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機(jī)關(guān)學(xué)習(xí)制度范文第1篇

關(guān)鍵詞:大學(xué)生;基督教;信仰;背景;意義;方法

中圖分類號(hào):G941文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1003-2851(2009)10-0075-01

一、研究問題的提出

近年來,大學(xué)生信仰基督教現(xiàn)象引起社會(huì)關(guān)注。大學(xué)生為何成為基督徒,及這一現(xiàn)象對(duì)大學(xué)成績的影響是本文力圖研究的主要問題。在傳統(tǒng)的觀念中,對(duì)于中國民眾的信教現(xiàn)象存在認(rèn)識(shí)上的誤區(qū),認(rèn)為在中國沒有純粹的,所謂信教是出于功利心態(tài)。這亦影響到人們對(duì)大學(xué)生信教現(xiàn)象的認(rèn)識(shí),例如將其劃入“思想政治問題”的范疇。事實(shí)上大學(xué)生真正實(shí)現(xiàn)了基督徒的身份認(rèn)同,具有宗教情懷,更進(jìn)一步深入到在其生活中,努力面對(duì)生活和學(xué)習(xí),去實(shí)現(xiàn)信仰中所要求的“榮耀主”的信仰意義。本文志于對(duì)大學(xué)生在具有信仰之后成績的變化進(jìn)行研究。

二、研究背景

大學(xué)生信教的出現(xiàn)有其深刻的社會(huì)背景。近年來,中國信仰宗教的人數(shù)增多。1928年-2001年,我國可統(tǒng)計(jì)的天主教、基督教、伊斯蘭教信教人數(shù)從100多萬增加到600多萬,不能準(zhǔn)確統(tǒng)計(jì)的佛教、道教信教人數(shù)增加也在100多萬以上。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),中國現(xiàn)有各種宗教信徒一億多人.有調(diào)查顯示,我國宗教信徒中,70%-80%都是20世紀(jì)80年代以后入教的,其中青年信徒又占到30%左右。以山東某市為例,1991年,該市信教人數(shù)不過30人,且大多數(shù)是老教徒,而1998年底就增至3063人,原來70%一50%是中老年,現(xiàn)在60%以上是中青年,其中35歲以下的占30一40%。在新增青年教徒中,文化層次較高者有明顯上升趨勢。對(duì)山東某教堂信教青年?duì)顩r的調(diào)查顯示,大專以上學(xué)歷者占15%.對(duì)上海沐恩堂的調(diào)查表明,1996年參加初信栽培的人員共40名,其中大專以上的慕道友96名,占總數(shù)的22%.1997年上半年受洗的人中,35歲以下的占三分之一,他們都有較高的學(xué)歷。

三、文獻(xiàn)綜述

大學(xué)生作為青年中最敏感、最有條件和機(jī)會(huì)接觸各種社會(huì)意識(shí)形態(tài)的知識(shí)份子群體,也受到社會(huì)上“宗教熱”的影響。陳村富在對(duì)浙江基督徒長達(dá)九年的實(shí)證研究中發(fā)現(xiàn),中國目前正在崛起的信教群體正是以大學(xué)生等為代表的“知識(shí)精英”群體。1998年北京市教委人文社會(huì)科學(xué)“九五”項(xiàng)目“北京青年?duì)顩r調(diào)查及對(duì)策研究”顯示,北京市大學(xué)生中明確表示有的占13.4%;2000年,上海市教委重點(diǎn)課題“大學(xué)生深層次思想問題研究”顯示,上海市大學(xué)生中因各種原因而信教的合計(jì)為1.8%。稅國洪等人2002年對(duì)重慶四所高校大學(xué)生的宗教態(tài)度進(jìn)行大學(xué)生信仰宗教的相關(guān)調(diào)查研究顯示,有13.3%的大學(xué)生在問卷中表明自己具有。鄧國峰和龍妮娜2002年調(diào)查了廣西大學(xué)生宗教觀,在286名大學(xué)生中,信教的有46人,占17.2%。戴嘉寶對(duì)溫州醫(yī)學(xué)院、溫州大學(xué)和溫州師范學(xué)院的問卷調(diào)查統(tǒng)計(jì)(不含少數(shù)民族學(xué)生)顯示,17%的大學(xué)生有。綜合各地資料,對(duì)大學(xué)生中宗教信徒所占比例的估計(jì)最高在20%左右,最低在3%一4%之間。

四、研究意義

由于上述關(guān)于大學(xué)生基督徒人數(shù)統(tǒng)計(jì)存在著抽樣差異和統(tǒng)計(jì)方式的不同,導(dǎo)致了統(tǒng)計(jì)結(jié)果之間存在的差異較大,大學(xué)生信仰基督教的人數(shù)難以精準(zhǔn)。但是,從眾多數(shù)據(jù)中,可以得出:大學(xué)生中出現(xiàn)信教熱是個(gè)事實(shí)命題,并且引起了社會(huì)各界的關(guān)注,引起了各方面的新現(xiàn)象發(fā)生。然而,和社會(huì)關(guān)注度不相稱的是,以大學(xué)生基督徒為樣本的成績研究還不多見。這給本研究留下了探究的空間。與普通基督徒群體相比,大學(xué)生基督徒具有較高的學(xué)歷背景和認(rèn)知水平,這些因素是否造就了大學(xué)生基督徒群體的獨(dú)特性?大學(xué)生信教熱能否促進(jìn)其在大學(xué)學(xué)習(xí)成績的提高?他們作為基督徒身份,能否促進(jìn)與基督徒同學(xué)之間、基督徒與非基督徒之間有益交往?大學(xué)中的基督徒成績的提高與他們的信仰有關(guān)系嗎?如果有關(guān)系,那么相關(guān)性又有多大呢?還會(huì)受到其他何種因素的影響?這種因素是否和時(shí)代背景的變遷有關(guān)系?有怎樣的關(guān)系?這一現(xiàn)象又會(huì)對(duì)大學(xué)生的信仰產(chǎn)生怎樣的作用?這些耐人尋味的問題正是激發(fā)研究興趣的原動(dòng)力。

五、研究方法

機(jī)關(guān)學(xué)習(xí)制度范文第2篇

關(guān)鍵詞：網(wǎng)絡(luò)關(guān)系強(qiáng)度 組織學(xué)習(xí) 技術(shù)創(chuàng)新績效

一、引言

隨著全球經(jīng)濟(jì)的一體化和國際競爭的日趨復(fù)雜，技術(shù)創(chuàng)新己成為企業(yè)生存的條件、發(fā)展的基礎(chǔ)和提高競爭力的源泉與手段。它決定企業(yè)的業(yè)績和生存，對(duì)于高新技術(shù)企業(yè)而言，良好的技術(shù)創(chuàng)新效率是至關(guān)重要的。“嵌入性”理論認(rèn)為在相關(guān)的關(guān)系網(wǎng)絡(luò)中存在企業(yè)的技術(shù)創(chuàng)新活動(dòng)，因而網(wǎng)絡(luò)關(guān)系的特征就會(huì)對(duì)技術(shù)創(chuàng)新績效產(chǎn)生一定的影響。根據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，一些學(xué)者從不同的角度來研究了網(wǎng)絡(luò)關(guān)系對(duì)于技術(shù)創(chuàng)新績效的影響，同時(shí)提出了一些能有效提高技術(shù)創(chuàng)新績效的建議。Larson 等學(xué)者認(rèn)為與合作伙伴建立的強(qiáng)聯(lián)結(jié)能夠促進(jìn)信任與合作，進(jìn)而便利企業(yè)獲取更多精煉的、高質(zhì)量信息和默會(huì)知識(shí)，與技術(shù)創(chuàng)新績效正相關(guān)。Granovetter 等學(xué)者則從弱關(guān)系的信息優(yōu)勢入手，認(rèn)為弱關(guān)系通過提供異質(zhì)性的知識(shí)更有利于企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新。對(duì)于一個(gè)企業(yè)的生存而言，組織學(xué)習(xí)的價(jià)值是眾所周知的，雖然有的時(shí)候會(huì)出現(xiàn)越學(xué)越差的情形，但大多數(shù)情況下對(duì)于企業(yè)的發(fā)展還是起到積極的作用。因此，本文主要就是初步探討網(wǎng)絡(luò)關(guān)系強(qiáng)度、組織學(xué)習(xí)與技術(shù)創(chuàng)新績效的關(guān)系。

