報(bào)佳音。到底佳音隊(duì)這種節(jié)日活動(dòng)是怎養(yǎng)來(lái)的呢?
__誕生的那一晚,在曠野看守羊群的牧羊人,突然聽(tīng)見(jiàn)有聲音從天上傳來(lái),向他們報(bào)__降生的好消息。根據(jù)圣經(jīng)記載,__來(lái)是要做天下的王,因此天使便透過(guò)這些牧羊人把消息傳給更多的人讓他們都知道這件事情。
后來(lái)人們就效仿天使,在平安夜的時(shí)候晚上到處報(bào)人傳講__降生的消息,直到現(xiàn)在,報(bào)佳音已經(jīng)變成圣誕節(jié)中一個(gè)不會(huì)可或缺的節(jié)目了。
通常佳音隊(duì)是由大約20名青年人,加上一備裝扮成天使的小女孩和一位圣誕老人組成。在平安夜晚上大約是21點(diǎn)過(guò)后,開(kāi)始一家一家的去報(bào)佳音。每當(dāng)佳音隊(duì)去到一個(gè)家庭的時(shí)候,先會(huì)唱幾首大家都熟悉的圣誕歌曲,然后再由小女孩念出圣經(jīng)的話語(yǔ)讓該戶人家知道今是__降生的日子,過(guò)后大家一起禱告再唱一兩首詩(shī)歌,再由慷慨大方的圣誕老人派送圣誕禮物給那個(gè)家庭中的小廳子,整個(gè)報(bào)佳音的過(guò)程就這樣完成了!
整個(gè)報(bào)佳音的活動(dòng)大約要持續(xù)到第二天凌晨4點(diǎn)左右才能夠結(jié)束。
平安夜的另一個(gè)意思平安夜(Silent Night),即圣誕前夕(Christmas Eve,12月24日),在大部分西方國(guó)家是圣誕節(jié)的一部分,但現(xiàn)在,由于中西文化的融合,已成為世界性的一個(gè)節(jié)日。
平安夜是在每年陽(yáng)歷的12月24日晚上,有著圣誕夜的寓意,平安夜也用來(lái)表示圣誕節(jié)的前一天,在西方的傳統(tǒng)中,一般在平安夜這一天才開(kāi)始裝扮圣誕樹(shù),但是現(xiàn)在不少的家庭很早就會(huì)開(kāi)始裝扮圣誕樹(shù)了。
現(xiàn)在因?yàn)橹形魑幕娜诤?,平安夜已成為世界性的一個(gè)節(jié)日了,并且在這天里也有很多的習(xí)俗需要去展現(xiàn),例如:互相交換禮物、報(bào)佳音、互贈(zèng)蘋果、會(huì)參與子夜彌撒或者是聚會(huì)。
平安夜送蘋果代表什么
平安夜(silent night),即圣誕前夕(christmas eve,12月24日),是大部分西方國(guó)家的節(jié)日之一,但現(xiàn)在,由于中西文化的融合,已成為世界性的一個(gè)節(jié)日。每年的12月24日,也就是圣誕節(jié)的前夕是求平安的夜晚。
平安夜這個(gè)習(xí)俗漸漸流傳進(jìn)中國(guó),圣誕節(jié)的前一天,被稱為平安夜。平安夜還沒(méi)到,一種叫做“平安果”的禮物,開(kāi)始在人們手中悄然傳遞。
據(jù)了解,“平安果”是用一個(gè)個(gè)色澤鮮艷、樣子好看的進(jìn)口蘋果裝扮而成的,多為紅蛇果、青蛇果,當(dāng)然也有把國(guó)產(chǎn)的紅富士蘋果包裝扮成“平安果”的。據(jù)說(shuō),“平安果”象征著平安、祥和之意,之所以把“蘋果”當(dāng)成“平安果”的首選,是取了“蘋果”的字音。
在平安夜這天互送蘋果,這是因?yàn)橹袊?guó)人比較注重諧音,比如洞房花燭夜,將紅棗、花生、桂子、瓜子等物擲于床上,意為“早生貴子”。蘋果的“平”與平安的“平”同音,于是中國(guó)人寓以蘋果“平安”的吉祥含義,于是就有了平安夜送蘋果的新習(xí)俗。
送蘋果即表示:送平安果的人向接受平安果的人祝福。而且平安夜收到的蘋果是必須要吃掉的,這樣才算是真正接受了他人的祝福,將在新的一年平平安安。
平安夜送蘋果的寓意是什么:
蘋果經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,并且寓意很好,所以在平安夜送的蘋果,可以稱之為“平安果”。據(jù)說(shuō)平安果象征著平安、祥和之意,之所以成為平安果,是取自蘋果的諧音,意味著平安吉祥,表達(dá)了一種祝愿之情,傳遞的是一種祝福,所以會(huì)有送蘋果的習(xí)慣。
在平安夜這天互送蘋果,這是因?yàn)橹袊?guó)人比較注重諧音,比如洞房花燭夜,將紅棗、花生、桂子、瓜子等物擲于床上,意為“早生貴子”。蘋果的“平”與平安的“平”同音,于是中國(guó)人寓以蘋果“平安”的吉祥含義,于是就有了平安夜送蘋果的新習(xí)俗。
送蘋果即表示:送平安果的人向接受平安果的人祝福!而且平安夜收到的蘋果是要吃掉的,這樣才算是真正接受了他人的祝福,并且將在新的一年平平安安!