二、變量間理論關(guān)系分析

在對(duì)三組要素中兩兩之間關(guān)系的現(xiàn)有研究進(jìn)展及其相關(guān)結(jié)論進(jìn)行總結(jié)的基礎(chǔ)上， 構(gòu)建出三者之間的概念模型 （如圖）。

1.網(wǎng)絡(luò)關(guān)系強(qiáng)度與組織學(xué)習(xí)的關(guān)系。近些年來，一些學(xué)者關(guān)于網(wǎng)絡(luò)關(guān)系強(qiáng)度對(duì)于組織學(xué)習(xí)的影響做了一些研究，根據(jù)這些研究，發(fā)現(xiàn)其中存在兩種不同的觀點(diǎn)。一是強(qiáng)關(guān)系促進(jìn)組織學(xué)習(xí)，二是弱關(guān)系促進(jìn)組織學(xué)習(xí)。這主要是沒有將組織學(xué)習(xí)進(jìn)行分類型討論，實(shí)際上，根據(jù)March（1991）研究表明，組織學(xué)習(xí)存在探索式學(xué)習(xí)和利用式學(xué)習(xí)兩大類。網(wǎng)絡(luò)關(guān)系的強(qiáng)弱對(duì)于不同類型的組織學(xué)習(xí)存在不同的影響，弱關(guān)系促進(jìn)探索式學(xué)習(xí)，而強(qiáng)關(guān)系促進(jìn)利用式學(xué)習(xí)。

根據(jù)組織學(xué)習(xí)的相關(guān)理論可知，對(duì)于一個(gè)企業(yè)來說，探索式學(xué)習(xí)和利用式學(xué)習(xí)是完全不一樣的，它們所面對(duì)的問題也是有很大差別的。探索式學(xué)習(xí)所面對(duì)的問題往往是之前沒接觸過的，沒有相關(guān)的知識(shí)基礎(chǔ)，沒有問題的答案，是一個(gè)全新的話題。而利用式學(xué)習(xí)所面對(duì)的是之前就存在的，因而存在一定的理論基礎(chǔ)，相關(guān)的知識(shí)成果，企業(yè)內(nèi)部的成員就可以直接共享相關(guān)知識(shí)，互相補(bǔ)充，互相利用。

根據(jù)相關(guān)研究可知，弱關(guān)系比強(qiáng)關(guān)系更具有成本優(yōu)勢和信息優(yōu)勢，這是因?yàn)閺?qiáng)關(guān)系比較強(qiáng)調(diào)不同企業(yè)之間直接的交流，它很注重在關(guān)系網(wǎng)這一領(lǐng)域的發(fā)展，會(huì)為了企業(yè)間友好關(guān)系的發(fā)展投入一定的資本，這就增加了相關(guān)成本。而弱關(guān)系就不是很注重這個(gè)，它們只強(qiáng)調(diào)市場化的交易原則，不會(huì)為了關(guān)系的發(fā)展投入一定的資金，沒有投入就沒有風(fēng)險(xiǎn)，因此，弱關(guān)系就沒有投資的風(fēng)險(xiǎn)。綜上可知，弱關(guān)系比強(qiáng)關(guān)系更能節(jié)約資本和時(shí)間，因而，他們就可以直接利用這些資源和時(shí)間跟不同的企業(yè)進(jìn)行探索式學(xué)習(xí)，吸收知識(shí)和信息。而強(qiáng)關(guān)系就可以充分利用之前建立的關(guān)系網(wǎng)，將知識(shí)進(jìn)行互相傳遞，得到不同企業(yè)成員的認(rèn)可，以達(dá)到知識(shí)共享，從而促進(jìn)利用式學(xué)習(xí)。

2.組織學(xué)習(xí)與技術(shù)創(chuàng)新績效的關(guān)系。通過利用式學(xué)習(xí)，高新技術(shù)企業(yè)將原有的技術(shù)和產(chǎn)品市場知識(shí)積累，原有的技術(shù)和市場經(jīng)驗(yàn)得以推廣，從而提高了企業(yè)的技術(shù)創(chuàng)新績效。由此可見，利用式學(xué)習(xí)降低了錯(cuò)誤解決問題的可能性，并且很大程度上避免了失誤。它為現(xiàn)有知識(shí)的融合和重組提供了更多的機(jī)會(huì)，并且可能產(chǎn)生新的見解，從而有利于企業(yè)的技術(shù)創(chuàng)新。

探索式學(xué)習(xí)可以提高技術(shù)創(chuàng)新績效，因?yàn)樗梢允蛊髽I(yè)員工接受更新的知識(shí)，并通過交流對(duì)新知識(shí)進(jìn)行整理匯總，得到更有價(jià)值的知識(shí)。通過對(duì)技術(shù)創(chuàng)新提供新的見解，在產(chǎn)品特性等方面接受外部的有價(jià)值信息，探索式學(xué)習(xí)將會(huì)使企業(yè)在技術(shù)創(chuàng)新方面包含更多的新穎想法，這就會(huì)使自己的創(chuàng)新成果區(qū)別于競爭對(duì)手的產(chǎn)品，給顧客創(chuàng)造更多的價(jià)值。

3.網(wǎng)絡(luò)關(guān)系強(qiáng)度與技術(shù)創(chuàng)新績效的關(guān)系。網(wǎng)絡(luò)關(guān)系的強(qiáng)弱是影響企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新績效的重要因素，但是根據(jù)歷年來的研究可知，強(qiáng)關(guān)系更有利于技術(shù)創(chuàng)新還是弱關(guān)系更有利于技術(shù)創(chuàng)新，存在的爭議比較大。Larson等學(xué)者認(rèn)為強(qiáng)聯(lián)結(jié)形成的信任關(guān)系有利于隱性知識(shí)的傳遞，與技術(shù)創(chuàng)新績效正相關(guān)。

強(qiáng)關(guān)系有助于企業(yè)間的交流，可以促進(jìn)不同企業(yè)間進(jìn)行知識(shí)和信息的共享以及深入的溝通，這種企業(yè)之間的合作可促使企業(yè)快速掌握市場的細(xì)微變化，從而及時(shí)的改變自身的發(fā)展以適應(yīng)市場的變化。為建立企業(yè)與企業(yè)之間的關(guān)系，會(huì)投入一定的資產(chǎn)。通過網(wǎng)絡(luò)的相關(guān)作用，這些會(huì)在一定程度上提高企業(yè)對(duì)于其他企業(yè)相關(guān)領(lǐng)域隱形知識(shí)的吸收和技術(shù)的掌握，這是強(qiáng)關(guān)系對(duì)創(chuàng)新的促進(jìn)作用的具體體現(xiàn)，有利于企業(yè)掌握網(wǎng)絡(luò)中知識(shí)和能力利用的新方法。同時(shí)，由于強(qiáng)關(guān)系存在投入成本，會(huì)排斥關(guān)系網(wǎng)之外的進(jìn)入者，減少了與網(wǎng)絡(luò)外之間的交流以及資源的交換機(jī)會(huì)，在短期內(nèi)能夠使企業(yè)在生產(chǎn)經(jīng)營中實(shí)現(xiàn)收益的增加。因此，強(qiáng)關(guān)系能夠促進(jìn)技術(shù)創(chuàng)新績效。