最開(kāi)始的平安果:
據(jù)說(shuō)水果商裝扮“平安果”是受年輕人的啟發(fā)。開(kāi)始時(shí),有一些年輕人買一兩個(gè)進(jìn)口蘋果,然后拿到禮品店打上包裝,準(zhǔn)備在平安夜當(dāng)禮物送給好朋友,這一“商機(jī)”馬上被精明的商人捕捉到。
2、我把溫馨融入撩人的月光里,帶到你的床頭,讓美夢(mèng)圍繞你;我把甜蜜唱到頌歌里,傳遞到你的身邊,讓快樂(lè)纏上你;我把問(wèn)候?qū)懺诙绦爬?,傳送我最真摯的祝福,讓幸福陪伴你。平安夜里祝你一生幸福平?
3、我把祝福折成一只信鴿,飛到你窗前,不會(huì)再飛走;我把快樂(lè)折成一彎明月,照耀你窗前,永不離開(kāi);我再把幸福折成一縷陽(yáng)光,環(huán)繞你身邊,常駐不走,祝圣誕快樂(lè)。
4、我的情誼濃濃的:快圣誕了想著你;發(fā)條短信問(wèn)候你。我的關(guān)懷暖暖的:天寒了提醒你加衣;心煩了提醒你微笑。我的祝福真真的:平安夜安詳,圣誕節(jié)快樂(lè)!
5、送你一個(gè)鐘,可以敲響平安的鐘,送你一棵樹(shù),可以樹(shù)起健康的樹(shù),送你一條短信,可以帶給你祝福的短信:祝你平安夜快樂(lè),圣誕節(jié)快樂(lè)!
6、送你一個(gè)平安鐘,愿你敲響一生的平安;送你一棵圣誕樹(shù),愿你樹(shù)起一生的健康;送你一條短信,愿你翻開(kāi)一生的幸福。平安夜快樂(lè),圣誕節(jié)快樂(lè)!
7、生活漫步行,幸福踏月還,人在旅途盼驛站,轉(zhuǎn)眼一三年;風(fēng)雨逍遙過(guò),人生瀟灑看,歲月只等閑。寒暑天地間,煩惱莫在心羈絆,一滴祝福暖心坎。元旦來(lái)臨,愿你幸福斗轉(zhuǎn)星移永不變,快樂(lè)步履平穩(wěn),好運(yùn)滿滿園。
8、圣誕到了,祝您的身體像圣誕老人一樣健康,事業(yè)像雪橇車一樣沒(méi)有阻力,鈔票像圣誕老人包袱里的禮物一樣無(wú)窮無(wú)盡!
[論文摘要]績(jī)效管理系統(tǒng)在企業(yè)制訂戰(zhàn)略、評(píng)估目標(biāo)和評(píng)價(jià)管理層業(yè)績(jī)等方面起著關(guān)鍵性的作用。本文以平衡計(jì)分卡理論為基礎(chǔ),結(jié)合案例對(duì)基于平衡計(jì)分卡的國(guó)有商業(yè)銀行績(jī)效考評(píng)體系的理論設(shè)想與實(shí)踐進(jìn)行探討,就進(jìn)一步完善國(guó)有商業(yè)銀行績(jī)效管理系統(tǒng)提出建議。
一、基于平衡計(jì)分卡的國(guó)有商業(yè)銀行績(jī)效考評(píng)體系理論設(shè)想
(一)全面性原則。一是在戰(zhàn)略制定的過(guò)程中,要充分發(fā)揮集體智慧,調(diào)動(dòng)各個(gè)層面員工的積極性和參與意識(shí),確保戰(zhàn)略在組織內(nèi)部得到廣泛認(rèn)同;二是指標(biāo)設(shè)置要涵蓋財(cái)務(wù)、客戶、內(nèi)部經(jīng)營(yíng)流程和學(xué)習(xí)/成長(zhǎng)等四個(gè)方面,然后通過(guò)這四個(gè)基礎(chǔ)指標(biāo)分解延伸,構(gòu)建二級(jí)、三級(jí)分指標(biāo),逐步分解戰(zhàn)略目標(biāo),全面體現(xiàn)總體戰(zhàn)略要求;三是在指標(biāo)分解設(shè)置的過(guò)程中,組織內(nèi)部各個(gè)層次的人員也都要參與到相應(yīng)層次的指標(biāo)設(shè)置中,通過(guò)全員的參與、學(xué)習(xí)和反饋,不斷修正指標(biāo)和目標(biāo)值,力求指標(biāo)體系的科學(xué)合理。
(二)因果性原則。要沿著學(xué)習(xí)/成長(zhǎng)——內(nèi)部經(jīng)營(yíng)流程——客戶——財(cái)務(wù)之間的因果鏈條,逐級(jí)設(shè)置指標(biāo),注意分析不同指標(biāo)之間的因果聯(lián)系。指標(biāo)體系建立以后,可以通過(guò)因果鏈條分析指標(biāo)設(shè)置的合理性。
(三)適應(yīng)性原則。在構(gòu)建平衡計(jì)分卡體系的過(guò)程中,一要注意適應(yīng)組織的戰(zhàn)略部署,體現(xiàn)組織的戰(zhàn)略意圖;二要與現(xiàn)有的組織結(jié)構(gòu)和業(yè)務(wù)流程相適應(yīng),有助于業(yè)務(wù)的順利開(kāi)展和辦理;三要適應(yīng)內(nèi)外環(huán)境的變化,不斷調(diào)整指標(biāo),提高平衡計(jì)分卡的適應(yīng)性。
(四)動(dòng)態(tài)性原則。平衡計(jì)分卡的構(gòu)建和實(shí)施不是一勞永逸、一蹴而就的,需要組織內(nèi)部各層次的管理者和一線員工在實(shí)施過(guò)程中,不斷地反饋、溝通,管理層要定期對(duì)各種數(shù)據(jù)、指標(biāo)、信息進(jìn)行收集、分析和研究,適時(shí)對(duì)組織結(jié)構(gòu)、業(yè)務(wù)流程、指標(biāo)體系乃至企業(yè)文化進(jìn)行調(diào)整,最大限度地發(fā)揮平衡計(jì)分卡的功效,實(shí)現(xiàn)組織的戰(zhàn)略目標(biāo)。
二、基于平衡計(jì)分卡的國(guó)有商業(yè)銀行績(jī)效考評(píng)體系案例分析
(一)該機(jī)構(gòu)的基本情況。理財(cái)中心共有員工10人,其中分理處主任1人,會(huì)計(jì)2人,柜員7人。主要辦理人民幣、外幣存款、個(gè)人匯款、保險(xiǎn)、基金、代收社保、水電氣等業(yè)務(wù)。
(二)戰(zhàn)略制定。通過(guò)深入細(xì)致的調(diào)查,支行認(rèn)為個(gè)人理財(cái)中心要實(shí)施差別化服務(wù),細(xì)分市場(chǎng),確定目標(biāo)客戶,通過(guò)高附加值、個(gè)性化、多樣化服務(wù)增加客戶交易,提高收入,成為一個(gè)利潤(rùn)中心。