三、結(jié)論

網(wǎng)絡(luò)關(guān)系強(qiáng)度、組織學(xué)習(xí)與技術(shù)創(chuàng)新績效之間關(guān)系密切，互相影響。網(wǎng)絡(luò)關(guān)系強(qiáng)度對(duì)于技術(shù)創(chuàng)新績效有著正向相關(guān)關(guān)系；網(wǎng)絡(luò)關(guān)系強(qiáng)度對(duì)于利用式學(xué)習(xí)有著正向相關(guān)關(guān)系，對(duì)于探索式學(xué)習(xí)有著負(fù)向相關(guān)關(guān)系；利用式學(xué)習(xí)對(duì)于技術(shù)創(chuàng)新績效有著正向相關(guān)關(guān)系，探索式學(xué)習(xí)對(duì)于技術(shù)創(chuàng)新績效有著正向相關(guān)關(guān)系。綜上所述，對(duì)于我國企業(yè)來說，提高技術(shù)創(chuàng)新績效，在加強(qiáng)與網(wǎng)絡(luò)中其他成員合作關(guān)系建設(shè)，提升自身網(wǎng)絡(luò)地位的同時(shí)，也要擴(kuò)大自身規(guī)模，不斷吸收知識(shí)，提升學(xué)習(xí)能力，以提高合作關(guān)系效率，從而達(dá)到提高企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新績效的目的。

參考文獻(xiàn)：

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機(jī)關(guān)學(xué)習(xí)制度范文第3篇

【論文摘要】股東有限責(zé)任乃現(xiàn)代公司法律之基石。股東有限責(zé)任是股東僅以出資為限對(duì)公司承擔(dān)責(zé)任，并非股東無賁。也并非公司有限責(zé)任。公司法人人格否認(rèn)并不必然導(dǎo)致股東有限責(zé)任之例外適用。我國公司法應(yīng)堅(jiān)持股東有限責(zé)為原則，公司法人人格否認(rèn)為例外。本文主要從股東有限責(zé)任制度的經(jīng)濟(jì)分析的角度進(jìn)行論述，并對(duì)股東有限責(zé)任制的完善提出建議。

股東有限責(zé)任，是股東僅以出資額為限對(duì)公司承擔(dān)責(zé)任，而非公司的有限責(zé)任。公司以公司的全部資產(chǎn)對(duì)外承擔(dān)責(zé)任。公司是獨(dú)立于股東之外的獨(dú)立參加活動(dòng)、承擔(dān)責(zé)任的法律主體，具有法人人格。換言之，作為各自獨(dú)立的主體，股東所負(fù)有限責(zé)任的承擔(dān)對(duì)象是公司，公司獨(dú)立責(zé)任的承擔(dān)對(duì)象是股東、債權(quán)人和其他利益相關(guān)主體。

一、股東有限責(zé)任的法律特征

有限責(zé)任是指股東有限責(zé)任，是股東僅以出資額為限間接對(duì)公司債務(wù)承擔(dān)責(zé)任。在公司法律制度中，只有公司具有獨(dú)立的法人人格。股東僅是隱藏在公司法人背后的出資人而已，其不具有主體資格。筆者以為，股東有限責(zé)任的法律特征主要有以下四個(gè)方面：第一，有限責(zé)任是指股東的有限責(zé)任。公司是獨(dú)立的法人，法人以其獨(dú)立的所有財(cái)產(chǎn)對(duì)外承擔(dān)責(zé)任。也就是說，公司承擔(dān)責(zé)任不是以其章程規(guī)定的注冊(cè)資本的數(shù)額承擔(dān)責(zé)任，而是以其應(yīng)該承擔(dān)責(zé)任時(shí)的現(xiàn)有財(cái)產(chǎn)承擔(dān)責(zé)任，這時(shí)的現(xiàn)有財(cái)產(chǎn)很有可能比注冊(cè)資本要低或者高，高出注冊(cè)資本的部分同樣得被用來償還債務(wù)。而股東的責(zé)任就是從公司成立時(shí)就被量化的責(zé)任。第二，公司與股東各自獨(dú)立。公司是具有獨(dú)立人格的個(gè)體，公司以個(gè)人名義獨(dú)立參加活動(dòng)，公司對(duì)股東的出資財(cái)產(chǎn)享有獨(dú)立的、排他的權(quán)利。公司的資產(chǎn)與股東的個(gè)人資產(chǎn)是相分離的，公司以其全部資產(chǎn)對(duì)其債務(wù)承擔(dān)責(zé)任，而不是由股東承擔(dān)。第三，股東以其出資額為限對(duì)公司承擔(dān)責(zé)任。公司的財(cái)產(chǎn)與股東的個(gè)人財(cái)產(chǎn)是相分離的，公司債務(wù)責(zé)任不直接歸于股東個(gè)人。公司債權(quán)人只能向公司請(qǐng)求債權(quán)而非股東，公司須以其全部資產(chǎn)對(duì)外承擔(dān)責(zé)任，而股東只以其出資額為限，不可能失去比出資額更多。第四，股東有限責(zé)任與公司的人格獨(dú)立相互支撐。公司具有獨(dú)立的人格。因此，由于公司才存在的股東不可能具有獨(dú)立人格。也正因?yàn)楣镜莫?dú)立人格才使股東責(zé)任為有限責(zé)任。如果股東不再承擔(dān)有限責(zé)任，也就是公司法人人格被否認(rèn)。比如合伙，不具有法人資格合伙人承擔(dān)無限連帶責(zé)任。

二、股東有限責(zé)任制度的經(jīng)濟(jì)學(xué)分析

成本、收益、效率等是經(jīng)濟(jì)學(xué)中的重要概念。從成本與收益的角度或效率的角度分析問題，很多問題便會(huì)迎刃而解，使人們易于接受。比如合伙企業(yè)形式發(fā)展的限制；一人有限責(zé)任公司在我國新公司法條文中予以明文規(guī)定；新公司法強(qiáng)調(diào)公司的社會(huì)責(zé)任；有限責(zé)任公司最低注冊(cè)資本降至3萬元并可分期繳足等，這些制度上的變化與完善，都說明了有效率的公司法才是最有力的公司法。以下擬從經(jīng)濟(jì)學(xué)角度分析股東有限責(zé)任制度。