(三)指標(biāo)設(shè)置。依照平衡計(jì)分卡四個(gè)方面的觀點(diǎn),從財(cái)務(wù)、客戶、內(nèi)部經(jīng)營(yíng)流程和學(xué)習(xí)與創(chuàng)新層面設(shè)置對(duì)個(gè)人理財(cái)中心的考核指標(biāo)體系。
(四)指標(biāo)分解落實(shí)?;趥€(gè)人理財(cái)中心整體平衡計(jì)分卡框架設(shè)置及考核指標(biāo),依照理財(cái)中心內(nèi)部不同崗位職責(zé)要求,設(shè)置了針對(duì)大堂經(jīng)理、理財(cái)客戶經(jīng)理(內(nèi)勤)、營(yíng)銷客戶經(jīng)理(外勤)、現(xiàn)金柜員及非現(xiàn)金柜員的平衡計(jì)分卡。
1.大堂經(jīng)理。依據(jù)大堂經(jīng)理的崗位職責(zé)。對(duì)其績(jī)效考核主要側(cè)重以下幾個(gè)方面:(1)優(yōu)質(zhì)客戶的識(shí)別與引導(dǎo);(2)客戶分流與疏導(dǎo);(3)針對(duì)普通客戶的營(yíng)銷。
2.營(yíng)銷客戶經(jīng)理(內(nèi)勤)。依據(jù)客戶經(jīng)理的崗位職責(zé),對(duì)其績(jī)效考核主要側(cè)重以下幾個(gè)方面:(1)理財(cái)產(chǎn)品營(yíng)銷;(2)優(yōu)質(zhì)客戶關(guān)系維護(hù)。
3.營(yíng)銷客戶經(jīng)理(外勤)。依據(jù)客戶經(jīng)理的崗位職責(zé),對(duì)其績(jī)效考核主要側(cè)重以下幾個(gè)方面:(1)新客戶開(kāi)發(fā);(2)產(chǎn)品營(yíng)銷。
4.現(xiàn)金柜員。依據(jù)現(xiàn)金柜員的崗位職責(zé),對(duì)其績(jī)效考核主要側(cè)重以下幾個(gè)方面:(1)柜面業(yè)務(wù)處理;(2)識(shí)別優(yōu)質(zhì)客戶:推介投資類產(chǎn)品;(3)普通客戶分流:渠道分流類產(chǎn)品的營(yíng)銷。
5.非現(xiàn)金柜員。依據(jù)非現(xiàn)金柜員的崗位職責(zé),對(duì)其績(jī)效考核主要側(cè)重以下幾個(gè)方面:(1)非現(xiàn)金業(yè)務(wù)處理;(2)銀行產(chǎn)品及投資類產(chǎn)品的銷售;(3)優(yōu)質(zhì)客戶識(shí)別推介。
不過(guò)建立平衡計(jì)分卡也涉及到各方面的因素,要全面實(shí)施平衡計(jì)分卡業(yè)績(jī)?cè)u(píng)價(jià)體系必然會(huì)是一個(gè)長(zhǎng)期而復(fù)雜的過(guò)程。筆者認(rèn)為還有幾個(gè)問(wèn)題需要繼續(xù)探索和研究。
1.找準(zhǔn)平衡計(jì)分卡與國(guó)有商業(yè)銀行的切人點(diǎn)。國(guó)有商業(yè)銀行實(shí)施平衡計(jì)分卡業(yè)績(jī)?cè)u(píng)價(jià)體系,到底是應(yīng)該全面推進(jìn)還是先期試點(diǎn)。是應(yīng)該自上而下還是先從基層鋪開(kāi),是分行實(shí)施好還是產(chǎn)品線實(shí)施合適,各家銀行都沒(méi)有一個(gè)定論。在實(shí)施中,一定要找準(zhǔn)切入點(diǎn),通過(guò)一個(gè)獨(dú)立核算、規(guī)模適中、產(chǎn)品創(chuàng)新性強(qiáng)、面向客戶的機(jī)構(gòu)人手實(shí)施,可以確保整個(gè)工作平穩(wěn)推進(jìn),并且減少不必要的波動(dòng)。
2.客觀分析環(huán)境,建立實(shí)用的平衡計(jì)分卡系統(tǒng)。在實(shí)施中,要客觀分析當(dāng)?shù)丨h(huán)境,實(shí)事求是地建立相關(guān)的指標(biāo)體系,相應(yīng)改善內(nèi)部組織和業(yè)務(wù)流程。
3.調(diào)動(dòng)銀行全體員工積極參與和推動(dòng)項(xiàng)目實(shí)施。平衡計(jì)分卡的實(shí)施需要全員的參與,不能僅僅停留在高層。國(guó)有商業(yè)銀行在實(shí)施平衡計(jì)分卡的過(guò)程中,需要不斷地對(duì)績(jī)效結(jié)果進(jìn)行跟蹤反饋,從基層員工收集基礎(chǔ)信息。
關(guān)鍵詞:富士蘋果;山楂葉螨;二斑葉螨;蘋果全爪螨;細(xì)胞超微結(jié)構(gòu);游離脯氨酸
中圖分類號(hào):S661.103.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào):A文章編號(hào):1001-4942(2016)06-0036-06
山楂葉螨Tetranychus viennensis、二斑葉螨T. urticae和蘋果全爪螨Panonychus ulmi是為害蘋果葉片的3種重要害螨[1],廣泛分布于我國(guó)各蘋果產(chǎn)區(qū),造成葉片光合作用下降甚至提前落葉,抑制樹(shù)體生長(zhǎng)和花芽形成,給蘋果生產(chǎn)造成嚴(yán)重?fù)p失。
植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中常會(huì)遭遇不同逆境脅迫,逆境脅迫可分為生物、化學(xué)脅迫和物理脅迫3類,蟲(chóng)害脅迫屬于典型的生物脅迫[2]。植物被刺吸性害蟲(chóng)取食后,葉肉細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生生理、生化及形態(tài)結(jié)構(gòu)等一系列生物學(xué)變化。研究表明,褐飛虱Laodelphax striatellus為害水稻稻葉后,會(huì)引起葉片細(xì)胞質(zhì)壁分離、葉綠體異常發(fā)育、結(jié)構(gòu)松散,膜結(jié)構(gòu)最終溶解或斷裂[3,4]。梨網(wǎng)蝽Stephanitis nashi為害梨葉后,葉肉細(xì)胞中葉綠體膜被破壞,片層結(jié)構(gòu)排列松散,最終瓦解,個(gè)別細(xì)胞線粒體內(nèi)部嵴數(shù)目減少,基質(zhì)變稀薄,有些細(xì)胞葉綠體內(nèi)出現(xiàn)淀粉粒,嚴(yán)重時(shí)細(xì)胞凋亡,只剩殘片[5]。桔始葉螨Eotetranychus kankitus為害柑桔葉片后,導(dǎo)致葉片葉綠體膜缺損,淀粉粒異常膨大,基粒片層排列不規(guī)則,甚至消失,嗜鋨顆粒數(shù)目明顯增多[6]。朱砂葉螨T. cinnabarinus為害棉葉后,葉綠體膜逐漸溶解,基粒片層排列混亂,片層結(jié)構(gòu)消失,淀粉粒增多,有些細(xì)胞被完全破壞[7]。桑始葉螨Eotetranychus suginamensis為害桑葉后,葉綠體外被膜出現(xiàn)多處斷裂,基粒片層和基質(zhì)片層排列雜亂并產(chǎn)生較大空洞,細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)致密顆粒和膜狀物[8]。
植物體內(nèi)游離脯氨酸含量常作為評(píng)價(jià)植物抗逆性高低的一項(xiàng)生理指標(biāo)。菜豆葉片游離脯氨酸含量隨二斑葉螨為害時(shí)間延長(zhǎng)明顯增加[9]。番茄刺皮癭螨Aculops lycopersici為害后,番茄葉片游離脯氨酸含量急劇升高,并且隨為害時(shí)間延長(zhǎng)和接螨量增加而持續(xù)上升[10]。梨癭螨Eriophyes pyri和梨葉銹癭螨Epitrimerus pyri為害后,梨樹(shù)葉片游離脯氨酸含量明顯上升,并隨受害程度逐漸加重。游離脯氨酸含量升高主要集中在為害部位,同時(shí)也會(huì)引起受害部位周圍組織游離脯氨酸含量上升[11]。梨葉銹癭螨取食蘋果梨葉片引起的游離脯氨酸含量的變化與竇彩虹的研究結(jié)果相似[12]。臭椿被太行癭螨Aculops taihangensis為害后,葉片內(nèi)游離脯氨酸含量增加,反映出臭椿對(duì)太行癭螨的抵抗,但螨口數(shù)量的增長(zhǎng)會(huì)終止游離脯氨酸含量上升[13]。梅下毛癭螨Acalitus phloeocoptes為害杏樹(shù)嫩芽后,受害芽的游離脯氨酸含量最高上升69.44%[14]。