(一)股東有限責(zé)任制度的功能分析

第一，股東有限責(zé)任制度是企業(yè)形式發(fā)展的動(dòng)力，鼓勵(lì)投資；聚集資本與合伙相比，普通合伙人承擔(dān)的是無限連帶責(zé)任。也就是說，合伙債權(quán)人可以向任何一個(gè)合伙人主張全部債權(quán)。這便將有錢的合伙人置于不利之地，而使那些沒錢的合伙人有機(jī)會(huì)逃避承擔(dān)債務(wù)。合伙本來就是建立在合伙人相互信任的基礎(chǔ)上的，如果合伙人在人伙時(shí)就心存此念，那么有錢的合伙人肯定不愿意入伙。這便會(huì)大大限制合伙企業(yè)的規(guī)模，合伙人的人數(shù)也一定不會(huì)很多，這就注定了合伙的低級(jí)企業(yè)發(fā)展形式的角色。即使新合伙企業(yè)法肯定了有限合伙形式，但合伙的無限責(zé)任還是要求有限合伙企業(yè)最少有一個(gè)普通合伙人。無限責(zé)任的束縛必將有礙企業(yè)形式的發(fā)展。無限責(zé)任要求股東或合伙人對(duì)公司債務(wù)負(fù)無限連帶清償責(zé)任，這種巨大的風(fēng)險(xiǎn)不僅限制企業(yè)的發(fā)展、擴(kuò)大，而且，對(duì)富有實(shí)力的投資者還可能造成不公平。有限責(zé)任克服了無限責(zé)任的弊端，股東僅以其出資額為限對(duì)公司債務(wù)負(fù)責(zé)，分散了風(fēng)險(xiǎn)，股東投資安全得到了保障，因而有利于大規(guī)模吸收社會(huì)資金，使得公司擁有眾多股東，籌集到巨額資本，有利于發(fā)展規(guī)模經(jīng)濟(jì)。因而，有限責(zé)任制度鼓勵(lì)投資，當(dāng)屬其最主要的功能。有限責(zé)任消除了股東的后顧之憂，使股東對(duì)自己的風(fēng)險(xiǎn)有量上的認(rèn)識(shí)，公司債務(wù)不會(huì)牽涉到股東投資之外的財(cái)產(chǎn)，最大限度地保障了股東的投資收益和投資安全。從而公司可以大量地吸收資本。資本是公司的基礎(chǔ)，有了充足的資本才能談發(fā)展與收益。

第二，有限責(zé)任提高公司效率，降低公司交易成本。有限責(zé)任由于量化了股東未來風(fēng)險(xiǎn)，因此大大降低了股東控制經(jīng)理行為的意義，也就是說大大降低了經(jīng)營權(quán)與公司所有權(quán)分離的費(fèi)用，這當(dāng)然有利于兩權(quán)的分離。有限責(zé)任促成的資本市場，可以使有能力的經(jīng)營者最大限度地利用公司聚集的資本為投資者謀取最大利益，從而有利于發(fā)展規(guī)模經(jīng)濟(jì)。在無限責(zé)任制下，經(jīng)營權(quán)與所有權(quán)是由合伙人一并行使的，這樣，經(jīng)營人也就是合伙人，不敢也沒有機(jī)會(huì)放手經(jīng)營。很顯然，資本的效用也不會(huì)得以最大體現(xiàn)。有限責(zé)任大大降低了公司交易成本。也就是說降低了公司自身有效存在運(yùn)行成本和公司法人與其他利益相關(guān)主體間的行為成本。首先在公司自身有效存在的運(yùn)行成本方面，由于有限責(zé)任使股東各自以自己的出資額為限對(duì)公司承擔(dān)責(zé)任，股東之間責(zé)任無關(guān)聯(lián)，因此，出資多的股東便沒必要理會(huì)出資少的股東的資信情況，也沒必要擔(dān)心其他小出資者會(huì)不利于自己的財(cái)產(chǎn)。這在無限責(zé)任情況下是不可能的，合伙人之問需要充分了解資信情況以后才可能共同成立合伙組織，稍有不慎，便會(huì)置自己的財(cái)產(chǎn)于不利之地。另一方面，由于有限責(zé)任量化了股東未來的風(fēng)險(xiǎn)，股東控制經(jīng)營的意義大大降低，從而節(jié)約了成本。“問題的通則是導(dǎo)致人采取仿佛在使委托人的福利實(shí)現(xiàn)最大化的行為，它存在于所有的組織和合作努力中?！雹芙?jīng)理人自身就有很高的積極性去經(jīng)營公司，從而最大程度地行使公司的剩余索取權(quán)。其次，在公司外部成本方面，有限責(zé)任的保障是公司獨(dú)立人格。公司獨(dú)立法人資格的存在使公司的債務(wù)人在討債過程中只針對(duì)公司法人一個(gè)便足夠，沒必要再針對(duì)股東(但有例外情況，下文詳述)。這與合伙債權(quán)人需要向各個(gè)合伙人討債有明顯的成本節(jié)約優(yōu)勢。另外，有限責(zé)任直接向與公司訂立合同的主體表明公司的責(zé)任承擔(dān)方式，這就在無形中降低了公司的交易成本。

第三，優(yōu)化資源配置“由于股東有限責(zé)任吸引的投資者數(shù)量最多，股權(quán)分散，加之投資風(fēng)險(xiǎn)的有限性，促使公司的股份可以自由轉(zhuǎn)讓，以融通資本為主要功能的證券市場得以形成與發(fā)展。公司通過證券市場融通資本，促使了社會(huì)資源的優(yōu)化配置?！?/p>

(二)股東有限責(zé)任制度的局限性

股東有限責(zé)任在某種程度上降低了股東的成本和信息成本，但卻有可能引發(fā)人的道德風(fēng)險(xiǎn)。因此股東有限責(zé)任制度的局限性也不容易忽視。主要總結(jié)有以下三個(gè)方面：

第一，股東有限責(zé)任在有些情況下對(duì)債權(quán)人不公平，公司可以在法人人格的擋箭牌下，出現(xiàn)濫設(shè)法人、抽逃出資等不法行為，卻只承擔(dān)出資額為限的有限責(zé)任。股東濫用股東權(quán)利，侵犯其他中小股東的情形也不少見，使得公司及其股東獲益卻將風(fēng)險(xiǎn)轉(zhuǎn)嫁給社會(huì)公眾。許多情況都是在有限責(zé)任制度下存在的。首先，股東有權(quán)經(jīng)營管理公司，當(dāng)管理不善致使虧損時(shí)，外部債權(quán)人只能向公司法人討債，對(duì)其資產(chǎn)之外的部分便由債權(quán)人自己承擔(dān)，而股東卻不承受此風(fēng)險(xiǎn)。這是顯失公平的。其次，股東比外部債權(quán)人處于優(yōu)勢。

股東可能會(huì)濫用公司人格，使公司存續(xù)下去，債權(quán)人利益便無法保障。再次，在公司集團(tuán)中，母公司利用其在子公司中的控股地位，可以無視子公司的利益，把子公司當(dāng)作推銷商業(yè)政策的工具。這對(duì)子公司債權(quán)人的利益是極不公平的。

第二，股東有限責(zé)任對(duì)受害人不公平有限責(zé)任使股東躲在公司法人的背后，不對(duì)債務(wù)承擔(dān)責(zé)任。公司只以其全部資產(chǎn)承擔(dān)責(zé)任。當(dāng)今環(huán)境侵權(quán)、產(chǎn)品侵權(quán)的事件屢屢發(fā)生，每每侵權(quán)賠償數(shù)額都很巨大，就算再大規(guī)模的公司也難以承受。但受害人又無公司之外的請(qǐng)求對(duì)象。

第三，引發(fā)道德風(fēng)險(xiǎn)有限責(zé)任制度中潛在著“道德風(fēng)險(xiǎn)因素”。股東以公司法人的獨(dú)立人格為擋箭牌，濫用股東有限責(zé)任，損害公司和債權(quán)人的利益，尤其是在法律對(duì)股東約束不足的情況下，股東出資不足、抽逃資金、規(guī)避法律義務(wù)等濫用公司獨(dú)立人格和股東有限責(zé)任的現(xiàn)象便會(huì)出現(xiàn)。