目前,關(guān)于蘋果葉片受到害螨為害后細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及游離脯氨酸含量變化的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。為此,本研究進(jìn)行了這方面的試驗(yàn),旨在為研究富士蘋果對(duì)害螨為害的響應(yīng)機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
1材料與方法
1.1試驗(yàn)材料
1.1.1供試樹(shù)網(wǎng)室內(nèi)的盆栽蘋果樹(shù),品種為短枝富士,樹(shù)齡3年。
1.1.2供試螨山楂葉螨、二斑葉螨和蘋果全爪螨均采自山東省泰安市郊區(qū)蘋果園。然后連續(xù)飼養(yǎng)于室內(nèi)盆栽海棠苗上,養(yǎng)蟲(chóng)室條件為溫度(26±1)℃,相對(duì)濕度(60±10)%,光周期12 L∶12 D。
1.2試驗(yàn)方法
1.2.1細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)觀察選擇健康盆栽蘋果苗,按10頭/葉的螨口密度分別將上述3種害螨的雌成螨接到不同植株的成熟葉片上,在葉柄處涂抹凡士林防止螨逃逸,每種害螨接2株樹(shù),重復(fù)3次,空白對(duì)照不接螨。
接螨6 d時(shí),分別剪取處理葉片及對(duì)照葉片。在葉片葉螨刺吸點(diǎn)處切取0.5 mm2小塊,迅速置于4%戊二醛溶液中進(jìn)行固定。用注射器抽氣3次,固定后用pH值為7.2的磷酸鹽緩沖液漂洗,然后用1%鋨酸固定,再用乙醇-丙醇梯度脫水。之后用Epon 812環(huán)氧樹(shù)脂滲透包埋,使用LKB-5型超薄切片機(jī)切片,醋酸鈾-檸檬酸鉛雙重染色,置于JEM-1200EX型透射電鏡下觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)并拍照。
1.2.2游離脯氨酸含量測(cè)定分別將山楂葉螨雌成螨按10、20、30 頭/葉3個(gè)螨口密度接到不同植株的成熟葉片上,每處理4株,重復(fù)3次,葉柄處涂抹凡士林防止螨逃逸。以不接螨處理做空白對(duì)照。分別在為害6、8、10 d時(shí)摘取各處理葉片,于-24℃低溫保存。
酸性茚三酮試劑:稱取茚三酮2.5 g,加入冰乙酸60 mL和6 mol/L磷酸40 mL,于70℃加熱溶解,冷卻后儲(chǔ)于棕色試劑瓶中,冰箱內(nèi)4℃保存。
稱取10 mg脯氨酸溶于少量80%乙醇溶液內(nèi),蒸餾水定容至100 mL,濃度為100 μg/mL。分別吸取0、0.5、1.25、2.5、5.0、7.5、10.0、15.0 mL放入50 mL容量瓶?jī)?nèi),蒸餾水定容,配成0、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、30.0 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)液。分別吸取各標(biāo)準(zhǔn)液2 mL、冰乙酸2 mL、茚三酮試劑2 mL放入10 mL帶塞刻度試管內(nèi),在沸水中放置15 min,取出后于520 nm光波處測(cè)定吸光值。以脯氨酸濃度為橫坐標(biāo),吸光值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
稱取蘋果葉片0.3 g,剪碎,加入適量80%乙醇液和少量石英砂研磨成漿,轉(zhuǎn)移至10 mL帶塞刻度試管內(nèi),用80%乙醇液洗滌殘?jiān)?,定容?0 mL,80℃水浴提取20 min。提取液中加入1勺人造沸石和適量活性炭,強(qiáng)烈振蕩5 min以去除干擾的氨基酸,過(guò)濾。
按照標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定方法對(duì)試樣進(jìn)行測(cè)定,每處理重復(fù)測(cè)定3次,利用標(biāo)準(zhǔn)曲線和游離脯氨酸含量計(jì)算公式計(jì)算游離脯氨酸含量,用Duncan’s新復(fù)極差檢驗(yàn)法進(jìn)行差異顯著性分析。
脯氨酸含量(μg/gFW)=X×VFW
式中,X為根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)線算得的樣品濃度值(μg/mL),V為樣品液總體積(mL),F(xiàn)W為樣品鮮重(g)。
2結(jié)果與分析
2.1蘋果葉片細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化
2.1.1正常葉片的細(xì)胞學(xué)特征正常蘋果葉片表皮和葉肉細(xì)胞呈長(zhǎng)方形,大小相近,細(xì)胞排列整齊,細(xì)胞質(zhì)中細(xì)胞器分布有序,細(xì)胞間隙明顯。細(xì)胞內(nèi)葉綠體數(shù)量較多,呈船形,緊貼細(xì)胞壁分布。細(xì)胞核呈長(zhǎng)橢圓形,核仁和核膜清晰可見(jiàn)。細(xì)胞膜和細(xì)胞壁完整,相鄰細(xì)胞壁界限明顯(圖1)。
2.1.2山楂葉螨為害葉片的細(xì)胞學(xué)特征山楂葉螨刺吸為害蘋果葉片6 d,葉肉細(xì)胞嚴(yán)重變形,細(xì)胞間隙變大,細(xì)胞器散亂于細(xì)胞質(zhì)內(nèi),細(xì)胞內(nèi)容物溢出,有些細(xì)胞僅在細(xì)胞壁周圍殘存一些碎屑,幾乎成為空胞(圖2A、E)。葉綠體內(nèi)出現(xiàn)淀粉粒,腫脹趨于圓球狀,甚至葉綠體膜消失,葉綠體溶解散亂在細(xì)胞質(zhì)中(圖2A、B)。細(xì)胞核被其他細(xì)胞器擠壓變形,細(xì)胞膜逐漸消失,細(xì)胞核解體(圖2C)。細(xì)胞壁分解斷裂,相鄰細(xì)胞壁界限逐漸模糊,最終消失形成空胞(圖2B、C、D、E),甚至緊鄰柵欄組織的上表皮細(xì)胞壁也分解斷裂(圖2D),有些細(xì)胞壁上附著針狀結(jié)晶沉淀物(圖2F)。
2.1.3二斑葉螨為害葉片的細(xì)胞學(xué)特征二斑葉螨為害6 d,蘋果葉片細(xì)胞受到不同程度破壞,細(xì)胞質(zhì)減少,細(xì)胞間隙增大,葉綠體縮短膨脹變形,葉綠體中可見(jiàn)大量淀粉粒存在,細(xì)胞核核膜界限不清(圖3A),受害嚴(yán)重的細(xì)胞幾乎完全被破壞,細(xì)胞器降解甚至消失,細(xì)胞壁溶解斷裂,彎曲變形,細(xì)胞器殘?jiān)庖绲郊?xì)胞間隙內(nèi)(圖3A、B、C)。
2.1.4蘋果全爪螨為害葉片的細(xì)胞學(xué)特征蘋果全爪螨為害6 d,蘋果葉肉細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生巨大變化,葉綠體由長(zhǎng)橢圓形變?yōu)榻鼒A形,其內(nèi)有淀粉粒沉積,受害嚴(yán)重的細(xì)胞結(jié)構(gòu)幾乎完全被破壞,細(xì)胞器只剩殘?jiān)蛳?,只剩?xì)胞壁殘余框架(圖4A)。細(xì)胞壁界限趨于模糊,細(xì)胞器殘余物從細(xì)胞壁缺口處溢出細(xì)胞(圖4B、C)。
2.2葉片內(nèi)游離脯氨酸含量變化
2.2.1游離脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線經(jīng)過(guò)Microsoft Excel分析確定,脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)回歸方程為Y=0.0365X-0.0237,R2=0.9964。其中Y為520 nm的吸光值,X為脯氨酸濃度(μg/mL)。
2.2.2山楂葉螨為害對(duì)蘋果葉片游離脯氨酸含量的影響從表1可知,與對(duì)照葉片相比,在山楂葉螨為害期內(nèi),蘋果葉片中的游離脯氨酸含量發(fā)生明顯變化。為害6 d時(shí),受害葉片內(nèi)游離脯氨酸含量隨螨口密度的增加而上升,顯著高于對(duì)照的游離脯氨酸含量。但為害8、10 d時(shí),脯氨酸含量隨螨口密度的增加而降低。
山楂葉螨螨口密度較低時(shí)(10 頭/葉),葉片中游離脯氨酸含量隨為害時(shí)間延長(zhǎng)持續(xù)升高,為害10 d的含量最高,是對(duì)照葉片含量的1.79倍。隨著螨口密度的增加,游離脯氨酸含量隨為害時(shí)間延長(zhǎng)下降,為害8、10 d時(shí),30 頭/葉含量低于對(duì)照葉片。
3討論與結(jié)論