機(jī)關(guān)學(xué)習(xí)制度范文第4篇

隨著高校教育改革的深入，高校學(xué)籍管理工作的重要性日漸突出。特別是現(xiàn)代化技術(shù)的應(yīng)用，學(xué)籍管理人員專業(yè)素質(zhì)就要隨之提高，以強(qiáng)化高校的人才管理。這就需要學(xué)籍管理制度要適應(yīng)時(shí)代的發(fā)展，從人才培養(yǎng)的角度出發(fā)，樹立人本理念，將服務(wù)意識(shí)、創(chuàng)新意識(shí)滲入其中，并將法治建設(shè)運(yùn)用于高校學(xué)籍管理工作中，以完善學(xué)籍管理制度。

關(guān)鍵詞:

學(xué)籍管理;制度;人才培養(yǎng);人本理念

我國進(jìn)入到進(jìn)一步深化改革開放的發(fā)展時(shí)期，高校管理呈現(xiàn)出日新月異的變化。特別是我國政治、經(jīng)濟(jì)、文化的變革，對(duì)于高校教育的發(fā)展具有重大的影響力。高校要適應(yīng)時(shí)展的要求提高教育管理質(zhì)量，就要發(fā)揮學(xué)籍管理的杠桿作用，將學(xué)籍管理作為管理育人的重要條件，以確保在學(xué)籍管理獲得預(yù)期成效的同時(shí)，真正意義地實(shí)現(xiàn)高校學(xué)籍管理改革［1］。加大學(xué)籍管理制度，就意味著對(duì)學(xué)籍管理制度根據(jù)高校改革的需要進(jìn)行調(diào)整和完善的同時(shí)，還要樹立與時(shí)俱進(jìn)的創(chuàng)新思想，將人本理念滲入到學(xué)籍管理制度中，以促進(jìn)高校人才培養(yǎng)。

一、學(xué)籍管理制度的涵義

(一)學(xué)籍管理制度的概念界定

學(xué)籍管理制度是對(duì)學(xué)生由入學(xué)到畢業(yè)全過程實(shí)施制度化管理的制度體現(xiàn)，屬于是高校教育行為的規(guī)范性文件，關(guān)乎到學(xué)生身心發(fā)展。其中所涵蓋的內(nèi)容包括學(xué)籍管理、校園管理秩序、開展校外活動(dòng)以及獎(jiǎng)懲辦法等等。

(二)學(xué)籍管理制度的特點(diǎn)

1．學(xué)籍管理制度的權(quán)威性

學(xué)籍管理制度具有權(quán)威性，其作為一項(xiàng)學(xué)校管理制度，以法律的形式向高校延伸，在此基礎(chǔ)上將高效教育管理框架建立起來?？梢?，學(xué)籍管理制度并不是簡單的規(guī)范性約束機(jī)制，而是對(duì)于群體或者個(gè)體的不同需求發(fā)揮協(xié)調(diào)作用，以做到有章可循。學(xué)籍管理制度的權(quán)威性還體現(xiàn)在對(duì)學(xué)生學(xué)習(xí)及生活行為的約束力上，通過制度化管理，對(duì)學(xué)生以監(jiān)督、規(guī)范，以發(fā)揮其約束性管理機(jī)制。同時(shí)還要起到制度化引導(dǎo)作用，如果學(xué)會(huì)違反制度規(guī)定，就要接受懲罰［2］。

2．學(xué)籍管理制度的教育性

學(xué)籍管理制度所發(fā)揮的作用，是適應(yīng)高校管理價(jià)值理念，對(duì)學(xué)生發(fā)揮教育引導(dǎo)的作用，所以，其具有教學(xué)管理服務(wù)性特點(diǎn)。學(xué)籍管理制度的教育引導(dǎo)性體現(xiàn)在學(xué)生管理的基本途徑和所采用的方式上。對(duì)于沒有正確接受學(xué)籍管理制度引導(dǎo)的學(xué)生，要采用懲戒的方式對(duì)學(xué)生違反紀(jì)律的行為以處分，以警示在校學(xué)生對(duì)學(xué)籍管理制度的重視，其最終目的是規(guī)范教育。特別是在學(xué)會(huì)行為規(guī)范方面，要求學(xué)生要按照公共規(guī)則行事。在校的每一名學(xué)生在學(xué)籍管理制度面前，都要無一例外地嚴(yán)格遵守［3］。

二、學(xué)籍管理制度需與時(shí)俱進(jìn)

(一)學(xué)籍管理制度中要強(qiáng)調(diào)學(xué)生的主觀能動(dòng)性

傳統(tǒng)的學(xué)籍管理制度中，所強(qiáng)調(diào)的是學(xué)籍所發(fā)揮的監(jiān)督功能，注重對(duì)學(xué)生的學(xué)習(xí)紀(jì)律以及考試進(jìn)行管理。目前國家重點(diǎn)強(qiáng)調(diào)素質(zhì)教育，就需要改善學(xué)籍管理制度中的有關(guān)內(nèi)容，以創(chuàng)新思維做好學(xué)籍管理工作，以做到與時(shí)俱進(jìn)地探索出符合現(xiàn)代化高校發(fā)展的學(xué)籍管理途徑。在學(xué)籍管理制度中，要特別強(qiáng)調(diào)學(xué)生的主觀能動(dòng)性，以更好地發(fā)揮學(xué)籍管理工作的教育功能，并對(duì)于學(xué)生具有正向引導(dǎo)作用［4］。要將學(xué)籍管理制度的時(shí)代性體現(xiàn)出來，就要從當(dāng)前的教育新環(huán)境出發(fā)，結(jié)合大學(xué)生新的思想觀念和新的思維方式，對(duì)于學(xué)籍管理制度以重新審視，并處理好監(jiān)督管理與教育激勵(lì)之間的關(guān)系，實(shí)施學(xué)籍管理制度的創(chuàng)新，發(fā)揮學(xué)籍管理的主動(dòng)性。學(xué)籍管理人員要本著服務(wù)意識(shí)，明確學(xué)籍管理僅僅是高校管理中的一個(gè)環(huán)節(jié)、一種手段，而不是目的，其關(guān)鍵在于更好地培養(yǎng)人才。

(二)學(xué)籍管理制度中要注重人才培養(yǎng)

高校大學(xué)生具有極大的可塑性，他們對(duì)于周圍環(huán)境中的各種事物都極為敏感，由此而形成的觀念意識(shí)成為他們價(jià)值觀、人生觀和世界觀形成的基礎(chǔ)。處于市場經(jīng)濟(jì)環(huán)境中，受到世界經(jīng)濟(jì)文化的沖擊，大學(xué)生由于缺乏良好的判斷力而接受更多的負(fù)面信息，對(duì)于其觀念意識(shí)產(chǎn)生負(fù)面影響。這就需要將人本觀念引入到學(xué)籍管理中，從當(dāng)代大學(xué)生的個(gè)性特點(diǎn)角度出發(fā)，對(duì)學(xué)生以教育，還要通過宣傳途徑引導(dǎo)大學(xué)生樹立正確的價(jià)值觀，以提升大學(xué)生的自我保護(hù)意識(shí)和社會(huì)責(zé)任感。在學(xué)籍管理制度中，強(qiáng)調(diào)服務(wù)性就是從人才培養(yǎng)的角度出發(fā)，將學(xué)籍管理制度中的各項(xiàng)要素以多種活動(dòng)形式展開，幫助大學(xué)生明確人生目標(biāo)，責(zé)無旁貸地完成學(xué)習(xí)任務(wù)［5］。當(dāng)學(xué)生專心于自己的學(xué)業(yè)，并注重自我角度時(shí)，違規(guī)違紀(jì)的現(xiàn)象就會(huì)自然減少。學(xué)籍管理制度要做到與時(shí)俱進(jìn)，就要注重新形勢下教育環(huán)境的改變，從以人為本的理念出發(fā)，根據(jù)學(xué)生的個(gè)性特點(diǎn)展開教育，以潛移默化地引導(dǎo)學(xué)生的主觀能動(dòng)性，提高高校學(xué)生管理質(zhì)量。