葉螨為害可對(duì)植物產(chǎn)生諸多影響,如葉綠素含量[15,16],糖類和礦物質(zhì)元素含量[15,17,18],蛋白質(zhì)、氨基酸含量[9,17],抗氧化酶活性[9,19],蛋白酶抑制劑活性[20,21],光合作用、蒸騰作用[15,22,23]等變化明顯,同時(shí),葉片細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)也會(huì)發(fā)生顯著變化[3,8]。葉綠體是植物完成光合作用的場(chǎng)所,其結(jié)構(gòu)完整是保證光合作用正常進(jìn)行的前提,而其對(duì)逆境脅迫比較敏感[24,25]。本研究結(jié)果表明,富士蘋果葉片葉肉細(xì)胞對(duì)3種害螨脅迫反應(yīng)敏感的細(xì)胞器均為葉綠體,受害后的葉綠體形狀發(fā)生改變,排列趨于混亂,內(nèi)部結(jié)構(gòu)被損壞。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),葉綠體是植物細(xì)胞中產(chǎn)生活性氧的重要場(chǎng)所之一[26]。在害螨脅迫下,植物會(huì)產(chǎn)生過(guò)多活性氧,造成細(xì)胞水平的氧傷害,葉綠體、線粒體等細(xì)胞器功能損害,DNA等其他生物大分子降解和失活,最終誘發(fā)細(xì)胞過(guò)敏性壞死[19,27]。
植物細(xì)胞內(nèi)的淀粉粒由光合作用產(chǎn)生,其運(yùn)輸一般以蔗糖-Pi形式進(jìn)行[28]。隨著害螨對(duì)葉肉細(xì)胞膜系統(tǒng)的破壞,光合作用產(chǎn)物輸送受阻,導(dǎo)致在葉綠體中積累大量淀粉粒。本研究在對(duì)山楂葉螨為害的富士蘋果葉片細(xì)胞進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)觀察時(shí),發(fā)現(xiàn)針狀結(jié)晶沉淀物,該類物質(zhì)可能在抵抗山楂葉螨刺吸脅迫中具有重要作用,是富士蘋果對(duì)山楂葉螨為害防衛(wèi)機(jī)制的一種表現(xiàn)形式。
游離脯氨酸作為植物體內(nèi)重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)之一,其含量高低與植物抗逆能力有關(guān)[29]。葉片中的游離脯氨酸含量與其相對(duì)含水量呈明顯負(fù)相關(guān)[30],其含量的增加是引起滲透勢(shì)下降的一個(gè)關(guān)鍵因素,有助于細(xì)胞或組織保持水分,維持蛋白質(zhì)、膜和亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。湯章城[31]和Hare等[32]研究顯示,逆境下植物體內(nèi)游離脯氨酸含量往往會(huì)升高。山楂葉螨為害初期,蘋果葉片細(xì)胞沒(méi)有受到嚴(yán)重破壞,會(huì)通過(guò)產(chǎn)生游離脯氨酸對(duì)抗葉螨,故葉片內(nèi)的游離脯氨酸含量上升,這也說(shuō)明蘋果葉片能夠通過(guò)游離脯氨酸的累積避免細(xì)胞受到滲透脅迫的傷害。隨著山楂葉螨數(shù)量增加和為害程度加重,當(dāng)超過(guò)蘋果葉片所承受的范圍時(shí),蘋果葉片滲透調(diào)節(jié)機(jī)制失效,游離脯氨酸含量下降,甚至低于對(duì)照。
本研究只做了3種蘋果害螨在10 頭/葉下為害6 d對(duì)富士蘋果葉片細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響,不同為害時(shí)間及不同蘋果品種在不同葉螨為害下的細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化情況仍待進(jìn)一步研究。前人研究發(fā)現(xiàn)脯氨酸能夠參與植物葉綠素合成[31],其含量的變化是否有利于蘋果葉片通過(guò)光合作用對(duì)螨害進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)償值得進(jìn)一步研究。
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