三、學(xué)籍管理人員需與時(shí)俱進(jìn)

(一)學(xué)籍管理人員要強(qiáng)化服務(wù)意識(shí)和法制意識(shí)

學(xué)籍管理工作具有嚴(yán)肅性特點(diǎn)，要按照國家相關(guān)法律法規(guī)展開。由于學(xué)籍管理工作關(guān)乎到學(xué)生的前途，因此要在強(qiáng)化學(xué)籍管理人員的服務(wù)意識(shí)的同時(shí)，還要增強(qiáng)法律意識(shí)，以使學(xué)籍管理制度更為健全。

1．學(xué)籍管理工作人員要加強(qiáng)服務(wù)意識(shí)

加強(qiáng)學(xué)籍管理工作人員的服務(wù)意識(shí)是適應(yīng)目前高校教育管理要求，對(duì)學(xué)生主體地位的充分尊重。在高校管理工作中，學(xué)籍管理作為一項(xiàng)業(yè)務(wù)性工作，其工作的展開要發(fā)揮時(shí)效性，就需要學(xué)籍管理人員本著“全心全意為人民服務(wù)”的宗旨，將繁雜的工作秩序化展開。學(xué)籍管理可以具體到學(xué)生從入學(xué)到畢業(yè)的點(diǎn)點(diǎn)滴滴，特別是學(xué)會(huì)將考試成績錄入，不能有絲毫的差錯(cuò)，因此，學(xué)籍管理人員要具有較高的職業(yè)責(zé)任感做好每一項(xiàng)工作［6］。

2．學(xué)籍管理工作人員要加強(qiáng)法制意識(shí)

黨的十八屆四中全會(huì)強(qiáng)調(diào)依法治國，高校的學(xué)籍管理人員就要增強(qiáng)法制意識(shí)，做到學(xué)籍管理制度健全而規(guī)范，各項(xiàng)程序符合管理規(guī)定，以符合依法治校的要求。學(xué)籍管理制度建設(shè)的規(guī)范化是學(xué)籍管理法制化的基本要求，一方面維護(hù)了學(xué)籍管理制度的嚴(yán)肅性和權(quán)威性，另一方面對(duì)學(xué)生的合法權(quán)益以保護(hù)。“依法治校”在高校管理工作中的實(shí)施，使高校具有了自主辦學(xué)、自主招生、自主管理的權(quán)力，在法律監(jiān)督下，學(xué)校對(duì)于學(xué)生具有懲處的權(quán)力。在對(duì)學(xué)生進(jìn)行懲處的時(shí)候，要做到廣泛調(diào)查、接受申辯和抗辯，并以書面形式出示處分決定。對(duì)于嚴(yán)重違反校規(guī)的學(xué)生，學(xué)校做出退學(xué)等嚴(yán)重的處分，要求按照規(guī)定層層審批，并在主管高教部門備案［7］。由此可見，學(xué)籍管理是一項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)化過程。

(二)學(xué)籍管理人員要具有較高的專業(yè)素質(zhì)

學(xué)籍管理人員素質(zhì)直接關(guān)乎到學(xué)籍管理的質(zhì)量，并影響到高校教育管理質(zhì)量。從目前高校學(xué)籍管理人員的綜合素質(zhì)來看，不僅人員配備不足，而且多數(shù)人員沒有接受過專業(yè)培訓(xùn)。隨著高校管理體制改革，就要根據(jù)高校發(fā)展需要對(duì)學(xué)籍管理工作人員有計(jì)劃地開展培訓(xùn)，以作為超前人才投資。通過培訓(xùn)，不僅要提升學(xué)籍管理人員的專業(yè)技術(shù)水平，更要引導(dǎo)學(xué)籍管理人員注重自身的綜合素質(zhì)，特別是信息技術(shù)滲入到學(xué)籍管理工作中，更需要學(xué)籍管理人員具備自我提升信息技術(shù)處理意識(shí)，從業(yè)務(wù)能力的角度出發(fā)，不斷地提升自己，能夠運(yùn)用計(jì)算機(jī)技術(shù)處理各項(xiàng)學(xué)籍管理工作內(nèi)容。

四、在工作中培養(yǎng)以人為本的意識(shí)

(一)強(qiáng)化學(xué)籍管理制度的適應(yīng)性，促進(jìn)人才培養(yǎng)

處于知識(shí)經(jīng)濟(jì)時(shí)代的今天，信息技術(shù)促進(jìn)了國內(nèi)外高校間的交流，使得國內(nèi)高等教育改革向國際化方向發(fā)展，學(xué)籍管理制度適應(yīng)高校發(fā)展需求而多樣化展開。在高校的人才培養(yǎng)中，學(xué)籍管理制度占有重要的地位，人才校際間的流動(dòng)，由于學(xué)籍的存在而實(shí)現(xiàn)了高等教育資源上的交融，使得人才轉(zhuǎn)換相互銜接，實(shí)現(xiàn)了高校間的互惠共贏。目前，我國的高等教育逐漸向大眾轉(zhuǎn)型，高校的教育意識(shí)也要相應(yīng)地做出調(diào)整。學(xué)籍管理人員要從學(xué)生個(gè)性化發(fā)展的角度出發(fā)，發(fā)揮學(xué)籍管理“引導(dǎo)”作用，這就需要學(xué)籍管理人員轉(zhuǎn)變管理理念，在學(xué)生知識(shí)、素質(zhì)和能力結(jié)構(gòu)等構(gòu)建方面發(fā)揮重要的作用［8］。

(二)建立開放性的學(xué)籍管理制度，尊重學(xué)生的學(xué)習(xí)自由

隨著我國高校管理逐漸與國際并軌，在教育制度上也發(fā)生了很大改變。傳統(tǒng)的百分制學(xué)科考試制度逐漸轉(zhuǎn)為學(xué)分制，這對(duì)于我國的高等教育而言，是一次質(zhì)的飛躍。學(xué)分制意味著學(xué)生具有學(xué)習(xí)的自由，可以從個(gè)體發(fā)展的角度出發(fā)選擇知識(shí)，構(gòu)建符合自己的知識(shí)結(jié)構(gòu)。高校的學(xué)籍管理制度改革，就要在尊重學(xué)生個(gè)性發(fā)展的同時(shí)，還要從適應(yīng)社會(huì)需要的角度出發(fā)，對(duì)學(xué)生以引導(dǎo)。這就意味著，高校學(xué)籍管理制度要尊重工作實(shí)際，樹立多樣化人才培養(yǎng)觀念，注重學(xué)生的終身教育，并在學(xué)籍管理的運(yùn)行機(jī)制中有所體現(xiàn)，以使高校的學(xué)籍管理制度擺脫剛性管理，逐漸向以人為本的柔性過渡，其目標(biāo)是提升人才培養(yǎng)能力。在高校的管理工作中，學(xué)籍管理是貫穿于高校人才培養(yǎng)的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，是教務(wù)管理的重要組成部分。高校要提高教學(xué)質(zhì)量，就要對(duì)于學(xué)生的基本情況、教師的教學(xué)情況以及教學(xué)管理秩序有所掌握。隨著高校教育改革，學(xué)籍管理人員要與時(shí)俱進(jìn)，本著以人為本的服務(wù)理念，對(duì)學(xué)籍以主動(dòng)管理，充分地發(fā)揮學(xué)籍管理制度對(duì)學(xué)生的引導(dǎo)性作用，以穩(wěn)定高校教育環(huán)境，促進(jìn)高校發(fā)展。

作者：保琳 單位：江蘇省南通大學(xué)理學(xué)院

參考文獻(xiàn):

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［4］丁曉麗．新形勢下高校學(xué)籍管理存在的問題及對(duì)策［J］．揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(高教研究版)，2008.12(6):72－75．

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機(jī)關(guān)學(xué)習(xí)制度范文第5篇

【關(guān)鍵詞】 蜂毒素 內(nèi)皮 血管新生 血管生成抑制劑

0 引言

血管新生在人體正常發(fā)育以及許多疾病的發(fā)生與發(fā)展中起著重要作用，尤其與腫瘤的形成及轉(zhuǎn)移關(guān)系密切［1］. 新生血管保證了腫瘤持續(xù)生長所需營養(yǎng)物質(zhì)的有效供給. 抑制腫瘤的血管新生，切斷腫瘤生長和轉(zhuǎn)移所依賴的"命脈"已經(jīng)成為當(dāng)前治療腫瘤的重要策略之一［2］. 蜂毒素是從蜂毒中提取的一種小分子肽類物質(zhì)，既往的研究表明，它對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的增殖具有較強(qiáng)的抑制作用［3-4］，是一個(gè)十分具有應(yīng)用前景的抗腫瘤天然藥物，但其作用機(jī)制尚不明確. 本研究通過體外模擬血管生成，觀察蜂毒素對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的抑制作用，并探討其作用機(jī)制.

1 材料和方法

1.1 材料 蜂毒素(批號(hào)：104K4016)和MTT (美國Sigma公司)；沙利度胺(thalidomide， TLD) (批號(hào)：0601181，常州制藥廠有限公司)；Transwell小室(美國Corning公司)；基質(zhì)膠(美國BectonDickinson公司)；人內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(vascular endothelial growth factor， VEGF)和堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basic fibroblast growth factor， bFGF)定量ELISA試劑盒(美國R&D systems公司)；經(jīng)典總RNA提取試劑盒，βactin，VEGF和bFGF引物(上海Sangon生物工程公司)；Realtime PCR反應(yīng)試劑盒(德國Roche公司)；RNasin (美國Promega公司)；DMEM培養(yǎng)基(美國Gibco公司)；XDS1B型倒置相差顯微鏡(日本Olympus公司)；Modle 500型酶聯(lián)免疫檢測儀(美國BioRad公司)；RotorGene RG3000型熒光定量PCR儀(澳大利亞Corbet Research公司)；人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株ECV304 (中國科學(xué)院上海細(xì)胞研究所).

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng) 用含有100 mL/L熱滅活小牛血清的DMEM培養(yǎng)基在37℃，體積分?jǐn)?shù)為50 mL/L CO2，飽和濕度條件下常規(guī)培養(yǎng)，2～3 d傳代1次，實(shí)驗(yàn)用對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞.

1.2.2 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn) 取對(duì)數(shù)生長期ECV304細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液，以每孔1×104/100 μL接種于96 孔板. 在含10 mL/L熱滅活小牛血清的DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)24 h (50 mL/L CO2，37℃). 加入含不同濃度蜂毒素的完全培養(yǎng)基100 μL，對(duì)照組加等量PBS液. 每組設(shè)6個(gè)復(fù)孔，常規(guī)條件下培養(yǎng). 分別在24，48和72 h進(jìn)行MTT實(shí)驗(yàn)：每孔加入質(zhì)量濃度為5 mg/mL的MTT溶液10 μL，孵育4 h后終止培養(yǎng). 棄去上清，每孔加入二甲基亞砜(DMSO) 150 μL，振蕩10 min，酶標(biāo)儀測定A492 nm值，參比波長630 nm. 按下列公式計(jì)算蜂毒素對(duì)ECV304細(xì)胞的增殖抑制率 (Inhibition rate，IR)：IR (%)=［1-(實(shí)驗(yàn)組A值/對(duì)照組A值)］×100%，同時(shí)計(jì)算半數(shù)抑制濃度(IC50).

1.2.3 內(nèi)皮細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn) 在微孔膜小室裝置的聚碳酸脂濾膜上、下表面分別涂以5 μg基質(zhì)膠和5 μg纖維粘連蛋白，以含1 g/L牛血清白蛋白的DMEM培養(yǎng)基為遷移介質(zhì). 每個(gè)小室接種1×105/100 μL細(xì)胞. 實(shí)驗(yàn)分組：蜂毒素2，4，8 mg/L濃度組，TLD 50 mg/L濃度組及空白對(duì)照組. 常規(guī)培養(yǎng)24 h后，揭下濾膜，用棉簽拭去膜內(nèi)表面細(xì)胞，甲醇固定，HE染色. 200倍光鏡下隨機(jī)選擇5個(gè)視野，計(jì)數(shù)每個(gè)視野的細(xì)胞數(shù)目，取平均值. 以遷移細(xì)胞數(shù)目變化表示蜂毒素對(duì)ECV304細(xì)胞遷移的影響，并按下列公式計(jì)算遷移IR.遷移IR(%)=［1-(藥物組細(xì)胞的遷移數(shù)/對(duì)照組細(xì)胞的遷移數(shù))］×100%.

1.2.4 管狀結(jié)構(gòu)形成實(shí)驗(yàn) 用無血清DMEM培養(yǎng)基稀釋基質(zhì)膠至1 g/L，以每孔120 μL 包被預(yù)冷的24孔板，37℃孵育4 h使基質(zhì)聚合成膠. 每孔接種4×104/mL細(xì)胞，分組與1.2.3相同. 常規(guī)孵育24 h后，在倒置顯微鏡下于100倍觀察小管形成情況，每孔取5個(gè)視野拍照，經(jīng) Image Tools 3.0圖像分析軟件處理，以管狀結(jié)構(gòu)的面積(μm2/視野)表示蜂毒素的作用情況.

1.2.5 ELISA法檢測 VEGF和bFGF取對(duì)數(shù)生長期ECV304細(xì)胞，以1×104個(gè)/100 μL接種于96孔板，分組與1.2.3相同. 待細(xì)胞完全貼壁后，棄原培養(yǎng)基，加入含不同藥物的DMEM培養(yǎng)基250 μL，作用24 h后收集各孔上清液，在4℃條件下，1000 r/min離心5 min，吸取上清，置-20℃凍存. 測定樣本時(shí)，將凍存樣本置于室溫中融化，按VEGF和bFGF定量ELISA試劑盒操作要求，依次加樣，孵育，洗滌，酶標(biāo)儀以492 nm波長測定樣本的吸光度值.

1.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測VEGF mRNA和bFGF mRNA的表達(dá) 分別收集經(jīng)不同藥物作用24 h后的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ECV304，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測VEGF mRNA和bFGF mRNA的表達(dá)，分組與1.2.3相同. 按經(jīng)典RNA 提取試劑盒說明書提取總RNA，并用常規(guī)逆轉(zhuǎn)錄方法將mRNA轉(zhuǎn)錄成cDNA，而后根據(jù)LightCycler DNA Master SYBR GreenⅠ說明書進(jìn)行熒光定量PCR擴(kuò)增. VEGF基因的引物序列: 正義鏈: 5′ACCATGAACTTTCTGCTGTCTTG3′， 反義鏈： 5′TTCACCACTTCGTGATGATTCTG3′. bFGF 基因的引物序列： 正義鏈： 5′AAGAGCGACCCTCACATCAA3′， 反義鏈： 5′CGTTTCAGTGCCACATACCAA3′. βactin基因的引物序列： 正義鏈： 5′AGCGGGAAATCGTGCGTG3′， 反義鏈： 5′CAGGGTACATGGTGGTGCC3′. 熒光定量PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系為：模板2 μL，上、下游引物各1 mL，SybGreen PCR master mix 10 mL，dd H2O 6 mL，總反應(yīng)體積為20 mL. 反應(yīng)條件：94℃ 預(yù)變性3 min，94℃變性20 s，54℃退火20 s，72℃延伸25 s，共40個(gè)循環(huán). 最后72℃延伸10 min. 在65℃～95℃區(qū)間內(nèi)進(jìn)行溶解實(shí)驗(yàn)，并繪制溶解曲線. 目標(biāo)基因表達(dá)相對(duì)定量分析采用2-CT法［5］.

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理： 數(shù)據(jù)以x±s表示，應(yīng)用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)組間比較進(jìn)行單因素方差分析以及LSDt檢驗(yàn). P

2 結(jié)果

2.1 蜂毒素對(duì)ECV304細(xì)胞增殖的抑制作用 在0.5～16 mg/L濃度范圍內(nèi)，ECV304細(xì)胞的增殖受到明顯抑制，并且隨著蜂毒素濃度的增高其抑制作用明顯增強(qiáng). 較高濃度蜂毒素對(duì)ECV304細(xì)胞的抑制作用并未隨著作用時(shí)間的延長而增強(qiáng)(P>0.05). 計(jì)算結(jié)果顯示，24， 48， 72 h的IC50分別為5.11， 4.68， 4.40 mg/L. 提示蜂毒素對(duì)ECV304細(xì)胞的抑制存在時(shí)間平臺(tái)效應(yīng)(圖1).

2.2 蜂毒素對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移的影響 通過計(jì)數(shù)聚碳酸脂濾膜底面的細(xì)胞數(shù)目來確定蜂毒素對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移的作用. 結(jié)果顯示，蜂毒素2，4和8 mg/L濃度組及TLD 50 mg/L濃度組膜底面細(xì)胞數(shù)目分別為(19.44±6.54)， (11.17±2.85)， (4.22±1.83)和(18.28±5.29)個(gè)，明顯少于空白對(duì)照組(42.33±9.63) (P0.05)，但與蜂毒素4， 8 mg/L濃度組73.62%和90.03%相比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

2.3 蜂毒素對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞管狀結(jié)構(gòu)形成的影響 光鏡下觀察結(jié)果顯示， 蜂毒素2， 4， 8 mg/L濃度組及TLD 50 mg/L濃度組形成管狀結(jié)構(gòu)的數(shù)目明顯少于空白對(duì)照組， 且小管間距離增大， 管狀結(jié)構(gòu)不完整. 經(jīng)圖像分析量化后發(fā)現(xiàn)， 蜂毒素各濃度組及TLD組管狀結(jié)構(gòu)面積分別為(5947.22±973.72)， (1558.33±281.06)， (705.85±318.01)， (2928.92±735.67) μm2/視野，明顯低于空白對(duì)照組A：空白對(duì)照組；B：沙利度胺組；C：蜂毒素2 mg/L組；D：蜂毒素4 mg/L組；E：蜂毒素8 mg/L組.

(7828.94±1202.54) μm2/視野(P

2.4 蜂毒素對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞分泌VEGF和bFGF的影響 蜂毒素和TLD作用于ECV304細(xì)胞24 h后，細(xì)胞上清液中VEGF和bFGF含量與空白對(duì)照組比較顯著減低(P

2.5 實(shí)時(shí)熒光PCR檢測ECV304細(xì)胞中VEGF mRNA和bFGF mRNA的表達(dá) 體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ECV304經(jīng)不同濃度蜂毒素和TLD 50 mg/L處理后均可檢測到VEGF mRNA，bFGF mRNA和βactin mRNA，且VEGF mRNA和bFGF mRNA的表達(dá)明顯低于空白對(duì)照組(P0.05).

3 討論

血管生成是一個(gè)由一系列細(xì)胞因子介導(dǎo)的級(jí)鏈反應(yīng)過程，其中血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、侵襲、遷移和分化是血管生成過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)［6］. 本研究分別觀察了蜂毒素對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移和管狀結(jié)構(gòu)形成的直接效應(yīng). 我們發(fā)現(xiàn)，蜂毒素濃度為0.5～16 μg/mL時(shí)對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖生長具有明顯的抑制作用，且呈現(xiàn)出劑量依賴性. 這一結(jié)果與蜂毒素對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的增殖抑制作用相一致［3-4］. 有研究表明，蜂毒素在體外可阻止S期細(xì)胞進(jìn)入G2/M期，造成S期細(xì)胞聚集，從而阻滯腫瘤細(xì)胞周期進(jìn)程［7-8］. 同時(shí)，它還可以通過下調(diào)抗凋亡基因Bcl2的表達(dá)，影響Fas/FasL系統(tǒng)，進(jìn)而干擾細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡［9］. 研究發(fā)現(xiàn)，在濃度為2.0～8.0 μg/mL時(shí)，蜂毒素對(duì)纖維粘連蛋白誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移具有抑制作用. 在相同濃度下，蜂毒素可降低血管內(nèi)皮細(xì)胞在體外分化成管狀結(jié)構(gòu)的能力. 這表明，血管內(nèi)皮細(xì)胞在形成血管的幾個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)均不同程度受到蜂毒素的抑制，提示蜂毒素可能通過抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和分化而發(fā)揮其抗血管生成作用.

在血管生成過程中，VEGF和bFGF是最重要的兩個(gè)血管生成調(diào)控因子，它們是血管內(nèi)皮細(xì)胞生存和增殖所需要的有絲分裂原和動(dòng)力原. VEGF和bFGF通過與血管內(nèi)皮細(xì)胞表面特殊受體相結(jié)合而增加血管通透性，刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，促進(jìn)血管構(gòu)建及生成［10-11］. 為了探討蜂毒素對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞合成和分泌VEGF和bFGF是否有影響，我們檢測了血管內(nèi)皮細(xì)胞上清液中VEGF和bFGF的含量. 結(jié)果表明，蜂毒素具有抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌VEGF及bFGF的作用，而且其抑制作用存在濃度依賴關(guān)系. 而實(shí)時(shí)熒光PCR 檢測結(jié)果亦顯示，蜂毒素可下調(diào)血管內(nèi)皮細(xì)胞VEGF mRNA和bFGF mRNA的表達(dá)，下調(diào)作用隨著藥物濃度的增大而增強(qiáng). TLD對(duì)其亦有下調(diào)作用，這與文獻(xiàn)報(bào)道相一致［12］. 提示，蜂毒素可以從基因和蛋白水平影響VEGF和bFGF的表達(dá). 本研究結(jié)果說明，蜂毒素對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞體外構(gòu)建新生血管具有明顯的抑制作用. 但它在體內(nèi)是否也具有抗血管生成效應(yīng)仍需要進(jìn)一步的研究.

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